国家自然科学基金(81060178)
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
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- 相关机构：桂林医学院桂林医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西卫生厅科研项目广西壮族自治区科技攻关计划更多>>
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- Stathmin特异性siRNA表达质粒抑制stathmin的表达
- 2012年
- 目的:构建微管解聚蛋白stathmin基因的特异性siRNA质粒表达载体,以便研究stathmin在鼻咽癌中的生物学作用。方法:合成stathmin特异性DNA片段,退火形成的双链DNA片段克隆于质粒表达载体pGenesil-1.3;载体经扩增后,进行酶切和测序鉴定;采用QIAGEN公司脂质体(effectenetransfectionreagent)将鉴定后的重组质粒转入鼻咽癌CNE2细胞;RT-PCR与Westernblot检测stathmin基因表达。结果:酶切和测序分析表明,插入siRNA质粒表达载体中的DNA片段,其碱基序列和插入方向正确。表达分析证实特异性siRNA质粒表达载体能有效抑制鼻咽癌CNE2细胞中stathmin的表达。结论:构建的siRNA质粒表达载体对stathmin的表达有很好的抑制作用。
- 向秋王建红熊伟明田晶蒋伟肖胜军何晓松雷迅
- 关键词：STATHMINRNA干扰质粒基因治疗
- Stathmin表达抑制的鼻咽癌细胞系建立被引量：1
- 2012年
- 目的建立stathmin表达抑制的鼻咽癌细胞系,为stathmin在鼻咽癌中的生物学功能研究提供实验基础。方法合成stathmin特异性干扰DNA片段,将合成的干扰DNA片段克隆到siRNA质粒表达载体pGenesil-1.1,载体导入JM109菌株进行扩增,酶切和测序对重组表达载体进行鉴定。应用脂质体将质粒表达载体转入鼻咽癌5-8F细胞,采用G418进行筛选;RT-PCR和Westernblot检测stathmin表达。结果酶切和测序分析证实,插入siRNA质粒表达载体中的stathmin干扰DNA片段的序列和方向正确。表达分析表明,构建的stathmin特异性siRNA质粒表达载体能有效沉默stathmin在鼻咽癌5-8F细胞中的表达。结论 stathmin表达抑制的鼻咽癌细胞系建立成功。
- 范才文田晶王建红肖胜军赵宁刘美莲雷迅向秋
- 关键词：STATHMIN鼻咽癌RNA干扰基因沉默
- CD44重组表达抑制鼻咽癌6-10B细胞增殖
- 2013年
- 目的:探索CD44v10剪接变异体对鼻咽癌细胞增殖的生物学作用。方法:将CD44v10基因编码序列重组,构建pIRESneo3-CD44v10重组质粒表达载体,重组表达载体扩增后采用脂质体转入鼻咽癌6-10B细胞系,G418筛选稳定转染细胞株;RT-PCR和蛋白印迹鉴定CD44v10重组表达6-10B细胞株;MTT法分析细胞增殖。结果:获得了CD44v10稳定重组表达的6-10B细胞株;CD44v10表达抑制6-10B细胞增殖。结论:CD44v10表达对鼻咽癌细胞的恶性增殖可能具有抑制作用。
- 范才文田晶张小玲陈颢肖胜军向秋
- 关键词：鼻咽癌增殖CD44
- 鼻咽癌CD44抑制表达细胞株的建立被引量：1
- 2012年
- 目的:构建CD44新剪接变异体siRNA质粒表达载体,建立CD44新变异体抑制表达的鼻咽癌细胞株。方法:合成CD44新变异体特异性干扰DNA片段,干扰DNA片段亚克隆于带绿色荧光蛋白的pGenesil-1.3质粒表达载体中,双酶切和测序鉴定重组表达质粒载体;采用脂质体将重组表达质粒载体转染入鼻咽癌5-8F细胞系,进行G418筛选;Western blot分析CD44表达。结果:重组CD44干扰DNA片段质粒表达载体的碱基序列和插入方向正确;细胞转染效率达70%;G418筛选获得GFP表达的单克隆鼻咽癌5-8F细胞株;Western blot分析表明CD44表达受抑制。结论:建立了CD44新变异体抑制表达的鼻咽癌细胞株,为CD44新变异体在鼻咽癌中的生物学功能提供了基础。
- 王建红范才文何晓松田晶肖胜军罗琴向秋
- 关键词：CD鼻咽癌基因沉默RNA干扰
- CD44基因与鼻咽癌关系的研究进展
- 2011年
- CD44是近年来国内外鼻咽癌的研究热点,国内虽然起步稍晚,但已经取得一些重要成果,显示出良好的前景。本文就CD44基因与鼻咽癌关系的研究进展进行了综述,并指出鼻咽癌研究中所面临的问题和今后的研究方向。
- 宣广旭何晓松
- 关键词：鼻咽癌CD44粘附分子
