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耐氟康唑白念珠菌ERG11的基因突变被引量：16: 2002年; 目的　研究国内临床耐氟康唑白念珠菌的吡咯类药物作用靶酶———细胞色素P 45 0羊毛固醇 14 α脱甲基酶的基因ERG11突变。方法　用酶消化和碱裂解法抽提基因组DNA ,PCR扩增ERG11基因的读码框片段 ,将目的片段与PBS载体 (BluscriptM 13)连接 ,重组体转入DH5α中 ,从而测定序列。结果　在 15株耐药菌中共发现了 12个有义点突变、17个无义点突变和一个菌株的部分移码。 12个有义点突变的氨基酸变异是F72L、D81G、D116E、K12 8T、Y132H、E2 6 6D、D2 94G、S36 1P、M 374V、P386L、H40 0R和Q474K ,突变主要靠近羧基端 ;而敏感株的氨基酸变异为F72L、K12 8T和E2 6 6D ,靠近氨基端。耐药株的D2 94G、S36 1P、M374V、P386L、H40 0R和Q474K氨基酸变异与文献报道不同。结论　耐药株和敏感株的点突变不同 ,D2 94G、S36 1P、M374V、P386L、H40 0R和Q474K变异位点可能与耐药性有关 ,做整段编码基因的功能表达。; 龙丰张永信兰和魁王荫榆朱德妹任大明; 关键词：氟康唑白念珠菌 ERG11 耐药性基因突变细胞色素P-450

白色念珠菌ERG11突变基因在毕氏酵母中的表达: 2008年; 目的将含有点突变的白色念珠菌编码基因ERG11克隆至毕氏酵母中进行表达，判断其在白色念珠菌对氟康唑敏感性中的作用。方法将含有点突变的白色念珠菌编码基因ERG11与pPm3．5K载体重组，构建pPiC3．5K／Ca1．6k重组体，经Top10F’鉴定和筛选，电转入毕氏酵母GS115中，经过诱导表达出现目的蛋白后，进行药物敏感性试验，确定点突变与耐药的关系。结果含Y132H突变转化菌株和含Q474K突变的转化菌株对氟康唑的MIC分别上升16倍和8倍，证实其突变与耐药有关。结论氟康唑耐药可发生于白色念珠菌编码基因ERG11的Y132H与Q474K点突变中。; 龙丰张永信兰和奎任大明; 关键词：ERG11 毕氏酵母耐药性

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国家自然科学基金(39870011)