国家自然科学基金(30560161)
- 作品数：4 被引量：68H指数：2
- 相关作者：向伟符生苗吴明易著文何小解更多>>
- 相关机构：海南省人民医院中南大学湘雅二医院海南省妇幼保健院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金海南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 维生素D缺乏和维生素D缺乏性佝偻病防治进展被引量：65
- 2008年
- 维生素D缺乏性佝偻病（佝偻病）为缺乏维生素D（VitD）引起体内钙磷代谢异常，导致生长期的骨组织矿化不全，产生以骨骼病变为特征的与生活方式密切相关的全身性慢性营养性疾病；多见于婴幼儿，影响儿童生长发育，VitD缺乏系指体内VitD含量不足，研究表明在出现佝偻病典型临床表现之前，患儿可出现长达数月的VitD缺乏。
- 向伟
- 关键词：维生素D缺乏性佝偻病VITD缺乏钙磷代谢异常儿童生长发育营养性疾病骨骼病变
- 维生素D受体特异性siRNA表达载体的构建
- 2011年
- 目的通过构建维生素D受体(VDR)基因特异性siRNA(small interfering RNA)真核表达载体,检测其对血管内皮细胞(EC)中VDR基因的沉默作用,为进一步探讨VDR与心血管疾病发生发展关系的研究奠定基础。方法构建小鼠VDR特异性siRNA表达载体并测序,进行人EC/鼠EC的培养,进行siRNA转染试验,倒置荧光显微镜下观察细胞转染效率,Western blot进行鉴定。结果针对VDR基因的4个不同位点,设计、构建了4个siRNA干扰载体,经测序,序列全部正确。成功完成了人EC/鼠EC的培养及转染,荧光显微镜观察发现转染的重组质粒在EC内出现不同的转染效率,1号质粒的转染效率约为65%,2号质粒的转染效率约为50%,3、4号质粒的转染效率比较低。取转染效率较高的1、2号质粒做进一步转染干预,转染72h后,采用Western blot方法检测人EC/鼠EC内VDR蛋白质表达,与空白对照组比较1,、2号质粒在人EC中对VDR的表达无明显抑制作用,而在鼠EC中则有明显抑制作用,其中以1号质粒抑制效果最为明显,目的蛋白IOD/内参蛋白IOD比值发现两干扰组在人EC中对VDR的表达无明显抑制作用,而在鼠EC中则有明显抑制作用,其中以1号干扰质粒抑制效果最明显,抑制率达到了70%。结论成功完成了人EC/鼠EC的培养、转染及转染干预,并行Western blot鉴定,发现抑制效率明显的为鼠EC 1号质粒组。表明针对鼠VDR基因的siRNA表达载体有很强的特异性,并且对VDR基因干扰的位点不同表现的抑制效应不一。
- 向伟何小解马燕琳易著文郑维曹艳赵水平马志超吴明符生苗马建林王洁康红
- 关键词：维生素D受体血管内皮细胞转染质粒
- 1，25（OH）2D3对载脂蛋白E缺乏鼠主动脉内皮细胞增生与凋亡及一氧化氮合酶表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的了解1，25（OH）2D3对载脂蛋白E缺乏鼠（apoE^-/-）主动脉内皮细胞（EC）增生、凋亡及内皮型一氧化氮合酶（eNOS）表达的影响。方法apoE^-/-鼠主动脉EC分离培养，MTT法观察1，25（OH）2D3影响apoE^-/-鼠EC生长，TUNEL检测细胞凋亡，RT—PCR检测Bcl-2、FasmRNA和eNOSmRNA表达。结果细胞对照组与无水乙醇对照组EC增生率差异无统计学意义[（0．162±0．031）粥．（0．158±0．006），P〉0．05]，1，25（OH）2D3在10^-4、10^-5、10^-6、10^-7、10^-8mol／L时Ec增生率高于对照组（P〈0．01），但不同浓度1，25（OH）2D3作用组之间差异无统计学意义[分别为（0．189±0．013）、（0．285±0．011）、（0．296±0．026）、（0．284±0．017）、（0．233±0．010），P〉0．05]，选定10^-6mol／L1，25（OH）2D3为研究浓度，干预分离培养apoE^-/-鼠主动脉Ec.1，25（OH）2D3 10^-6mol／L组、细胞对照组、无水乙醇对照组凋亡指数分别为（15．14±3．19）、（18．94±4．22）、（19．27±4．58），Bcl-2mRNA分另0为（0．78±0．16）、（0．46±0．21）、（0．42±0．17），FasmRNA分另0为（0．43±0．12）、（0．79±O．21）、（0．81±0．20），eNOSmRNA分别为（0．56±0．16）、（0．39±0．13）、（0．35±0．11）。25（OH）2D3干预组EC凋亡指数、FasmRNA、eNOSmRNA降低，Bel-2mRNA增高（P均〈0．01），细胞对照组与无水乙醇对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。相关分析发现在1，25（OH）2D3干预组，eNOS表达量与凋亡指数、FasmRNA呈负相关（r=-0．676、-0．758），与Bel-2表达呈正相关（r=0．762），差异有统计学意义（P均〈0．01）。结论1，25（OH）2D3刺激apoE^-/-鼠主动脉EC增生、抑制主动脉EC凋亡，影响凋亡相关基因Bel-2、FasmRNA表达，上调eNOSmRNA表达。
- 向伟何小解马燕琳易著文曹艳赵水平杨进福马志超吴明符生苗马建林王洁郑维康红
- 关键词：一氧化氮载脂蛋白E类
- 维生素D受体特异性siRNA表达载体的构建
- <正>目的:通过构建维生素D受体(VDR)基因特异性siRNA(small interferingRNA)真核表达载体,检测其对血管内皮细胞(EC)中VDR基因的沉默作用,为进一步探讨VDR与心血管疾病发生发展关系的研究...
- 向伟何小解马燕琳易著文郑维曹艳赵水平马志超吴明符生苗马建林王洁康红
- 关键词：心血管疾病血管内皮细胞维生素D受体基因特异性真核表达载体
- 文献传递
- 载脂蛋白E缺乏鼠血25-（OH）D水平及维生素D受体表达研究被引量：4
- 2009年
- 维生素D（VitD）对人类健康特别是儿童健康具有重要意义。VitD主要是通过与VitD受体（vitaminDreceptor，VDR）结合发挥其生物学作用^[1]’。既往我们研究发现纯合子VDR基因剔除鼠存在血压明显升高与心肌肥厚现象，并与影响血压水平的主动脉内皮型一氧化氮合酶、内皮素-1基因表达水平及心房利钠肽水平明显相关^[2]。载脂蛋白（apolipoprotein，apo）E在血脂代谢过程中起关键作用，与动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）、冠心病（coronary heartdisease，CHD）密切相关^[3]。
- 向伟何小解吴明易著文符生苗廖锋冯小伟
- 关键词：载脂蛋白E受体表达除鼠内皮型一氧化氮合酶基因表达水平
