温州市科技计划项目(Y20090311)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- 高血压大鼠SLC7A8基因腺病毒载体的构建及鉴定
- 2012年
- 目的构建携带SLC7A8基因的重组腺病毒载体,为进一步研究SLC7A8基因的功能作准备。方法含SLC7A8目的基因编码序列(coding domain sequence,CDS)的互补DNA(complementary DNA,cDNA)的pGEM-TEasy载体测序分析正确后,再将其连接入重组腺病毒载体。以双酶切和测序鉴定正确后,将pAdxsi-GFP-SLC7A8重组腺病毒载体转染大鼠肾小管上皮细胞(rat renal tubular epithelial cells-52e,NRK-52E),流式细胞仪测定转染效率,反转录聚合酶链反应法检测转染后SLC7A8 mRNA的表达。结果 pAdxsi-GFP-SLC7A8重组腺病毒载体构建成功,流式细胞仪测定重组腺病毒载体转染NRK-52E效率为94.1%,且证实转染后肾小管上皮细胞的SLC7A8 mRNA表达。结论本研究成功构建pAdxsi-GFP-SLC7A8重组腺病毒载体,并成功转染NRK-52E细胞,这为我们进一步探索SLC7A8基因的生物学功能奠定了基础。
- 洪承吕王本极杨德业张怀勤
- 关键词：高血压腺病毒科基因
