目的观察脑缺血再灌注后海马Src家族酪氨酸蛋白激酶(Src family of protein tyrosine kinase,SrcPTKs)成员Src、Fyn激酶对NMDA受体(N-methyl-D-aspartate receptors,NMDAR,NR)NR2A亚基磷酸化水平的影响。方法采用Pulsinelli-Brierley四动脉阻断(four-vessel occlusion,4-VO)大鼠全脑缺血模型,缺血前连续3天脑室注射Src、Fyn反义寡核苷酸(antisense oligode oxynucletides,AS-ODNs)及错义寡核苷酸组(missenseoligodeoxynucletides,MS ODNs)后缺血15 min,用免疫沉淀和免疫印迹法检测NR2A亚基酪氨酸磷酸化水平的变化。结果Fyn反义寡核苷酸使脑缺血再灌注海马NR2A亚基磷酸化水平下降,而Src反义寡核苷酸对脑缺血/再灌注海马NR2A亚基磷酸化水平影响更加明显。结论脑缺血/再灌注过程中NMDA受体NR2A亚基的磷酸化主要是由Src激酶介导的。
目的研究培高利特(pergolide)对沙土鼠前脑脑缺血/再灌注(I/R)损伤海马CA1区神经元低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)表达的影响。方法采用沙土鼠5 min I/R损伤模型。54只雄性沙土鼠随机分为3组:假手术组、I/R组、培高利特组。分别于再灌注第1、3、7天行免疫组织化学染色法,检测海马CA1区神经元HIF-1α的表达。结果假手术组沙土鼠海马CA1区HIF-1α有较弱的表达。与假手术组相比,I/R组海马CA1区再灌注1天HIF-1α的表达无明显改变(P>0.05);至再灌注3天及7天HIF-1α表达消失(P<0.01或P<0.05)。培高利特可显著诱导海马CA1区神经元中HIF-1α的表达,以再灌注1天表达最多(P<0.01),随再灌注时间的延长表达缓慢减少,至第7天仍有较高水平的表达(P<0.01)。结论培高利特可显著诱导脑I/R损伤后海马CA1区神经元HIF-1α的表达,可能是其脑保护作用的机制之一。
目的观察N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDA)NR2A,NR2B亚基对脑缺血-再灌注后海马CA1区神经细胞存活的不同影响。方法采用Pulsinelli-Brierley四动脉阻塞(4-VO)大鼠全脑缺血模型,缺血前连续3天脑室注射NR2A,NR2B反义寡核苷酸(ASODN)后缺血15min,复灌5d,石蜡切片,以焦油紫染色,图像分析测定单位面积内焦油紫染色细胞面积总和,与缺血组及错义寡核苷酸组(MSODN)进行形态学分析。结果NR2A、NR2B反义寡核苷酸对脑缺血再灌注后海马CA1神经细胞均有明显保护作用,以NR2A AS ODN保护作用更明显,与缺血组比较约有50%细胞存活(P<0.05)。结论NR2A,NR2B亚基的含量降低对脑缺血再灌注后海马神经细胞有明显保护作用。
