重庆市卫生局医学科研项目(03-2-078) 作品数:4 被引量:8 H指数:2 相关作者: 吴小候 刘彦慧 罗春丽 蔡晓钟 蒲军 更多>> 相关机构: 重庆医科大学附属第一医院 重庆医科大学 更多>> 发文基金: 重庆市卫生局医学科研项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
检测尿液CK20的胶体金试条研制及初步应用 被引量:3 2007年 目的建立用于筛查膀胱癌的尿液细胞角蛋白20(CK20)单克隆抗体胶体金检测试条,并与常用方法比较。方法用自行研制的CK20单克隆抗体,建立检测CK20的胶体金试条,对膀胱移行细胞癌(TCC)、泌尿系统良性疾病和健康人尿液进行检测,同时与尿液膀胱癌金标检测板(UBC)和膀胱肿瘤抗原(BTA)检测板的检测结果比较。结果CK20试条法与UBC、BTA法的敏感性、特异性、阳性似然比、阴性似然比之间均无显著性差异(P>0.05)。3种方法敏感性随TCC病理分级而增高,但3法差异不显著(P>0.05)。对20例TCC患者术后监测,3法结果也一致。结论CK20试条法具有特异性好、敏感性高、操作简单、快速,一般实验室可开展的特点,可用于膀胱癌快速筛查和疗效观察。 刘彦慧 罗春丽 吴小候 蔡晓钟 蒲军 赵培 欧俐苹 唐敏关键词:膀胱癌 细胞角蛋白20 尿液 细胞角蛋白20单克隆抗体免疫胶体金试纸条的研制 被引量:1 2007年 目的研制用于尿液检查的细胞角蛋白20单克隆抗体免疫胶体金试纸条(CK20试条),建立一种无创性筛选诊断和检测膀胱癌复发的新的检测手段。方法将经处理的CK20单抗标记在胶体金颗粒上并活性进行鉴定,合格后吸附在硝酸纤维膜上并固定在长方形硬质塑料胶片一端为测定线;同时将吸附有IgG蛋白胶体金的硝酸纤维膜固定在测定线的一侧为质控线。将制成的CK20试条吸样端浸入尿液测定。结果成功的制备CK20试条,初步临床用于膀胱癌检测,敏感性78%(39/50),特异性为87%。结论采用该方法制备的CK20试条对膀胱癌患者尿液的检测具有较好的灵敏度和特异性,可用于膀胱癌瘤患者筛检诊断和复发的检测。 刘彦慧 罗春丽 吴小候 蔡晓钟 赵培 欧俐苹 唐敏 胡宏波 蒲军关键词:单克隆抗体 胶体金 快速检测尿液CK20方法的建立 被引量:1 2007年 目的建立快速用于筛查膀胱移行细胞癌(transitional cell carcinoma of bladder,TCC)的尿液细胞角蛋白20(CK20)单克隆抗体胶体金检测试条的方法。方法自行研制CK20单克隆抗体,建立CK20单克隆抗体胶体金试条,对膀胱移行细胞癌、泌尿系统良性疾病和健康人尿液进行检测。结果成功获得一株稳定分泌抗CK20单克隆抗体的杂交瘤细胞,其腹水抗体和纯化的抗体效价均为1∶106,Western-blotting显示得到纯化CK20单克隆抗体。CK20试条检测结果:50例膀胱移行细胞癌患者尿样检出阳性率为78%(39/50),特异性为87%。20例泌尿系统良性疾病患者血尿检测的阳性率是25%(5/20),20例健康人尿液检测均阴性。肿瘤组与对照组敏感性之间差异具有统计学意义(P<0.005)。结论CK20试条法具有特异性好、敏感性高、操作简单、快速和一般实验室可开展的特点,可作为膀胱移行细胞癌快速筛查和疗效观察的一种新方法。 吴小候 蒲军 刘彦慧 唐敏 罗春丽关键词:膀胱移行细胞癌 胶体金试纸条 尿液 CK20单克隆抗体研制及鉴定 被引量:3 2005年 目的:研制CK20单克隆抗体.方法:采用CK20抗原免疫小鼠,用免疫的脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞通过PEG4000融合,以HT培养基选择培养,间接ELISA法筛选阳性孔和有限稀释法克隆细胞后,接种小鼠腹腔制备腹水抗体,抗体纯化采用以SPA-Sepharose CL-4B为固定相的亲和层析法,最后用双向琼脂扩散法、Western blot和间接ELISA法鉴定抗体的特异性、Ig亚型和效价.结果:获得一株稳定分泌抗CK20单克隆抗体的杂交瘤细胞,染色体众数为101(99~103),其腹水抗体和纯化的抗体效价均为1:106,属IgG1亚型.结论:成功获得了CK20单克隆抗体,命名为L20031030,其特异性强,效价高. 刘彦慧 罗春丽 吴小候 蔡晓钟关键词:杂交瘤技术 WESTERN BLOT ELISA