北京市科技新星计划(Z121107002512078)
- 作品数：6 被引量：49H指数：3
- 相关作者：洪权吴镝陈香美张雪光王远大更多>>
- 相关机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：北京市科技新星计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠脱细胞肾脏骨架基质成分保留情况的研究
- 2014年
- 目的构建大鼠脱细胞肾脏骨架,检测其内部细胞外基质成分的保留情况。方法取12周龄SD大鼠的肾脏,保留血管通路,从动脉依次灌入体积分数1%的十二烷基磺酸钠及体积分数1%的聚乙二醇辛基苯基醚溶液,脱细胞处理后利用HE染色及电镜观测其结构是否完整,是否有细胞残留,应用免疫组织化学染色检测脱细胞肾脏骨架细胞外基质成分保留是否完整。结果 HE染色显示脱细胞肾脏骨架内有完整的肾小球和肾小管结构,骨架内未见细胞成分残留;电镜结果显示脱细胞肾脏骨架中肾小球毛细血管基底膜连续完整,系膜基质得以保留;肾脏细胞外基质成分Ⅳ型胶原、层黏连蛋白、弹性蛋白的免疫组织化学染色显示出基本完整的肾脏骨架结构。结论向肾脏内灌注十二烷基磺酸钠及聚乙二醇辛基苯基醚溶液可成功构建出脱细胞的肾脏骨架,骨架内的肾小球和肾小管结构保留基本完整,无细胞成分残留,重要的细胞外基质成分也保留完整。
- 于善栋洪权周宇楠郑维傅博陈香美吴镝
- 关键词：细胞外基质
- 双光子显微镜在肾脏病研究中的应用被引量：1
- 2014年
- 双光子显微成像技术是近年来应用于生物医药研究中的重要技术之一。随着激光技术的发展,该技术给我们在观察活细胞或活体组织中的生命现象带来了革命性的进步。该文就这一技术在肾脏病研究领域中的应用做了较详尽的介绍。
- 洪权张煜欣李清刚陈香美
- 关键词：肾脏活体组织
- 内质网应激途径诱导肾小管上皮细胞凋亡在横纹肌溶解肾损伤过程中的作用被引量：9
- 2015年
- 目的探讨内质网应激(ERS)诱导的肾小管上皮细胞凋亡是否参与了横纹肌溶解肾损伤过程。方法雄性Wistar大鼠33只,根据标本采集时间分为对照组及模型组,后者又按照时间分为1、3、6、12、24、48、72、96、120、168h 10个亚组(n=3)。建立甘油诱导横纹肌溶解肾损伤大鼠模型,建模后于相应时间点分别处死大鼠,收集血清及肾脏组织,利用肾功能指标和肾组织病理评估不同时间点肾脏损伤程度;采用TUNEL染色评估肾小管上皮细胞凋亡程度;Western blotting检测死亡受体途径和线粒体凋亡途径关键凋亡因子caspase-8、细胞色素C及caspase-9活性片段的表达,同时检测ERS伴侣蛋白GRP-78和特异性内质网凋亡因子caspase-12活性片段的表达。结果横纹肌溶解肾损伤后1h肾小管上皮细胞出现病变,24h出现大量坏死、脱落,肾小管上皮细胞凋亡数最高,72h肾小管-间质损伤达高峰。横纹肌溶解肾损伤后凋亡因子caspase-8、细胞色素C和caspase-9的表达上调,12h达到高峰(P<0.05),GRP-78表达升高趋势与caspase-12一致。结论肾小管上皮细胞凋亡是横纹肌溶解肾损伤的主要发病机制,除了死亡受体及线粒体途径的活化,ERS也可能在此过程中发挥了重要作用。
- 王远大洪权吕杨张雪光张利吴镝陈香美
- 关键词：横纹肌溶解急性肾损伤细胞凋亡内质网应激
- 生物膜包裹间充质干细胞对甘油所致急性肾损伤小鼠肾的保护作用被引量：2
- 2016年
- 目的研究生物膜（一种异种脱细胞真皮基质）包裹间充质干细胞对甘油所致急性肾损伤（acute kidney injury,AKI）小鼠肾的保护作用。方法健康雄性C57BL/6小鼠（8-12周龄,体质量20-25g）40只,适应性喂养1周后,随机分为4组,每组各10只：正常对照组,双肾包膜剥离手术＋0.9%氯化钠注射液（Sham＋NS）;AKI模型组,双肾包膜剥离手术＋甘油注射（RM）;生物膜组,生物膜包裹无肾包膜双肾＋甘油注射（RM＋BM）;生物膜包裹间充质干细胞组,生物膜包裹间充质干细胞包裹无包膜双肾＋甘油注射（RM＋BM＋MSCs）。观察各组小鼠一般状态、血肌酐、尿素氮指标变化及肾组织学变化。结果 RM组、RM＋BM组与Sham＋NS组比较,小鼠出现精神萎靡、反应迟钝及肉眼血尿,进食进水量明显减少。RM＋BM＋MSCs组小鼠精神萎靡、反应迟钝及肉眼血尿的状况较RM组和RM＋BM组有所缓解。RM组小鼠与Sham＋NS组比较,血肌酐、尿素氮明显升高[（221.75±24.60）μmol/L vs（20.64±2.68）μmol/L,P〈0.01;（87.31±13.90）mmol/L vs（10.71±1.52）mmol/L,P〈0.01]。RM＋BM组小鼠的血肌酐、尿素氮较RM组无统计学差异[（206.68±21.75）μmol/L vs（221.75±24.60）μmol/L,P〉0.05;（87.62±11.23）mmol/L vs（87.31±13.90）mmol/L,P〉0.05]。RM＋BM＋MSCs组小鼠的血肌酐、尿素氮较RM组和RM＋BM组明显改善[（34.30±6.69）μmol/L vs（221.75±24.60）μmol/L、（206.68±21.75）μmol/L,P〈0.01;（12.32±1.57）mmol/L vs（87.31±13.90）mmol/L、（87.62±11.23）mmol/L,P〈0.01]。RM组和RM＋BM组肉眼可见肾大,PAS染色显示肾小管上皮细胞肿胀、变性、刷状缘消失和部分上皮细胞坏死,伴有肌红蛋白管型形成。RM＋BM＋MSCs组肾大不明显,肾损伤较RM组和RM＋BM组明显减轻,肾小管内管型减少,上皮细胞坏死减轻,可见不连续的刷状缘。结论生物膜包裹间充质干细胞对甘油所致急性肾损伤小鼠肾具有保护作用。
- 范萌耿晓东郑维洪权吴镝
- 关键词：生物膜间充质干细胞横纹肌溶解急性肾损伤
- 高尿酸通过miR-663下调转化生长因子β_1抑制内皮细胞迁移被引量：9
- 2014年
- 目的探讨高尿酸通过miR-663影响内皮细胞迁移功能的机制。方法培养人脐静脉内皮细胞系(EA.hy926),用600μmol/L尿酸孵育48 h,实时定量PCR检测miR-663的水平,并检测高尿酸患者血清中miR-663水平;利用双荧光素酶试验预测并验证miR-663的靶基因;检测高尿酸条件下内皮细胞中转化生长因子β1(transforming growth fator beta 1,TGF-β1)的表达水平,利用miR-663抑制物、TGFB1 siRNA转染及划痕实验观察高尿酸如何通过miR-663及其靶基因影响内皮细胞的迁移功能。结果高尿酸培养条件下内皮细胞中miR-663表达水平明显升高,高尿酸血症患者血清中miR-663的水平也高于正常人;双荧光素酶试验结果表明TGFB1的翻译水平受miR-663直接调控;高尿酸能明显抑制细胞的迁移能力,而高尿酸条件下TGF-β1的表达水平也明显下降,转染miR-663抑制物后,TGF-β1表达水平升高,内皮细胞迁移能力也明显改善,但是利用siRNA抑制TGF-β1的表达后,miR-663抑制物不能再促进内皮细胞的迁移。结论高尿酸通过miRNA-663下调TGF-β1而抑制细胞迁移。
- 于善栋洪权傅博陈香美吴镝
- 关键词：高尿酸内皮细胞迁移转化生长因子Β1
- 高尿酸通过miR-155下调eNOS表达而导致内皮细胞功能障碍被引量：31
- 2013年
- 目的高尿酸血症是心血管和肾脏疾病的独立风险因素,本研究拟从miR-155入手初步探索其在高尿酸导致内皮功能障碍过程的作用机制。方法培养人脐静脉内皮细胞系HUVEC,以600μmol/L的尿酸孵育24、48 h之后收集细胞及细胞上清液,检测eNOS的蛋白表达及上清液的NO含量;预测并利用双荧光素酶系统验证miR-155的靶基因,随后利用荧光定量PCR检测高尿酸环境中内皮细胞miR-155的表达情况,通过miR-155 inhibitor的转染检测它对内皮功能障碍的影响。结果 600μmol/L的尿酸能诱导内皮细胞eNOS表达下降,NO分泌减少;microRNA在线分析软件及双荧光素酶报告实验提示eNOS的翻译水平受miR-155直接调控;同时发现高尿酸刺激内皮细胞后miR-155的表达上调,而miR-155 inhibitor能抑制它的表达;内皮细胞转染miR-155 inhibitor之后再进行高尿酸的孵育,eNOS的表达及NO的分泌水平与单独高尿酸孵育组相比均显著升高。结论高尿酸可通过miR-155下调eNOS表达而导致内皮细胞功能障碍。
- 张雪光洪权侯剀王远大吴镝陈香美
- 关键词：高尿酸血症内皮细胞
