国家自然科学基金(30070747)
- 作品数：8 被引量：41H指数：4
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- 大肠癌细胞膜磷脂变化与蛋白激酶C同工酶表达对肝转移影响的研究被引量：7
- 2004年
- 目的 探讨结直肠癌细胞膜磷脂变化与蛋白激酶C(PKC)同工酶表达的关系及对肝转移的影响。 方法 采用高效液相色谱法 ,检测 5 8例大肠癌标本 (大肠癌原发灶、癌旁肠黏膜、肝转移灶 )的细胞膜磷脂酰肌醇 (PI)、磷脂酰丝氨酸 (PS)、磷脂酰乙醇胺 (PE)和磷脂酰胆碱 (PC)。用QRT PCR方法检测PKC α、 βⅡ、 δ、 ε、 λ、 ζ同工酶mRNA表达。 结果 检测在癌原发灶、肝转移灶中 ,PI、PE、PC含量高于癌旁肠黏膜组织。肝转移灶与原发灶中PI、PC含量无显著性差异 (t =1 73,t=1 36 ,P >0 0 5 ) ,PE含量显著高于癌原发灶 (t=98 88,P <0 0 1)。癌原发灶和肝转移灶中PKC α表达水平降低。PKC βⅡ、 δ、 ε、 λ、 ζ表达高于癌旁肠黏膜组织 ,肝转移灶中PKC δ、 ε、 λ、 ζ表达高于癌原发灶 (t=4 31,P <0 0 5 )。PI、PC与PKC βⅡ呈正相关。PE与PKC δ、 ε、 λ、 ζ呈正相关 ,与PKC α呈负相关。 结论 细胞膜磷脂PI、PC增高 ,PKC α/PKC βⅡ比例改变与大肠癌发生有关。PE升高 ,PKC δ、 ε、 λ、 ζ增强表达促进结直肠癌肝转移。
- 李世拥于波安萍梁振家苑树俊蔡惠云
- 关键词：细胞膜磷脂蛋白激酶C同工酶肝转移
- 蛋白质酵母双杂交系统的建立及其在大肠癌肝转移研究中的意义被引量：9
- 2004年
- 目的 建立酵母双杂交系统 ,筛选与FasL相互作用的蛋白 ,探讨FasL与大肠癌肝转移的关系。方法 以FasL基因构建诱饵蛋白质粒 ,筛选人胎肝cDNA文库 ,鉴定与FasL相互作用的蛋白 ,通过生物信息学分析FasL及其相互作用蛋白在大肠癌肝转移中的作用。结果 筛选出 10个与FasL特异性相互作用的蛋白 ,包括金属硫蛋白 1K、1G、2A ,组织蛋白酶B ,脂肪酸合成酶 ,干扰素α诱导蛋白 2 7,磷脂清除酶 ,丝氨酸 /苏氨酸样激酶 ,锚着黏附蛋白以及纤维微丝蛋白 5等。结论 成功建立了筛选FasL相互作用蛋白的酵母双杂交系统 ,并初步证明FasL与组织蛋白酶、金属硫蛋白。
- 左富义李世拥安萍于波蔡慧芸
- 关键词：蛋白质酵母双杂交系统大肠癌肝转移
- 细胞膜磷脂组分含量变化与结直肠癌生物学行为的关系研究被引量：8
- 2003年
- 目的探讨结直肠癌细胞膜磷脂变化对结直肠癌生物学行为的影响。方法检测48例癌原发灶、癌旁肠黏膜、肝转移灶中细胞膜磷脂酰肌醇(phosphatidylinosital,PI)、磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)、磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine,PE)和磷脂酰胆碱(phosphatidylc-holine,PC),对比分析不同膜磷脂组分含量变化与癌原发灶大小、病理组织学类型和微血管密度的关系。结果48例结直肠癌患者癌旁肠黏膜、原发灶、肝转移灶中细胞膜磷脂PI含量分别为(0.92±0.12)mg/g、(1.57±0.14)mg/g、(1.54±0.15)mg/g;PC含量分别为:(56.47±5.33)mg/g、(108.57±6.37)mg/g、(116.35±6.85)mg/g。原发灶和肝转移灶中PI、PC含量明显高于癌旁肠黏膜组织(F=363.10、870.10,P<0.01)。3种组织中PE含量分别为(18.23±3.56)mg/g、(42.02±4.33)mg/g、(79.51±5.52)mg/g,肝转移灶中PE含量显著高于原发灶和癌旁组织(F=1149.63,P<0.01)。不同大小的癌原发灶4种膜磷脂组分含量差异无显著性意义(F=0.011、0.026、0.305、1.483;P>0.05)。结论细胞膜磷脂变化对结直肠癌细胞的生物学行为可能有重要影响。PI、PC变化与结直肠癌的发生有关,PE含量升高与结直肠癌肝转移有密切关系。
- 安萍于波李世拥张英男魏家臣蔡慧芸
- 关键词：结肠直肠肿瘤细胞膜磷脂类生物学
- 细胞膜磷脂变化与大肠癌发生及肝转移关系的研究被引量：3
- 2002年
- 目的 探讨大肠癌原发灶、癌旁肠粘膜及肝转移灶组织中细胞膜磷脂的变化 ,研究细胞膜磷脂代谢及其信号转导途径与大肠癌发生及肝转移的关系。 方法 采用高效液相色谱法 ,检测 48例大肠癌原发灶、癌旁肠粘膜、肝转移灶中细胞膜磷脂酰肌醇 (PI)、磷脂酰丝氨酸 (PS)、磷脂酰乙醇胺 (PE)和磷脂酰胆碱 (PC) ,对比分析不同膜磷脂组分含量变化。 结果 48例大肠癌患者癌旁肠粘膜、原发灶、肝转移组织中细胞不同膜磷脂含量 (mg/g) ,PI为 :0 92± 0 12、1 5 7± 0 14、1 5 4±0 15 ;PC含量为 :5 6 47± 5 33、10 8 5 7± 6 37、116 35± 6 85。原发灶和肝转移组织中PI、PC含量高于癌旁粘膜组织 (F =36 3 10 ,870 10 ,P <0 0 1)。 3种组织中PE(mg/g)含量分别为 :18 2 3± 3 5 6、42 0 2± 4 33、79 5 1± 5 5 2 ,肝转移组织中PE含量显著高于原发灶和癌旁组织 (F =1149 6 3,P <0 0 1)。肝转移组与无肝转移组癌原发灶中PI、PS、PC含量差异无显著性意义 (t=3 5 5 ,P >0 0 5 )。但肝转移组中转移灶PE含量显著增高 (t=115 87,P <0 0 1)。 结论 大肠癌发生及肝转移过程中细胞膜磷脂有明显变化 ,PI、PC增高与大肠癌发生有关 ,PE增高与癌细胞浸润。
- 李世拥于波安萍梁振家苑树俊蔡惠云
- 关键词：细胞膜磷脂大肠癌肝转移细胞膜
- 草酸铂、5-氟尿嘧啶联合多药耐药基因反义RNA对耐药直肠癌细胞杀伤作用的研究被引量：10
- 2006年
- 目的应用基因克隆技术,将多药耐药基因(multidrugresistancegene,MDR1)反义RNA转染入对氟尿嘧啶(5-FU)耐药直肠癌细胞(8348R)中,封闭正义MDR1的转录和表达,联合应用草酸铂及5-FU共同作用于8348R,观察其联合杀伤作用。方法构建含MDR1反义RNA的真核表达质粒PC-MDR1;以绿色荧光蛋白(greenfluorescenceprotein,GFP)基因作为报告基因,观察在草酸铂作用下GFP基因对8348R细胞的转染效率,用克隆形成试验观察草酸铂对PC-MDR1质粒转染8348R细胞的影响;用MTT试验检测草酸铂联合5-FU及MDR1反义RNA对8348R细胞的杀伤效率。结果转染PC-MDR1质粒后,8348R细胞在5-FU作用下较转染前活性明显下降,转染后细胞出现明显的S期和G2/M期阻滞,细胞凋亡比例显著升高;草酸铂将PC-MDR1质粒对直肠癌细胞的转染效率提高18倍,IC50剂量草酸铂、5-FU联合MDR1反义RNA可大大提高对8348R细胞的杀伤效率,总体杀伤效率可达到75%。结论应用草酸铂、5-FU联合MDR1反义RNA对直肠癌耐药细胞的协同杀伤作用,可望成为治疗对5-FU耐药的直肠癌的有效方法。
- 陈纲李世拥于波安平蔡慧芸
- 关键词：氟尿嘧啶多药耐药
- 肿瘤转移与膜磷脂作用的研究进展被引量：2
- 2002年
- 张英男李世拥
- 关键词：肿瘤转移膜磷脂
- 蛋白质分步提取法的建立及在大肠癌蛋白质组研究中的应用
- 2004年
- 利用等电聚焦/聚丙烯酰胺双向凝胶电泳(2-DE)对蛋白质进行分离是蛋白质研究的核心技术之一[1].目前常用的蛋白样品制备和提取方法存在一定缺陷,直接影响蛋白质组的分析结果.我们在大肠癌发生、发展的蛋白质组研究中,采用分步提取法,以3种分别适于溶解高、中、低、亲水性蛋白质的裂解液提取正常结直肠黏膜组织和癌组织中的蛋白质组成分,进行双向电泳,提高了蛋白质提取率和2-DE分辨率,现报道如下.
- 张英男安萍李世拥于波蔡慧芸
- 关键词：大肠癌癌蛋白2-DE癌发生蛋白质组双向凝胶电泳
- 大肠癌细胞膜磷脂变化与蛋白激酶C同功酶表达对肝转移的影响被引量：4
- 2003年
- 目的 :探讨结直肠癌细胞膜磷脂变化与蛋白激酶C(PKC)同功酶表达的关系及对肝转移的影响。方法 :采用高效液相色谱法 ,检测大肠癌原发灶、癌旁肠黏膜、肝转移灶细胞膜磷脂酰肌醇 (PI)、磷脂酰丝氨酸(PS)、磷脂酰乙醇胺 (PE)和磷脂酰胆碱 (PC)。采用QRT -PCR方法检测PKC -α -ε- ζ同功酶mRNA的表达。结果检测 4 8例大肠癌标本。在癌原发灶、肝转移灶中 ,PI、PE、PC含量高于癌旁肠黏膜组织 (P <0 .0 1)。肝转移灶与原发灶相中PI、PC含量无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,PE含量显著高于癌原发灶 (P <0 .0 1)。癌原发灶和肝转移灶中PKC -ε、- ζ表达高于癌旁肠黏膜组织 (P <0 .0 1) ,PKC -α表达水平降低。PE含量与PKC -ε、- ζ表达成正比 ,与肝转移呈正相关。PKC -α表达与PE含量成反比 ,与肝转移呈负相关。结论 :细胞膜磷脂PE含量升高 ,PKC -ε、- ζ增强表达和PKC -α表达水平降低与结直肠癌肝转移有密切关系。
- 于波李世拥安萍梁振家苑树俊蔡惠云
- 关键词：结肠直肠肿瘤膜磷脂蛋白激酶C肝转移
