国家教育部博士点基金(20040001133)
- 作品数：3 被引量：30H指数：3
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- 粒细胞集落刺激因子动员自体骨髓干细胞促进大鼠部分肝移植物的肝再生被引量：20
- 2005年
- 目的探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员自体骨髓干细胞是否会促进部分肝移植物的再生,减轻肝损伤。方法建立性别交叉的大鼠(雌性→雄性)50%部分肝移植模型(PLTx),移植前动员组:移植前受体皮下注射G-CSF5d;移植后动员组:移植后3h,注射G-CSF5d;未动员组:移植后3h,皮下注射生理盐水5d。分别与1、3、5、7和14d取肝脏。检测移植物内CD34干细胞标志,确定干细胞迁移入肝脏的情况,观察肝脏的有丝分裂相和溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)掺入检测肝再生情况,并检测sry+细胞确认细胞来源。结果用G-CSF动员后发现,移植后动员组14d生存率(90%)较移植前动员组(60%)和未动员组(50%)高,差异有统计学意义。与未动员组相比,移植后第3天,肝坏死灶少,有丝分裂指数高(30%±5%vs24%±6%,P<0·05),BrdU掺入高(42%±6%vs34%±4%,P<0·05),差异有统计学意义。移植后第3至14天,移植后动员组汇管区可见较多的CD34+的成堆或散在分布的淋巴细胞样细胞;移植后第3天,移植前动员组见汇管区较多的CD34+细胞。移植后第5天各组在肝窦和汇管区偶见sry阳性细胞,第14天,G-CSF动员两组汇管区周围sry阳性细胞增多,未动员组较少。结论移植后用G-CSF动员自体骨髓干细胞,受体生存率高,移植肝再生明显,肝损伤轻。
- 刘峰潘孝本陈国栋蒋栋丛旭费然魏来
- 关键词：肝移植干细胞粒细胞集落刺激因子肝再生
- 大鼠内皮祖细胞的培养及鉴定被引量：4
- 2007年
- 目的：探索大鼠内皮祖细胞的分离培养，为缺血性疾病细胞移植治疗提供实验方法。方法：采集大鼠骨髓，梯度密度离心法分离单核细胞，内皮细胞培养液M199培养基培养（含20％FCS＋15ng／ml VEGF），种植于提前包埋了纤维连接蛋白的六孔板培养，应用免疫荧光和流式细胞技术鉴定内皮细胞系列标志：CD34、CD31、Flk-1和祖细胞标志CD133。并通过检测其对FITC标记的UED-1的吸附和内吞DiI-acLDL来进行细胞功能学的鉴定。结果：经过梯度密度离心和贴壁法选择的细胞表达内皮细胞特异性抗原CD34、CD31、Flk-1，部分表达CD133。大鼠骨髓单个核细胞经体外诱导分化，培养第5～14天的贴壁细胞不同程度的表达CD34、CD31、Flk-1和CD31。培养第9天流式细胞仪检测其阳性率分别为（40．12±6．28）％、（15.62±4．31）％、（44．05±8．20）％和（76．1±7．20）％，细胞能特异性吸附FITC标记的荆豆凝集素并内吞DiI-acLDL，并且在Matrigel上可以形成毛细血管样。结论：大鼠骨髓可以分离培养内皮祖细胞并能体外扩增，为内皮祖细胞的移植研究奠定了基础。
- 刘峰费然丛旭刘志达魏来
- 关键词：内皮细胞细胞培养技术
- 内皮祖细胞移植在四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化模型中的作用被引量：6
- 2007年
- 目的研究内皮祖细胞（EPCs）移植对CCl4诱导的大鼠肝纤维化的影响。方法选用雌性健康SD大鼠,共24只。采用25％的CCl4/橄榄油灌胃8周制成SD大鼠肝纤维化模型,随机处死8只为CCl4处理8周组,再随机取16只分成EPCs回输组和等渗盐水对照组,每组各8只。在EPCs回输组,EPCs经门静脉回输入大鼠体内；等渗盐水对照组,门静脉回输入等体积的等渗盐水,回输4周后处死所有大鼠,取肝组织石蜡切片,进行苏木精-伊红常规染色和Masson三色染色法；免疫组织化学染色检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和CⅢ,进行组织学和纤维化评估,同时取血清进行生化检测评估肝功能。结果与等渗盐水对照组相比,EPCs回输组中,肝组织学活动指数（HAI）,ALT、AST和TBil水平降低,Alb水平高,α-SMA和CⅢ表达少（P＜0．05）；与CCl4处理8周组相比,EPCs回输组中,HAI、ALT、AST和TBil水平降低,其他指标差异无统计学意义；等渗盐水对照组中HAI、ALT、AST和TBil水平升高,Alb水平降低（P＜0．05）。结论在肝纤维化发展过程中,门静脉回输EPCs,可以减轻肝脏炎症损伤,同时改善CCl4诱导的肝纤维化程度。
- 刘峰费然饶慧瑛丛旭哈明昊魏来
- 关键词：肝纤维化内皮祖细胞
