河南省医学科技创新人才工程项目(2002216)
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 相关作者：贾国存李丰益廖清奎汤有才陈斌更多>>
- 相关机构：郑州市儿童医院四川大学郑州大学第三附属医院更多>>
- 发文基金：河南省医学科技创新人才工程项目河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学天文地球更多>>
- 去铁胺诱导K562细胞凋亡研究
- 2011年
- 目的探讨铁螯合剂去铁胺(DFO)诱导白血病细胞凋亡的分子机制。方法实验分为DFO组(终浓度分别为10、50、100μM)、DFO+FeCl3(各10μmol/L)组及空白对照组。用钙黄绿素检测K562细胞可变铁池。锥虫蓝活细胞拒染实验进行活细胞计数及细胞存活率测定;光镜形态学观察及流式细胞仪方法检测K562细胞凋亡;比色法检测caspase-3活性。结果 (1)DFO作用于K562细胞后,随培养时间延长及DFO浓度的增加,动态铁池降低,细胞生存率逐渐下降,凋亡率增加,显示一定的时间剂量依赖性;而DFO+FeCl3组细胞凋亡率与空白对照组差异无统计学意义。(2)50μmo/L、100μmol/L DFO作用于K562细胞24 h时,caspase-3酶活性升高明显,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01);相关分析结果显示,K562细胞铁池的荧光改变与caspase-3活性变化呈负相关(r=-0.894,P<0.05)。结论 DFO诱导白血病细胞凋亡的作用可能与螯合细胞内铁,降低细胞可变铁池,激活caspase-3有关。
- 贾国存汤有才李丰益廖清奎
- 关键词：去铁胺凋亡CASPASE-3白血病细胞
- 铁螯合剂诱导白血病细胞凋亡中caspase-3的变化
- 2010年
- 目的探讨铁螯合剂去铁胺(DFO)对诱导白血病细胞HL-60的分子机制。方法 2003年712月用钙黄绿素(calcein)检测HL-60细胞LIP。台盼蓝活细胞拒染实验进行活细胞计数及细胞存活率测定;光镜形态学观察及流式细胞仪(FCM)等方法检测HL-60细胞凋亡;比色法检测caspase-3(基于pNA标记底物的比色法)活性。结果①不同浓度的DFO作用于HL-60细胞后,随培养时间延长及DFO浓度的增加,动态铁池降低,细胞生存率逐渐下降,凋亡率增加,显示一定的时间剂量依赖性。②HL-60细胞在不同浓度的DFO作用下,caspase-3的活性逐渐升高。50、100μmol/LDFO作用于HL-60细胞24h,caspase-3酶活性升高明显,与对照组相比,有统计学意义(P<0.001);相关分析结果显示,HL-60细胞LIP的改变与caspase-3活性变化呈负相关系(r=-0.887,P<0.05)。结论 DFO诱导白血病细胞凋亡的作用可能与螯合细胞内铁,降低细胞LIP,激活caspase-3,最终实施细胞凋亡密切相关。
- 贾国存李丰益高举
- 关键词：HL-60细胞去铁胺脱噬作用CASPASE-3
- HL-60细胞铁池变化与凋亡相关基因关系的初步研究被引量：2
- 2007年
- 目的探讨HL-60细胞铁池改变对凋亡相关基因表达的影响及可能的分子机制。方法实验分组为去铁胺(DFO)组、DFO+三氯化铁组及空白对照组,分别采用钙黄绿素检测HL-60细胞LIP、流式细胞术观察HL-60细胞凋亡和RT-PCR测定HL-60细胞bax、c-myc、rbmRNA表达。结果(1)不同浓度的DFO作用于HL-60细胞后,随培养时间延长及DFO浓度的增加,动态铁池降低,细胞生存率逐渐下降,显示一定的时间剂量依赖性。(2)不同浓度的DFO作用于HL-60不同时间后,细胞凋亡增加,高于对照组(P<0.05)。(3)RT-PCR结果显示,DFO能明显上调c-myc、rb和baxmRNA表达(P<0.05)。结论DFO通过螯合细胞内铁,降低HL-60细胞LIP,诱导细胞凋亡;诱导HL-60细胞凋亡的作用可能与其降低细胞动态铁池,上调细胞凋亡相关基因c-myc、rb、baxmRNA表达密切相关。
- 贾国存汤有才李丰益廖清奎
- 关键词：铁去铁胺凋亡
- 铁剥夺对K562细胞动态铁池的改变及凋亡相关基因表达的影响被引量：3
- 2005年
- 目的探讨去铁胺(DFO)对白血病细胞K562动态铁池(LIP)、凋亡和凋亡相关基因表达的影响及其分子机制。方法实验分为DFO组、DFO+三氯化铁组及空白对照组,分别采用钙黄绿素检测K562细胞LIP改变、流式细胞术观察K562细胞凋亡和RT-PCR测定K562细胞c-myc、Rbb、ax mRNA表达。结果1.不同浓度的DFO作用于K562细胞后,随培养时间延长及DFO浓度增加,LIP降低,细胞生存率逐渐下降,显示一定的时间剂量依赖性。2.不同浓度的DFO作用于K562不同时间后,细胞凋亡增加,高于对照组(P<0.05);3.RT-PCR结果显示,DFO能明显上调c-myc、Rb和bax mRNA表达(P<0.05)。结论DFO可诱导K562细胞凋亡;其诱导K562细胞凋亡作用可能与其螯合细胞内铁,降低细胞LIP,上调细胞凋亡相关基因c-myc、Rb、bax mRNA表达密切相关。
- 伍学强贾国存羊裔明刘玉峰席雨人
- 关键词：铁去铁胺凋亡相关基因
- 铁剥夺诱导K562细胞凋亡与Caspase-3激活的实验研究被引量：7
- 2006年
- 目的观察铁剥夺诱导K562细胞凋亡与Caspase-3激活间的关系。方法以不同水平的去铁胺(DFO)处理K562细胞。1.用磷脂结合蛋白V/碘化丙啶(Annexin V/PI)对K562细胞进行双标记后,在流式细胞仪下检测细胞凋亡率。2.采用肽核酸(pNA)标记底物的比色法检测Caspase-3活性。3.用Western blot分析Caspase-3活性蛋白的激活。结果K562细胞经不同浓度DFO处理后,细胞发生明显凋亡,Caspase-3活性渐升高。50、100μmol/L DFO作用于K562细胞24 h后,Caspase-3酶活性升高明显;与对照组比较,有显著性差异(P<0.001);在100μmol/L浓度下14 h可见活性Caspase-3,Caspase-3活性和量为时间-剂量依赖性;10、12 h各浓度组间Caspase-3活性水平比较,差异均无显著性(P均>0.05)。上述作用可被等摩尔浓度的氯化铁(FeCl3)抵消。结论铁剥夺可能通过螯合细胞内铁,激活Caspase-3,诱导K562细胞凋亡。
- 汤有才贾国存李丰益廖清奎陈斌牛文忠
- 关键词：铁剥夺K562细胞CASPASE-3凋亡
