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基于固定化纳米金增强化学发光双酶传感器测定葡萄糖被引量：3: 2008年; 研制了一种新型流动注射化学发光(CL)双酶传感器,用于葡萄糖的检测.该传感器将掺杂金纳米粒子(GNPs)的壳聚糖膜包覆在硅烷化试剂预处理的玻璃微珠上,用于吸附固定葡萄糖氧化酶(GOD)和辣根过氧化物酶(HRP).葡萄糖在GOD的催化下发生氧化反应生成H2O2,生成的H2O2在HRP的催化作用下与鲁米诺发生反应,并产生化学发光信号.实验表明,壳聚糖中掺杂的GNPs不仅能够有效的吸附酶分子并保持其生物活性,还对Luminol-H2O2-HRP化学发光体系具有增敏作用.通过化学发光光谱和紫外光谱表征,详细研究了固定化GNPs增强Luminol-H2O2-HRP体系的化学发光机理.在优化的实验条件下,该传感器对葡萄糖检测的线性范围为0.01～6.0mmol/L,检测限为5.0μmol/L(3σ).将所建立的方法用于临床血清样品中葡萄糖含量的测定,获得了满意的结果.; 林洁华张慧张书圣; 关键词：葡萄糖金纳米粒子辣根过氧化物酶葡萄糖氧化酶

基于新型纳米复合材料的免标记DNA检测: ＜正＞DNA的电化学检测主要有两种方法,即标记法和免标记法。免标记电化学DNA传感器不仅可以免去DNA杂交前后的标记或杂交后孵育标记,还可以提供实时检测。免标记电化学DNA传感器能够将杂交反应的信息直接转换成电化学信号,...; 聂广明王松张书圣

高锰酸钾-甲醛-穿心莲内酯体系的流动注射化学发光分析法被引量：3: 2010年; 在酸性介质中，高锰酸钾能氧化穿心莲内酯发生化学发光反应，而甲醛的存在可使发光强度增强，在体系中加入表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵可以进一步增强该体系的化学发光强度。据此建立了1种流动注射化学发光测定穿心莲内酯的新方法。方法的线性范围为5．0×10^-6～2．5×10^-4g·mL^-1，检测限1．0×10^-6g·mL^-1，相对标准偏差0．9％（n=12，C=1．0×10^-5g·mL^-1）。样品测量通量150h-1。该法用于药物中穿心莲内酯含量的测定，结果令人满意。同时，对高锰酸钾-甲醛-穿心莲内酯体系化学发光反应机理进行了探讨。为穿心莲内酯的快速定量测定提供了1种简便、高效的方法。; 张慧林洁华; 关键词：穿心莲内酯化学发光流动注射高锰酸钾甲醛

New bienzymatic strategy for glucose determination by immobilized-gold nanoparticle-enhanced chemiluminescence被引量：2: 2009年; Bienzymatic biosensor for the determination of glucose by flow injection chemiluminescence(CL) de-tection was proposed.Hybrids of gold nanoparticles(GNPs) and chitosan were chosen as the immobi-lization matrix of glucose oxidase(GOD) and horseradish peroxidase(HRP) to fabricate the biosensors with silane-pretreated glass microbeads.After the enzyme catalyzing oxidation of glucose in GOD biosensor,the produced H2O2 flowed into HRP biosensor to react with luminol.The doped GNPs in chitosan were found to enhance the classical CL reaction of luminol-H2O2-HRP.The CL enhancement was investigated in detail by CL and UV-visible spectrum.Under the optimized experimental conditions,glucose could be determined in a linear range from 0.01 to 6.0 mmol/L with a detection limit of 5.0 μmol/L at 3σ.The accuracy of the proposed method was examined by detecting the glucose level in four clinical serum samples from hospital.The proposed method provides a new alternative to deter-mine glucose.; LIN JieHuaZHANG HuiZHANG ShuSheng; 关键词：CHEMILUMINESCENCE GLUCOSE HORSERADISH PEROXIDASE GLUCOSE OXIDASE

基于荧光抗体修饰介孔SBA-15的信号放大型免疫探针的制备被引量：1: 2011年; 研制了一种基于异硫氰酸荧光素(FITC)标记荧光抗体修饰介孔SiO2的超灵敏标记探针,并成功用于检测人血清中甲胎蛋白(AFP)的含量。通过EDC/NHS交联剂将FITC标记抗体固定在氨基功能化的介孔SBA-15上,制备得到抗体修饰介孔SBA-15的信号放大型荧光免疫探针(FITC-Ab*/SBA-15)。将AFP单克隆抗体固定在纳米金/介孔SBA-15修饰的玻璃片上,然后植入流动注射体系,构建免疫检测流通池。基于夹心式免疫反应模式,结合流动注射分析技术,待测抗原与FITC-Ab*/SBA-15顺序注射到免疫流通池。免疫反应结束后,FITC-Ab*/SBA-15被引入到流通池的玻璃载体表面,进行荧光检测。介孔SBA-15纳米粒子由于具有较大的比表面积和交错的多维孔道,可以大大提高生物分子的的负载量,使得在每个微球上能够负载更多的FITC标记二抗,使荧光信号得到放大,拓宽了检测的线性范围。; 赵月林洁华; 关键词：甲胎蛋白荧光免疫分析流动注射

2-氨基-3-羟基吡啶-过氧化氢-辣根过氧化物酶伏安酶联免疫体系分析人血清癌胚抗原被引量：2: 2009年; 以氮杂环化合物为电化学分析底物的2-氨基-3-羟基吡啶-H2O2-辣根过氧化物酶(HRP)伏安酶联免疫体系测定人血清癌胚抗原(CEA)。HRP催化H2O2氧化2-氨基-3-羟基吡啶的酶促反应产物,在缓冲液中-0.36V处产生一个灵敏的伏安还原峰,借助此峰可以测定游离的HRP,进而可用于以HRP为标记物的酶联免疫分析。对酶促反应条件和测定条件的优化反应条件为:以B-R缓冲液(pH6.0)为反应介质,在10mL总反应液中含有1.0mL0.2mol/LB-R缓冲液、3.0mL8.0mmol/L2-氨基-3-羟基吡啶溶液以及1.5mL0.5mmol/LH2O2溶液,反应温度37℃,反应时间30min。最佳测定条件为:B-R缓冲液(pH7.0)为支持电解质,在10mL总测定溶液中含有5mL上述总反应液、1.0mL0.2mol/LB-R缓冲液。测定仪器条件:起始电位0.00V,终止电位-0.80V,电位扫描速度400mV/s,滴汞静止时间7s。在最佳的反应条件和测定条件下,新体系测定游离HRP的线性范围为4.0×10-4～1.0μg/L;对HRP的检出限为0.12ng/L。新体系对CEA测定的线性范围为0.50～80.0μg/L;检出限为0.50μg/L。为经典ELISA法的检出限的1/10。; 于凤丽邹晋梅振华; 关键词：辣根过氧化物酶癌胚抗原

二维毛细管电泳电化学检测尿样中的β-阻断剂被引量：3: 2010年; 设计并制作了在柱电化学(EC)检测池,用于在同一根毛细管中进行中心切割二维毛细管电泳(2DCE)在线纯化分离检测尿样中的6种β-阻断剂。尿样先在15mmol/L NaAc缓冲液中进行毛细管区带电泳(CZE)分离,带正电荷的β-阻断剂与中性和带负电荷的干扰物质分成不同区带,然后在检测端施加13.8kPa压力将干扰成分从毛细管入口端排出,同时将目标组分驱送到毛细管入口端,最后在90mmol/L NaAc-30mmol/L SDS缓冲液中进行胶束电动毛细管色谱(MEKC)分离。场放大样品堆积(FASS)/胶束推扫在柱双重富集技术不仅有效抵消压力驱送过程中产生的区带扩散,还可进一步压缩样品区带,提高检测灵敏度。本方法成功用于服药后鼠尿样品中6种β-阻断剂的分离测定,经第一维CZE分离排除干扰后,在未涂层毛细管柱(60cm×50μmi.d.)、90mmol/L NaAc/HAc-30mmol/L SDS运行缓冲液、检测电位0.8V、运行电压10kV条件下,对6种β-阻断剂进行在线富集分离,峰高、峰面积和迁移时间的相对标准偏差(RSD)分别为2.0%～4.1%,1.4%～3.7%和0.9%～2.7%(n=6)。本研究为毛细管电泳在复杂样品在线纯化分析等方面的应用提供了新方法。; 张效伟张召香; 关键词：电化学检测 Β-阻断剂

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国家自然科学基金(20775038)