国家自然科学基金(30900516)
- 作品数：4 被引量：14H指数：3
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- 控制性超促排卵对小鼠卵母细胞线粒体数目和功能的影响被引量：3
- 2013年
- 目的 探讨控制性超促排卵（COH）对小鼠卵母细胞胞质内线粒体数目、分布、氧化磷酸化（OXPHOS）活性以及活性氧生成的影响,进而分析COH来源的卯母细胞高损失率的可能机制.方法 将实验小鼠随机分为COH组（20只）和对照组（40只）,采用实时定量PCR技术、免疫荧光和荧光素-荧光素酶反应发光法分别检测两组小鼠卵母细胞线粒体DNA （mtDNA）拷贝数、线粒体膜电位（△Ψm）强度、三磷酸腺苷（ATP）含量、线粒体分布和胞质内活性氧水平.结果 卵母细胞mtDNA平均拷贝数对照组为（2.16±0.19）× 105,COH组（1.15±0.10） ×105,两组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;COH组卵母细胞的平均△Ψm强度和ATP平均含量分别为0.34±0.03和（241±20）fmol/枚,对照组分别为0.82±0.07和（325±11） fmol/枚,两组分别比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）.两组间线粒体呈均匀分布的卵母细胞比率[COH组76.5％（78/102）、对照组82.1％（69/84）]比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）.卵母细胞胞质内活性氧水平COH组为1.07±0.07,对照组为0.93±0.08,两组比较,差异也无统计学意义（P＞0.05）.结论 非生理性的COH过程抑制了卵母细胞线粒体DNA复制和OXPHOS活性,继而可能影响卵母细胞细胞质的成熟进程,这可能是COH周期卵母细胞高损失率的发生机制.
- 葛红山张帆李晓和陈华习海涛黄检英朱春芳吕杰强
- 关键词：排卵诱导卵母细胞氧化磷酸化活性氧
- 线粒体DNA拷贝数对卵母细胞受精结局的影响被引量：6
- 2012年
- 目的研究线粒体DNA拷贝数对卵母细胞受精结局的影响,为提高卵子质量,改善体外受精结局提供新思路。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应技术检测不同受精结局的卵母细胞线粒体DNA(mtDNA)拷贝数,并对各组结果作比较分析。结果 A组52枚未受精卵的平均mtDNA拷贝数为(80,547±37,314)copies/μl,B组46枚发生原核阻滞的正常受精合子平均mtDNA拷贝数为(104,311±43,074)copies/μl,C组61枚单原核(1PN)或三原核(3PN)胚胎平均mtDNA拷贝数为(192,681±51,394)copies/μl。拷贝数A组显著小于B、C两组(P<0.01),B组显著小于C组(P<0.05)。C组中碎片率>30%的较差胚胎(C1组)和碎片率<5%、发育速度正常的良好胚胎(C2组)两个亚组,两组的平均mtDNA拷贝数分别为(146,836±36,585)copies/μl和(297,268±102,369)copies/μl,两组比较结果有显著性差异(P=0.000)。结论线粒体DNA拷贝数可作为衡量卵母细胞和胚胎质量的重要指标,线粒体缺乏可能是部分体外受精失败的原因。
- 戴蜜蜜胡珍吕杰强葛红山
- 关键词：线粒体线粒体DNA卵母细胞受精早期胚胎发育
- 线粒体能量代谢和DNA复制对小鼠卵子体外成熟、受精及发育的影响被引量：4
- 2013年
- 目的探讨胞质线粒体的氧化磷酸化(OXPHOS)活性或线粒体DNA复制在卵子成熟、受精和胚胎发育过程中的作用。方法通过在小鼠体外成熟培养液中引入不同浓度的羰基氰4-(三氟甲氧基)苯腙(FCCP,10 nmol/L和100nmol/L)或2',3'-双脱氧胞苷(ddC,10μmol/L和100μmol/L),抑制线粒体OXPHOS活性或线粒体DNA复制,统计分析各组卵子的体外生发泡破裂(GVBD)率、核成熟率、受精率及囊胚形成率,以分析线粒体功能抑制对卵子成熟、受精和胚胎发育的影响。结果线粒体OXPHOS活性和DNA复制功能在卵子和胚胎中所发挥的作用并不完全相同。FCCP抑制线粒体OXPHOS活性可显著降低卵子的核成熟率和囊胚形成率;但对卵子的GVBD的发生率和受精率无显著影响。而ddC抑制线粒体DNA复制不影响卵子的体外成熟和受精,但可显著抑制囊胚的形成。结论 OXPHOS活性主要影响卵子成熟及胚胎发育;线粒体DNA复制则主要影响胚胎发育;而线粒体功能抑制不影响卵子的成熟启动和体外受精。
- 葛红山李晓和张帆陈华习海涛黄检英朱春芳吕杰强
- 关键词：线粒体能量代谢发育潜能
- 卵子体外成熟对胞质线粒体DNA拷贝和功能的影响被引量：2
- 2013年
- 目的研究卵子体外成熟(IVM)过程对胞质内线粒体的数目、功能及卵子质量的影响,进而探讨IVM卵子低发育潜能的可能机制。方法实验小鼠随机分为IVM组和体内成熟(IVO)组;应用Real-time-PCR、免疫荧光和荧光-荧光素酶测定法,分别检测IVM和IVO来源卵子的线粒体DNA(mtDNA)拷贝数、线粒体膜电位强度、ATP含量、线粒体分布、胞质ROS水平、卵子骨架和染色体结构。结果相对于IVO卵子,IVM卵子的mtDNA拷贝数显著降低;而胞质ROS生成和纺锤体及染色体结构异常率则显著增加。胞质线粒体分布模型和氧化磷酸化活性在IVM和IVO卵子间差异无显著意义。结论非生理性IVM过程显著抑制了胞质mtDNA的复制,并增加了ROS生成和纺锤体和染色体结构异常,继而可能影响卵子细胞质的成熟进程,这可部分解释IVM卵子低发育潜能的机制。
- 葛红山李晓和张帆陈华习海涛黄检英朱春芳吕杰强
- 关键词：卵子线粒体细胞骨架体外成熟免疫荧光
