国家自然科学基金(39970638) 作品数:12 被引量:107 H指数:8 相关作者: 王春波 王玉贞 刘晓萍 于业军 姚如永 更多>> 相关机构: 青岛大学 青岛大学医学院附属医院 中国水产科学研究院黄海水产研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 青岛市科技局资助项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
UVB对HaCaT细胞凋亡的影响 被引量:9 2003年 ①目的 探讨紫外线B(UVB)对HaCaT细胞凋亡的影响及其作用机制。②方法 取培养的HaCaT细胞 ,用 30mJ/cm2 的UVB照射后继续培养 18h ,以流式细胞术检测细胞的凋亡率、线粒体膜电位和细胞内游离Ca2 +水平 ,用透射电镜观察细胞的超微结构。③结果 UVB照射增加了HaCaT细胞的凋亡率 (t =5 .2 36 ,P <0 .0 1) ,降低了线粒体膜电位 (t=6 .897,P <0 .0 1) ,升高了细胞内游离Ca2 + 水平 (t =6 .0 4 6 ,P <0 .0 1)。细胞的超微结构因UVB照射而遭到严重破坏 ,胞浆内的细胞器大量减少 ,线粒体严重空泡化 ,髓样小体形成 ,核内染色质成块并边聚。④结论 线粒体膜电位的下降和胞内游离Ca2 + 郭坤 纪凤芝 陶桂兰 陈祥国 武志峰 黄绵庆 王春波关键词:紫外线B HACAT细胞 细胞凋亡 线粒体膜电位 流式细胞术 扇贝多肽保护中波紫外线损伤HeLa上皮细胞的研究 被引量:10 2002年 目的探讨扇贝多肽对中波紫外线(UVB)照射下HeLa上皮细胞氧化损伤的保护作用。方法建立UVB(辐照强度为7.15×10-5J/cm2)对HeLa上皮细胞氧化损伤模型。HeLa上皮细胞随机分为6组,未辐射对照组、辐射损伤组犤损伤对照组、0.5%扇贝多肽(PCF)组、1%PCF组、2%PCF组、1%维生素C组犦。四唑盐比色法测定细胞活性;流式细胞仪测定细胞的凋亡率、死亡率和胞内游离Ca的含量;酶法测定抗氧化酶(谷胱甘肽、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、丙二醛)的含量及总抗氧化能力。结果离体条件下扇贝多肽:①显著增强HeLa上皮细胞的活性;②降低HeLa上皮细胞的凋亡率和死亡率;③显著提高HeLa上皮细胞内游离Ca的含量;④提高细胞上清液中谷胱甘肽、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶的活性,降低丙二醛含量,且呈量效正比关系。结论扇贝多肽在体外有抗UVB氧化损伤的作用。其作用机制可能是扇贝多肽通过提高抗氧化酶含量、清除自由基等,以减轻细胞凋亡而发挥其保护作用。 于业军 刘晓萍 王春波关键词:扇贝多肽 紫外线 HELA细胞 抗氧化药 皮肤损伤 Free radical scavenging abilities of polypeptide from Chlamys farreri 被引量:3 2006年 We investigated the radical scavenging effect and antioxidation property of polypeptide ex- tracted from Chlamys farreri (PCF) in vitro using chemiluminescence and electron spin resonance (ESR) methods. We examined the scavenging effects of PCF on superoxide anions ( O?2 ), hydroxyl radicals (OH·), peroxynitrite (ONOO-) and the inhibiting capacity of PCF on peroxidation of linoleic acid. Our experiment suggested that PCF could scavenge oxygen free radicals including superoxide anions ( O2? ) (IC50 =0.3 mg/ml), hydroxyl radicals (OH·) (IC50 = 0.2 μg/ml) generated from the reaction systems and effectively inhibit the oxidative activity of ONOO- (IC50 = 0.2 mg/ml). At 1.25 mg/ml of PCF, the inhibi- tion ratio on lipid peroxidation of linoleic acid was 43 %. The scavenging effect of PCF on O?2 , OH· and ONOO- free radicals were stronger than those of vitamin C but less on lipid peroxidation of linoleic acid. Thus PCF could scavenge free radicals and inhibit the peroxidation of linoleic acid in vitro. It is an anti- oxidant from marine products and potential for industrial production in future. 韩志武 初晓 刘成娟 王跃军 孙谧 王春波关键词:POLYPEPTIDE ANTIOXIDANT CHEMILUMINESCENCE 扇贝多肽对UVB损伤无毛小鼠皮肤结构及其抗氧化剂含量的影响 被引量:9 2004年 目的 : 本文探讨扇贝多肽 (PCF)对中波紫外线 (UVB)照射下小鼠皮肤的氧化损伤有无保护作用。方法 : 建立UVB(辐照强度为 5 .15× 10 - 2 J cm2 × 30天 )对无毛小鼠皮肤氧化损伤模型。昆明种无毛小鼠 ,随机分为双蒸水未照射组和UVB模型组 (双蒸水对照组、5 %PCF组、2 0 %PCF组、10 %维生素C组 )。光镜下测表皮平均厚度及成纤维细胞数目 ;电镜观察皮肤组织超微结构。酶法测定皮肤匀浆上清液中抗氧化酶 (谷胱甘肽GSH -Px、超氧化物歧化酶SOD、)的活性和丙二醛 (MDA)的含量及总抗氧化能力(T -AOC)。结果 : ①UVB损伤的对照组小鼠皮肤光镜下可见表皮变薄、成纤维细胞数量减少 ;电镜下表皮细胞胞质内可见空泡形成 ,真皮的成纤维细胞内可见囊泡状扩张的滑面内质网、粗面内质网等细胞器减少。②PCF能增加表皮的平均厚度和皮肤成纤维细胞的数量 ;超微结构显示PCF组表皮细胞结构正常 ,成纤维细胞的粗面内质网明显增多 ,与维生素C的抗氧化作用一致。③PCF可提高UVB辐射损伤小鼠皮肤组织的总抗氧化能力、SOD活性 ,降低MDA含量 ;与维生素C的抗氧化作用一致。结论 : 扇贝多肽与VitC一样具有抗UVB氧化损伤的作用。其作用机制可能与扇贝多肽提高抗氧化酶含量。 于业军 李政敏 刘晓萍 王玉贞关键词:扇贝多肽 无毛小鼠 皮肤结构 抗氧化剂 中波紫外线照射 P53蛋白、EGFR和P物质在扇贝多肽保护的中波紫外线辐射无毛小鼠皮肤中的表达 被引量:4 2004年 ①目的 研究局部应用扇贝多肽 (PCF)对中波紫外线 (UVB)长期辐射无毛小鼠皮肤组织P5 3蛋白、表皮生长因子受体 (EGFR)和P物质 (SP)表达的抑制作用。②方法 随机将昆明种无毛小鼠分为对照组 (Ⅰ组 )、UVB模型组 (Ⅱ组 )、UVB +5 0 g/LPCF组 (Ⅲ组 )、UVB +2 0 0g/LPCF组 (Ⅳ组 )和UVB +1 0 0 g/LVitC组 (Ⅴ组 )。Ⅰ组小鼠背部皮肤涂双蒸水 (每只 1mL/d) ,共 30d。Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组小鼠背部皮肤分别涂双蒸水、5 0 g/LPCF、2 0 0 g/LPCF和 1 0 0g/LVitC ,每只 1mL/d ,并经UVB辐射 (每天 1次 ,每次剂量为 5 .1 5× 1 0 -2 J·cm-2 ) 30d(总辐射剂量为 1 5 .4 5J·cm-2 )。免疫组化分析法检测无毛小鼠背部皮肤P5 3蛋白、EGFR及SP的表达。③结果 连续UVB辐射可致无毛小鼠皮肤突变型P5 3蛋白、EGFR及SP呈过度表达 ,Ⅱ组与Ⅰ组相比较 ,差异有显著意义 (F =5 4 .2 3~ 6 7.35 ,q =1 1 .2~ 1 9.3,P <0 .0 1 ) ;Ⅲ~Ⅴ组与Ⅱ组比较 ,突变型P5 3蛋白、EGFR及SP表达差异亦有统计学意义 (q =8.9~ 1 0 .5 ,P <0 .0 5 ) ;Ⅳ组与Ⅲ组相比较 ,突变型P5 3蛋白、EGFR及SP的表达均明显减弱 ,差异有统计学意义 (q =1 2 .5~ 1 4 .6 ,P <0 .0 5 )。 ④结论 PCF能够抑制UVB所致P5 3蛋白、EGFR和SP的过表达 。 张玉江 王美芝 张海平 张岫美 王春波关键词:扇贝多肽 表皮生长因子 P物质 小鼠 扇贝多肽减轻中波紫外线诱导人真皮成纤维细胞损伤的超微结构研究 被引量:8 2004年 目的:观察扇贝多肽(polypeptidefromChlamysfarreri,PCF)对中波紫外线(ultravioletB,UVB)辐射损伤体外培养的人真皮成纤维细胞超微结构的影响。方法:建立单次UVB辐射损伤体外培养的人真皮成纤维细胞的病理模型,应用透射电镜观察细胞超微结构的变化。结果:模型组成纤维细胞超微结构在2h后即出现变化,包括胞内空泡形成、线粒体嵴断裂、基质空泡化、粗面内质网扩张、核异染色质浓缩及边集,呈现早期细胞凋亡改变。而用0 25%~1%的PCF预处理细胞30min,可减轻成纤维细胞受损的程度,且呈量效关系。结论:扇贝多肽可有效地保护人真皮成纤维细胞对抗UVB的辐射损伤。 侯颖一 谭金山 张海平 王春波关键词:扇贝多肽 紫外线 超微结构 超微结构 透射电子显微镜 扇贝多肽(PCF)对H_2O_2损伤胸腺细胞的保护作用 被引量:12 2005年 将胸腺细胞分为正常对照组、H2O2模型组、0.1g/LVc组、0.5g/LPCF组、0.25g/LPCF组和0.125g/LPCF组6组,通过不同药物或不同浓度处理后,采用生物化学方法分别检测细胞裂解液中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)和活性氧(ROS)的含量,采用流式细胞仪测定各组细胞胞浆中的Ca2+含量和线粒体膜电位(ΔΨm)的变化。结果显示,扇贝多肽(PCF)能提高细胞中SOD,GSH-Px的含量,增强细胞的T-AOC,降低细胞中MDA和ROS的含量,并能引起胞浆中Ca2+含量的下降和ΔΨm的提升。表明PCF具有抑制H2O2对胸腺细胞氧化损伤的作用。 车勇良 孙谧 欧阳五庆 姚如永 王跃军 王春波关键词:栉孔扇贝 胸腺细胞 过氧化氢 抗氧化剂 紫外线对角质形成细胞氧化损伤作用机制研究进展 被引量:3 2004年 窦梅 李燕 司征 朱丽 王春波关键词:紫外线 角质形成细胞 扇贝多肽对^(60)Co辐射损伤的胸腺细胞影响作用的研究 被引量:21 2001年 本文用噻唑盐比色方法探讨在 60 Co辐射损伤条件下扇贝多肽对胸腺细胞的保护作用 ,和对 60 Co辐射损伤的胸腺细胞修复能力的影响。结果表明 :(1) 60 Co辐射后胸腺细胞的活性明显下降。 (2 )先加扇贝多肽后辐射组的胸腺细胞的活性较未加扇贝多肽的辐射组强 (P<0 .0 5 ) ,0 .2 5 %~ 4 %浓度范围内 ,胸腺细胞的活性与扇贝多肽的浓度呈正比。当辐射强度加大到 9~ 10 GY时 ,0 .5 %以下的扇贝多肽保护能力减弱或丧失。(3)先 60 Co辐射后 2 h,再加入扇贝多肽孵育 ,胸腺细胞的活性随扇贝多肽浓度的加大而增强。辐射后 7h或 19h再加入扇贝多肽 ,仅在辐射 7h后加入 2 %的扇贝多肽孵育的胸腺细胞的活性较对照组活性强 ;辐射后 19h再加入扇贝多肽组的胸腺细胞的活性均较对照组显著降低 (P<0 .0 5 )。结果提示 :提示扇贝多肽具有抵抗 60 Co辐射对胸腺细胞的损伤作用 ,并且呈剂量依赖性 ; 王玉贞 刘晓萍 姚如永 于业军 王春波 王跃军关键词:扇贝多肽 ^60CO 扇贝多肽对淋巴细胞的保护作用和反相液相色谱分析 被引量:30 2000年 为进一步研究扇贝多肽 (海洋肽 ,PCF)对淋巴细胞的作用及其成分。采用地塞米松 ( DEX)与脾脏和胸腺淋巴细胞共同培养 ,建立了淋巴细胞免疫抑制实验模型。并利用反相液相色谱法 ( RPLC)对 PCF进行了分析。结果表明 ,DEX能显著降低脾脏和胸腺淋巴细胞的活性 ,DEX组吸收度值明显降低 ( P<0 .0 1) ;而 PCF不仅能显著地减轻其对免疫细胞的抑制作用 ,同时还可以促进免疫细胞的活性 ,使 DEX+PCF组吸收度值明显增高( P<0 .0 1)。相对分子质量为 80 0~ 10 0 0 D的 PCF经 RPL C分析含有保留时间为 3.92 3,4 .865,5.0 33,5.4 4 1等4个组分。实验证明 ,PCF对 DEX引起的淋巴细胞抑制具有保护作用。 杜卫 刘晓萍 梁惠 王玉贞 王春波关键词:淋巴细胞 免疫作用 反相液相色谱 扇贝多肽