广东省自然科学基金(S2012010010955) 作品数:6 被引量:9 H指数:2 相关作者: 牛永东 陈理明 徐涵 石刚刚 倪仰鹏 更多>> 相关机构: 汕头大学 汕头大学医学院第一附属医院 汕头市第二人民医院 更多>> 发文基金: 中央财政支持地方高校发展专项资金 中国博士后科学基金 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
核受体PXR在宫颈鳞癌组织及SiHa细胞中的表达及临床意义 2014年 目的:探讨核受体孕烷X受体(PXR)在宫颈鳞癌组织的表达及与宫颈鳞癌发生的关系。方法:采用免疫组织化学及细胞免疫化学检测核受体PXR在41例宫颈癌组织及宫颈鳞癌细胞株SiHa中的表达。结果:PXR在宫颈鳞癌细胞株SiHa中有表达;正常宫颈组织有PXR表达,41例宫颈鳞癌组织中PXR的阳性率为59.5%,且宫颈癌组织中明显低表达。结论:PXR的表达水平与宫颈癌的发生有一定的相关性,可能成为今后判断宫颈癌预后有价值的标志物。 郑燕珊 吴曼鹏 倪仰鹏 陈理明 程訸 徐涵 牛永东关键词:PXR 宫颈鳞癌 肿瘤发生 大鼠法尼酯X受体慢病毒构建及鉴定 被引量:1 2014年 目的:构建大鼠法尼酯X受体(rFXR)慢病毒,为研究FXR在原发性肝细胞癌中的分子机制奠定基础。方法:以pCMX-rFXR(NM_021745.1)为模板,将rFXR克隆到pWPXL表达载体中,酶切及DNA测序鉴定后转染HEK293T细胞,包装重组慢病毒rFXR sh-RNA。Western blot鉴定后,感染Huh7细胞进行功能检测。结果:证实pWPXL-rFXR sh-RNA构建及病毒包装成功;感染Huh7后,rFXR表达明显提高:FXR靶基因SHP和BSEP的表达增加。结论:pWPXL-rFXR sh-RNA慢病毒构建及包装成功,为研究FXR的生物学功能奠定基础。 牛永东 陈理明 吴曼鹏 程訸 张艳美 黄展勤 石刚刚关键词:法尼酯X受体 慢病毒 原发性肝细胞癌 新生仔鼠黄曲霉毒素的肾毒性研究 被引量:1 2014年 目的:探讨黄曲霉毒素(AF)B1暴露对新生仔鼠肾脏的影响。方法:CCK-8细胞毒性和动物染毒实验观察AFB1对肾细胞的影响。结果:与对照组比,实验组对HEK293细胞株的细胞毒性不明显,肾组织切片镜下表现为肾小管管腔形状不规则,管壁细胞形态明显异常;被膜下细胞空泡明显,且体质量显著低于对照组(P<0.05)。结论:未经肝脏代谢的AFB1对HEK293的细胞毒性不明显;7μg/kg的AFB1足以引起5日龄新生仔鼠肾脏损伤;并可能会引起小鼠机能代谢失衡,导致体质量减轻。 牛永东 程訸 陈理明 荣举 吴曼鹏 徐涵 张艳美 石刚刚关键词:黄曲霉毒素 肾毒性 新生仔鼠早期性别的快速鉴定 被引量:2 2014年 目的:快速鉴定新生仔鼠的性别。方法:根据GenBank上Sry核酸序列,设计小鼠mSry引物。双盲法对12只新生仔鼠(<7 d龄)及已知性别雄性小鼠抽提鼠尾组织DNA,并进行PCR性别鉴定。结果:雄性仔鼠尾组织DNA样品中扩增出1条189 bp的DNA片段,雌性仔鼠DNA样品没能有效扩增出特异的Sry片段。结论:利用PCR检测鼠尾中的mSry是一简便快捷、有效的新生仔鼠早期性别鉴定手段。 牛永东 程訸 石刚刚关键词:PCR 性别鉴定 小鼠 核受体LXRα在HBV阳性肝硬化及原发性肝癌组织中的表达及意义 被引量:4 2014年 目的检测肝脏X受体(Liver X receptor alpha,LXRα)在HBV阳性肝硬化组织及原发性肝癌中的表达情况及临床意义。方法收集20例揭阳市人民医院及汕头大学医学院第一附属医院手术切除的HBV阳性肝硬化原发性肝癌组织标本,应用免疫组化染色检测LXRα表达。Huh7细胞中分别过表达小鼠mLXRα,及共过表达HBx(HBV X protein)和mLXRα,并检测mLXRα及HBx对内源性LXRα信号通路下游靶基因SREBP-1(Sterol regulatory element-binding protein 1)的影响;双荧光素酶报告系统检测人肝癌Huh7细胞中HBx对LXRα转录活性的影响。结果 LXRα在肝硬化组织中阳性表达率为95%,高于癌组织的25%。HBx上调SREBP-1的表达可能与HBx调控LXRα的转录活性有关。结论 HBx通过调节癌前高表达的LXRα的转录活性,并影响其信号通路可能与HCC发生相关。 郑燕珊 倪仰鹏 陈理明 陆军 程訸 徐涵 牛永东关键词:LXRΑ HBX 原发性肝细胞癌 慢病毒介异的孕烷X受体sh-RNA稳定干扰HepG2细胞株的构建 被引量:1 2014年 目的:构建慢病毒介导的人孕烷X受体(hPXR)sh-RNA干扰载体及筛选肝癌细胞稳定干扰株。方法:针对hPXR的特异性序列,设计干扰序列,构建重组克隆。转染HEK293T细胞,筛选有效干扰片段。HEK293T包装干扰病毒并转染肝癌HepG2细胞株,200 mmol/L嘌呤霉素筛选2-3周,Western blot检测PXR表达。hPXR激动剂利福平处理PXR sh-RNA稳定干扰肝癌HepG2细胞株和Scramble对照细胞,抽提RNA并鉴定hPXR靶基因细胞色素P450 3A4(CYP3A4)的表达。结果:筛选出了PXR有效干扰片段,并获得了PXR信号通路有效敲低的HepG2慢病毒稳定干扰株。结论:成功构建了慢病毒介导的PXR sh-RNA稳定干扰HepG2细胞株。 牛永东 陈理明 吴曼鹏 程訸 徐涵 高分飞 石刚刚关键词:原发性肝细胞癌 慢病毒 RNA干扰