国家质检总局科技计划项目(2006IK216) 作品数:5 被引量:18 H指数:4 相关作者: 魏梅生 李桂芬 张晓雷 檀根甲 杨翠云 更多>> 相关机构: 中国检验检疫科学研究院 安徽农业大学 上海出入境检验检疫局 更多>> 发文基金: 国家质检总局科技计划项目 上海市科学技术委员会资助项目 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
不同缓冲液对烟草环斑病毒胶体金免疫层析试纸条测试的影响 2008年 烟草环斑病毒(Tobacco ringspot virus,TRSV)为豇豆花叶病毒科(Comoviridae)线虫传病毒属(Nepovirus)的典型成员。TRSV寄主范围广泛,可为害54科246种草本和木本植物,在许多重要农作物如大豆、烟草上为害严重。TRSV可引起大豆芽枯病,造成大豆产量损失达50%。TRSV可通过线虫、机械接种和种子等途径传播。种子传播是TRSV远距离传播的主要途径,大豆的种传率40%~100%。TRSV既是我国进境植物检疫性有害生物。同时,也是全国农业植物检疫性有害生物,具有重要的经济意义。 魏梅生 李桂芬 马洁关键词:烟草环斑病毒 免疫层析 检疫性有害生物 试纸条 胶体金 缓冲液 TRSV GICA-RT-PCR检测菜豆荚斑驳病毒的新方法 被引量:5 2008年 菜豆荚斑驳病毒(Bean pod mottle virus,BPMV)是我国进境植物检疫性有害生物。为解决普通RT-PCR不能直接检测大豆病种子中该病毒的问题,将简便快速的胶体金免疫层析技术(GICA)和高灵敏度的普通RT-PCR检测技术有机地结合起来,建立了GICA-RT-PCR检测新方法。即先用GICA捕获病毒,将捕获的病毒直接进行RT-PCR扩增,简化了检测的步骤,提高了检测的灵敏度。结果表明:用该方法检测提纯病毒灵敏度达到0.01μg.mL-1、检测大豆病叶和病大豆种皮,灵敏度达到10-4,分别比GICA检测提高了20倍、10倍和100倍。GICA-RT-PCR可进一步确认GICA的结果。 张晓雷 檀根甲 魏梅生 张永江 李桂芬关键词:胶体金免疫层析 试纸条 菜豆荚斑驳病毒 番茄环斑病毒和烟草环斑病毒复合型胶体金免疫层析试纸条的研制 被引量:5 2008年 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记番茄环斑病毒和烟草环斑病毒的兔多克隆抗体,用微定量喷头在硝酸纤维素膜上喷好2条病毒检测线(T线)和1条羊抗兔抗体质控线(C线),制成复合型免疫层析检测试纸条。一张试纸条在10min内,可同时检测出这两种病毒。试纸条检测番茄环斑病毒和烟草环斑病毒粗提纯液,检测灵敏度在1μg/mL,试纸条检测番茄环斑病毒和烟草环斑病毒的混合病汁液可稀释1000倍(重量/体积)。用健康叶片和缓冲液对照测试,试纸条结果都为阴性。 魏梅生 杨翠云 李桂芬关键词:番茄环斑病毒 烟草环斑病毒 胶体金免疫层析法 大豆种传南方菜豆花叶病毒和烟草环斑病毒的GICA-RT-PCR检测 被引量:6 2009年 南方菜豆花叶病毒(south bean mosaic virus,SBMV)和烟草环斑病毒(tobacco ringspot virus,TRSV)是我国重要的进境检疫性有害生物,两种病毒均为种传病毒,可随大豆种子实现远距离传播。本研究以这两种病毒的大豆病种子为试材,先用胶体金免疫层析试纸条(GICA)检测,将检测完病毒后的胶体金免疫层析试纸条上的T线和C线剪下,再用RT-PCR的方法将T线和C线上捕获的病毒直接进行扩增,这种将血清学与分子生物学相结合起来所建立的GICA-RT-PCR检测方法,省去了烦琐的总RNA提取的环节,简化了病毒检测的步骤,提高了检测的灵敏度。 张晓雷 檀根甲 魏梅生 张永江 李桂芬关键词:南方菜豆花叶病毒 烟草环斑病毒 胶体金免疫层析 试纸条 胶体金免疫层析试纸结合RT-PCR法快速检测烟草环斑病毒 被引量:6 2008年 利用烟草环斑病毒胶体金免疫层析检测试纸条,对烟草环斑病毒3个分离物进行了快速检测。结果表明,试纸条在10min内,可特异性检出烟草环斑病毒的3个分离物,对番茄环斑病毒、南芥菜花叶病毒、番茄黑环病毒和健康叶片无反应。剪下试纸条上显示的检测带,进行RT-PCR,能扩增到与预期大小相同的DNA条带。试纸条检测烟草环斑病毒粗提纯液,检测灵敏度在1μg·mL-1,试纸条检测烟草环斑病毒的病汁液,检测灵敏度在10-3(W/V),试纸条检测灵敏度与DAS-ELISA方法灵敏度基本相同。 杨翠云 魏梅生 于翠 乔艳艳关键词:烟草环斑病毒 胶体金免疫层析 试纸条 RT-PCR