中央高校基本科研业务费专项资金(WK0913002)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
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- TATm-survivin(T34A)冻干注射剂的制备及体外抗肿瘤效果
- 2012年
- 目的:优化TATm-survivin(T34A)蛋白的冻干工艺,同时对该蛋白的体外抗肿瘤活性进行研究。方法:采用MTT法检测TATm-survivin(T34A)蛋白的抗肿瘤活性并以此为指标优化该蛋白的冻干工艺。结果:海藻糖、甘露醇等的浓度对于TATm-survivin(T34A)蛋白冻干产品的外观影响很大,不同的预冻方式对冻干产品的活性有很大的影响;TATm-survivin(T34A)蛋白对于肺癌A549细胞以及乳腺癌MCF-7/s细胞有着显著的抑制效果,其中肺癌A549的效果要强于用于对照的乳腺癌B-Cap-37细胞以及胰腺癌SW1990细胞;0.25个单位的TATm-survivin(T34A)蛋白与阿霉素联合用药能够显著提高阿霉素对B-Cap-37,MCF-7/s和耐药株MCF-7/ADR的抑制效果,联合用药对这3种细胞株的IC50值分别可以降低26.6%,35.5%和18.0%。结论:获得了一条经过优化的TATm-survivin(T34A)蛋白冻干产品的制备工艺。并证明TATm-sur-vivin(T34A)蛋白具有较强的抗肿瘤效果,同时还发现该蛋白对阿霉素具有较强的增敏作用,是一种值得进一步研究与开发的抗肿瘤药物。
- 朱玲石磊唐莉莉许玉馨张翼马兴元
- 关键词：冻干抗肿瘤药增敏作用阿霉素
- 利用类弹性蛋白可逆相变和内含肽自切割功能高效制备TmSm抗肿瘤蛋白
- 2013年
- 目标蛋白TmSm是研发出的一种能够较强抑制肿瘤细胞生长和促进其凋亡的基因工程抗肿瘤蛋白,其由介导目的蛋白进入细胞的转导肽HIV-TAT突变体(Tm)和Survivin突变体(Sm)融合而成。原先的TmSm制备工艺以包涵体表达、变性和复性为主,其过程不仅复杂、收率低成本高,而且所得蛋白活性较低。通过将TmSm基因与编码类弹性蛋白(elastin-like polypeptides,ELPs)和内含肽(intein)的标签序列(EI)进行融合,利用ELPs的可逆相变特性和intein的自切割功能,经简单的温度及pH调控,获得了纯度为99.00%的TmSm蛋白。将纯化后的蛋白作用于肺癌细胞A549,24 h后MTT结果显示,63.21μg/ml的目的蛋白对A549的抑制率为57.83%;流式细胞仪检测结果表明,当TmSm浓度为40μg/ml时,24 h后细胞凋亡率为41.72%。因此,这种新型的以类弹性蛋白和内含肽介导的表达纯化技术不仅成本低廉,而且对抗肿瘤蛋白药物的质量提高具有重要应用价值。
- 石磊唐莉莉马兴元王天文马飞王平
- 关键词：内含肽肺癌细胞A549
