国家科技重大专项(2009ZX09503-013)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 相关作者：张元兴孙祥明滕小锘易小萍周祥山更多>>
- 相关机构：华东理工大学山东阿华生物药业有限公司新加坡科技研究局更多>>
- 发文基金：上海市教育委员会重点学科基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 胞外唾液酸酶造成工程中国仓鼠卵巢细胞株所产人源重组促红素唾液酸含量降低被引量：1
- 2012年
- 为了对工程中国仓鼠卵巢(CHO)细胞所产人源重组促红素(rhEPO)的N-糖基化特点进行考察,静置培养工程细胞后,通过等电聚焦和凝集素共沉淀对培养上清中的rhEPO进行分析,并对无血清培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)和唾液酸酶活性进行检测,发现这株CHO细胞可以表达唾液酸含量较高的rhEPO蛋白。但是随着培养时间的延长,细胞的存活率逐渐降低,死亡的细胞将胞内的唾液酸酶释放到胞外,唾液酸酶的降解作用会造成N-糖链分枝末端的唾液酸占有率降低,导致rhEPO蛋白糖基化形态的变化。所使用的方法及得到的结果为进一步对工业过程进行分析提供了参考。
- 刘颖慰周祥山刘海峰宋志伟张元兴
- 关键词：N-糖基化细胞活性唾液酸酶
- 表达乙型肝炎表面抗原的重组CHO细胞无血清培养基的优化及生物反应器培养被引量：4
- 2010年
- 目的优化表达乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的重组CHO细胞的无血清培养基,并进行生物反应器高密度培养。方法通过对现有重组CHO细胞无血清培养基SFMB的氨基酸、蛋白类激素、蛋白水解物等的优化,建立针对表达HBsAg的重组CHO细胞无血清低蛋白(<10mg/L)培养基SFMC。并利用此培养基在生物反应器中分批、流加、灌注悬浮培养重组CHO细胞,通过最大细胞密度和HBsAg产率评价不同的培养模式。结果 SFMC与原培养基SFMB相比,使重组CHO细胞的最大细胞密度提高了20%,HBsAg表达量提高了25%。在生物反应器培养过程中,灌注培养的重组CHO细胞表达的HBsAg产率为0.70mg/(L·d),较分批和流加培养的0.30mg/(L·d)提高了约133%。结论通过无血清培养基优化及生物反应器高密度培养,可显著提高重组CHO细胞表达HBsAg的效率。
- 滕小锘易小萍孙祥明张元兴
- 关键词：CHO细胞生物反应器
