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传染性腔上囊炎疫苗免疫鸡TLR7基因表达的动态变化被引量：10: 2007年; 给11日龄雏鸡分别口服接种鸡传染性腔上囊炎(IBD)弱毒疫苗(法贝灵,IBD-Blen)1和3头份后,于不同时间采集脾和腔上囊组织,分离纯化淋巴细胞,常规方法抽提总RNA,以鸡β-actin基因为内参,采用半定量RT-PCR法检测两种组织中鸡Toll样受体7(ChTLR7)基因的表达动态。结果显示,接种IBD弱毒疫苗前,试验鸡脾和腔上囊组织中均有ChTLR7的微量表达,疫苗接种后第7 h,脾中ChTLR7 mRNA的表达开始显著上调,至接种后第12 h达峰值,此后迅速下降,至第130 h时降至疫苗接种前的水平;而腔上囊组织中ChTLR7 mRNA的表达自接种后第12 h开始增加,第24 h时达峰值,随后迅速下降,约72 h后恢复至疫苗接种前水平。表明ChTLR7可能参与了IBDV感染早期的天然免疫反应过程。; 弓莉覃宗华顾为望余劲术吴彩艳蔡建平; 关键词：半定量RT-PCR

接种鸡IBD弱毒疫苗后鸡脾脏TLR7基因表达的动态变化被引量：2: 2009年; 给11日龄雏鸡分别口服接种鸡传染性腔上囊炎（IBD）弱毒疫苗（法贝灵，IBD-Blen）1头份和3头份后，于不同时间采集脾脏组织分离纯化淋巴细胞，用常规法抽提总RNA，以鸡B-aetin基因为内参，采用半定量RT-PCR法检测脾脏组织中鸡Toll样受体7（chTLR7）基因的表达动态。结果表明：接种IBD弱毒疫苗前，试验鸡脾组织中chTLR7有微量表达；疫苗接种后，脾脏中chTLR7mRNA的表达开始显著上升；接种后12小时达峰值，此后迅速下降；130小时降至疫苗接种前的基础水平。说明chTLR7可能参与了IBDV感染早期的天然免疫反应过程。; 弓莉王元占蔡建平覃宗华余劲述; 关键词：半定量RT-PCR

柔嫩艾美耳球虫表面抗原SAG2基因的克隆与表达被引量：6: 2006年; 根据生物信息学预测的基因序列设计引物,应用RT-PCR方法从柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子总RNA扩增获得了鸡柔嫩艾美耳球虫表面抗原2(surface antigen 2,SAG2)基因序列,将其与pGEM-T easy载体连接后转化E.coliDH5α,筛选阳性克隆,以带有限制酶切位点的特异性引物用PCR方法扩增不含SAG2 N端信号肽序列的ORF序列后克隆至表达载体pET-32 a(+),构建了重组表达质粒pET-32 a(+)-SAG2,并将其转化至E.coliBL21(DE3)。经IPTG诱导,获得了SAG2重组抗原在大肠杆菌的高效表达,重组蛋白的表达量约占菌体总蛋白的35%,融合蛋白的分子量约为47 ku。菌体经超声处理后进行SDS-PAGE分析表明,表达蛋白以包涵体的形式存在。; 简永利蔡建平于三科覃宗华林青叶秀华陈闻党海斌; 关键词：柔嫩艾美耳球虫基因克隆

脊椎动物Toll样受体的比较生物学被引量：1: 2006年; 从分子结构、基因结构及其染色体定位、信号转导等几方面概述了人类Toll样受体 (TLRs)的基本特点,并从比较生物学角度归纳了其他哺乳动物、禽类、鱼类等脊椎动物TLRs的研究进展。; 弓莉顾为望蔡建平; 关键词：脊椎动物 TOLL样受体固有免疫适应性免疫

柔嫩艾美球虫杨凌株表面抗原SAG10基因的克隆与原核表达被引量：7: 2007年; 从柔嫩艾美球虫第二代裂殖子总RNA中扩增EtSAG10基因,与pGEM-T Easy载体连接后转化大肠杆菌(E.coli)DH5α,筛选阳性克隆,扩增不含N端信号肽的编码序列,分别插入表达载体pET-32a(+)和pMAL-c2X,转化至E.coliRosetta,以IPTG诱导表达。结果表明,pET-32a(+)-EtSAG10在E.coliRosetta中的表达产物约占菌体总蛋白的43%,融合蛋白分子质量约为47 ku,以包涵体形式存在;而pMAL-c2X-EtSAG10在E.coliRosetta中表达的重组蛋白为可溶性,表达产物约占菌体总蛋白的35%,融合蛋白分子质量约为69 ku。以表达的可溶性EtSAG10重组蛋白100μg/只肌肉注射免疫雏鸡,攻虫后以盲肠病变计分、盲肠卵囊数(OPG)、相对增重率和抗球虫指数(ACI)评价,免疫组相对盲肠卵囊产量为47.7%,抗球虫指数由86.79提高至152.13。提示,重组表达的EtSAG10可诱导雏鸡产生一定的抗球虫免疫保护。; 麦博覃宗华于三科余劲术吕敏娜吴彩艳林青蔡建平; 关键词：柔嫩艾美球虫基因克隆免疫

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广东省自然科学基金(05103390)