公共文化服务平台

共 2 条记录，以下是 1-2

全选清除导出

排序方式：

核心蛋白聚糖蛋白对人结肠癌HCT-8细胞的生物学作用: 2013年; 为探讨核心蛋白聚糖（decorin，DCN）蛋白对人结肠癌HCT8细胞的生物学作用，本实验将重组载体PcDNA3．1DCN／His（MDCN）稳定转染入HCT一8细胞，并将携带有目的基因的细胞进行扩增培养，然后应用RT—PCR及WesternBlot法对M—DCN在细胞mRNA及蛋白水平的表达分别进行鉴定，应用MagExtractor方法提取携带有M—DCN基因组HCT-8细胞（HCT-8-DCN）中的DCN蛋白，应用Bradford法测定提取蛋白的含量；同时，按DCN蛋白30μg／ml对HCT-8细胞进行培养，应用MTT法检测细胞增殖活力，细胞培养96h后用流式细胞术分析细胞周期。结果显示，RT—PCR及WesternBlot实验均可见到目的条带，证实MDCN转染HCT8细胞成功并实现稳定表达。实现了针对6个组氨酸标签使用MagExtractor方法对DCN蛋白的提取。加入DCN蛋白培养HCT-8细胞组细胞生长曲线呈现为生长抑制；流式细胞术结果提示G1期细胞显著增多。结果表明，DCN蛋白具有抑制HCT8细胞增殖的作用。; 韩旭王玲玲; 关键词：核心蛋白聚糖蛋白纯化 HCT-8细胞生物学作用

核心蛋白聚糖基因改造及真核表达载体的构建: 2013年; 目的改造核心蛋白多糖基因(DCN)并构建真核表达载体,为进一步探讨DCN蛋白的肿瘤抑制作用奠定基础。方法以含有重组DCN的质粒pBluescript为模板采用聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因片段。真核表达载体pcDNA3.1及PCR产物经EcoRⅠ及XhoⅠ双酶切后连接,转化入大肠杆菌JM109中,获得重组载体pcDNA3.1-DCN/His(M-DCN),进行酶切鉴定和测序鉴定。结果 PCR获得目的片段(1 119 bp),重组载体pcDNA3.1-DCN/His经双酶切及测序证实,DCN的cDNA片段正确插入真核表达载体中。结论成功构建含有M-DCN基因的真核表达载体。; 韩旭王玲玲; 关键词：核心蛋白聚糖真核表达载体

全选清除导出

共1页<1>

吉林省卫生厅科研基金(20122017)