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国家重点基础研究发展计划(2011CB944000)
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宫内生理性低氧微环境对哺乳动物胚胎早期肾脏发育的影响
2014年
目的研究宫内生理性低氧微环境对哺乳动物胚胎早期肾脏发育的影响。方法采用大鼠胚胎肾脏体外培养的方法建立肾脏发育模型,应用低氧培养箱模拟胚胎发育早期宫内生理性低氧微环境,免疫荧光染色技术标记胚肾输尿管芽分枝和后肾间充质向上皮转分化过程,激光共聚焦显微镜观察胚肾发育形态学变化;原位末端转移酶标记技术(TUNEL法)检测胚-肾细胞凋亡的变化,胸腺嘧啶核苷类似物(EdU)掺人法检测胚。肾细胞增殖的变化,实时荧光定量PCR法检测胚肾发育相关基因表达的变化。结果体外培养条件下低氧(3%~5%O2)微环境显著抑制胚肾发育,输尿管芽分枝和肾小球数目均减少(P〈0.05)。低氧(5%O2)条件下胚肾细胞的凋亡程度较常氧下显著减轻,细胞增殖则受到了显著抑制(P〈0.05)。低氧增强胚肾后肾间充质Six2阳性干细胞的自我更新,上调Six2、Wt-1等发育重要相关基因的表达,下调Wnt9b和Wnt4等诱导分化相关基因的表达。结论宫内生理性低氧微环境可能通过影响哺乳动物胚肾发育相关信号通路抑制胚肾干细胞的增殖和分化,从而促进胚肾干细胞维持自我更新。
郭佳
朱加明
俞小芳
焦晓燕
刘少鹏
蔡洁茹
滕杰
丁小强
关键词:
胚胎发育
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