深圳市科技计划项目(200902138)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：喻海琼袁萍李金生周一平胡川更多>>
- 相关机构：深圳大学深圳市福田区人民医院南昌大学更多>>
- 发文基金：深圳市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 杂色曲霉菌变应原分离、鉴定及纯化
- 2011年
- 目的对杂色曲霉菌变应原蛋白进行分离、鉴定与纯化。方法提取杂色曲霉菌蛋白质,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离,用免疫印迹(western-blot)鉴定变应原成分,用western-blot法鉴定出了6种变应原,通过离子交换和凝胶过滤层析纯化变应原。结果碳酸氢盐-盐水提取液(Coca’s液)共提取出23条蛋白质条带,分子量为17、20和62 kD的蛋白质为杂色曲霉菌主要变应原,而分子量为22、35和76kD的蛋白质为次要变应原;通过各种层析纯化变应原,得到含有分子量为20kD主要变应原和35kD的次要变应原的组分。结论鉴定了杂色曲霉菌的主要和次要变应原并部分纯化出其变应原组分,为变态反应疾病的诊断和治疗提供依据。
- 喻海琼周一平胡川李金生
- 关键词：变应原离子交换层析凝胶过滤层析
- 他克莫司滴鼻治疗过敏性哮喘小鼠的实验研究被引量：1
- 2012年
- 目的探讨免疫抑制剂他克莫司(tacrolimus)滴鼻疗法对过敏性哮喘小鼠的治疗效果和机制。方法将24只雌性BALB/c小鼠随机分为4组,分别为阴性对照组(A组)、模型对照组(B组)、低剂量治疗组(C组)和高剂量治疗组(D组)。除A组外,其他各组在第0、7和14天分别用50μg粉尘螨变应原提取液+2 mg氢氧化铝腹腔注射小鼠致敏,A组腹腔注射等量生理盐水。自第28天开始,乙醚麻醉小鼠后,A、B、C和D组分别用100μl生理盐水、PBS、0.01%他克莫司和0.1%他克莫司滴鼻治疗,连续治疗7 d,1次/d,每次治疗同时用50μl(1 mg/ml)粉尘螨变应原滴鼻激发1次。末次激发后24 h,检测小鼠的气道高反应性;末次激发后48 h,处死小鼠,行支气管肺泡灌洗,无菌摘取肺组织和脾脏。记录支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和嗜酸粒细胞数。ELISA法检测BALF和脾细胞培养上清的白介素4(IL-4)、IL-5和γ干扰素(IFN-γ)水平。通过苏木素-伊红染色(HE)和阿尔辛蓝(AB)染色观察小鼠肺部炎症和杯状细胞黏液分泌情况。结果与B组相比,D组气道高反应性显著降低(P<0.05),肺部病理改变(炎症细胞浸润和黏液分泌)明显减轻。D组的BALF中细胞总数[(29.9±5.2)×104/ml](P<0.05)和嗜酸粒细胞数[(4.3±0.8)×104/ml](P<0.01)均比B组[分别为(59.3±6.0)×104/ml和(22.7±5.7)×104/ml]显著减少。D组BALF中IL-4[(22.49±4.96)pg/ml](P<0.05)、IL-5[(43.90±13.15)pg/ml](P<0.01)和IFN-γ[(10.17±1.09)pg/ml](P<0.05)均显著低于B组[分别为(57.02±7.38)、(133.49±15.63)和(15.32±3.23)pg/ml]。D组的脾细胞培养上清中IL-4[(22.54±4.58)pg/ml]、IL-5[(36.31±20.85)pg/ml]和IFN-γ[(11.28±1.79)pg/ml]亦显著低于B组[分别为(56.34±6.21)、(72.32±6.23)和(18.82±1.88)pg/ml](均P<0.05)。整个实验中,C组与B组均无明显差异。结论他克莫司对粉尘螨致敏小鼠具有一定免疫治疗作用,可能与其抑制T淋巴细胞因子分泌有关。
- 喻海琼袁萍黄映华李惠琼周一平
- 关键词：他克莫司小鼠滴鼻治疗哮喘模型粉尘螨
