国家自然科学基金(81071966)
- 作品数：7 被引量：24H指数：4
- 相关作者：凌晖陈真伟文玲李振丰彭娟更多>>
- 相关机构：南华大学常德市第一人民医院邵阳医学高等专科学校更多>>
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- 二烯丙基二硫对CD44^(+)人胃癌AGS细胞生长的影响被引量：4
- 2021年
- 目的分析二烯丙基二硫(DADS)对CD44^(+)胃癌AGS细胞增殖与周期分布的作用,为DADS抑制胃癌作用机制研究提供进一步实验依据。方法经免疫磁珠技术富集人胃癌细胞株AGS中的CD44^(+)细胞,流式细胞术检测CD44^(+)细胞比率。肿瘤球形成、Transwell迁移及侵袭实验验证CD44^(+)细胞的干样特性。MTT、软琼脂集落形成及流式细胞术分析DADS对干样细胞的生长、细胞周期分布的作用。结果免疫磁珠术富集了99.9%CD44^(+)细胞。相较于未分选的AGS组,CD44^(+)AGS组细胞生长2周后成球状态良好,且表现出更强迁移、侵袭能力(P<0.05)。不同质量浓度DADS处理可明显抑制CD44^(+)细胞增殖,且其抑制作用呈质量浓度依赖性(P<0.05);30 mg/L和60 mg/L DADS可抑制CD44^(+)细胞集落形成能力(P<0.05),且可导致细胞周期呈现G_(2)/M期阻滞(P<0.05)。结论DADS可明显削弱CD44^(+)细胞的生长能力,与阻断细胞周期于G_(2)/M期有关。
- 吴静段海瑞谢鸣陆昱汝许珊李维凌晖
- 关键词：二烯丙基二硫胃癌肿瘤干细胞
- 非编码RNA在胃癌糖酵解中作用的研究进展被引量：2
- 2022年
- 正常分化的细胞主要依靠线粒体的氧化磷酸化为细胞供能,而大多数肿瘤细胞则依赖有氧糖酵解。各种非编码RNA(ncRNA),如微小RNA(miRNA)、长链非编码RNA(lncRNA)和环状RNA(circRNA),已被证明在胃癌糖代谢中发挥潜在作用。本文总结了ncRNA在胃癌糖代谢中的作用及机制,以及在胃癌预后及治疗等方面的临床应用前景。
- 凌晖李维熊逸苇颜丽莎张淑榆
- 关键词：胃癌糖酵解非编码RNA微小RNA长链非编码RNA
- RORα miRNA真核表达载体构建及对人胃癌细胞增殖的影响被引量：6
- 2011年
- 目的构建RORα(Retinoid acid receptor related orphan receptorα,维甲酸相关孤核受体α)miRNA真核表达载体,分析其对人胃癌MGC803细胞RORα蛋白表达及细胞增殖的影响。方法构建针对设计RORαmiRNA表达的3对miRNA干扰序列,克隆入pcDNATM6.2-GW/EmGFP miRNA真核表达载体,在测序鉴定无误后将含RORαmiRNA转染人胃癌MGC803细胞,用Western blo检测MGC803细胞转染前后RORα蛋白的表达水平变化。MTT法检测对转染MGC803细胞增殖的影响。结果 Western blot结果证实,MGC803细胞转染RORαmiRNA后24h RORα蛋白表达水平明显低于转染阴性组(P<0.05)。MTT结果显示,转染RORαmiRNA后细胞增殖率(光吸收值)高于转染阴性组(P<0.05)。结论 miRNA靶向抑制RORα表达后,可促进人胃癌MGC803细胞增殖,提示RORα是一个潜在的胃癌基因及药物治疗的靶点。
- 凌晖陈真伟曾铁兵文玲苏琦彭娟张杨
- 关键词：胃癌微小RNA增殖
- 二烯丙基二硫对人胃癌SGC7901细胞Au-rora-A、Aurora-B表达的影响
- 2011年
- 目的探讨二烯丙基二硫(DADS)对人胃癌SGC7901细胞中Aurora-A、Aurora-B表达的影响。方法体外培养SGC7901细胞,采用RT-PCR、Western blot和免疫细胞化学分析DADS对SGC7901细胞中Aurora-A、Aurora-B表达的影响。结果 RT-PCR显示用15 mg/L DADS处理SGC7901细胞24、48 h后,Aurora-A、Aurora-B mRNA表达明显下调(P<0.05);Western blot显示用15 mg/L DADS处理SGC7901细胞24、48 h后,Aurora-A、Aurora-B蛋白表达水平呈时间依赖性下降(P<0.05);免疫细胞化学显示用15 mg/L DADS处理SGC7901细胞24、48 h后,Aurora-A和Aurora-B蛋白表达明显降低。结论 DADS可从基因和蛋白水平抑制SGC7901细胞Aurora-A、Aurora-B的表达。
- 李振丰凌晖陈真伟段海瑞文玲胡程
- 关键词：胃癌二烯丙基二硫AURORA-AAURORA-B
- miR-103a-3p在胰腺癌细胞中的表达及意义被引量：6
- 2015年
- 目的:观察mi R-103a-3p抑制表达的慢病毒载体对高表达mi R-103a-3p的PANC-1胰腺癌细胞株的表达抑制作用,为阐明胰腺癌的发病机制及筛选治疗靶基因提供理论依据。方法:采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测不同侵袭能力的胰腺癌细胞株(PANC-1、Bx PC-3)和永生化正常胰腺细胞(H6C7)中mi R-103a-3p表达情况;构建慢病毒载体mi R-103a-3p-inhibitor,包装后感染高表达mi R-103a-3p的PANC-1细胞株,荧光显微镜观察其转染效率,q RT-PCR检测其表达情况。结果:q RT-PCR检测显示,mi R-103a-3p在PANC-1、Bx PC-3细胞及正常胰腺细胞H6C7细胞中相对表达量分别为(4.949±0.130)、(1.417±0.120)和(1.010±0.151),PANC-1表达水平最高(P<0.05)。mi R-103a-3p-inhibitor慢病毒感染PANC-1细胞第4天,荧光显微镜下可见报告基因绿色荧光蛋白(GFP)高强度表达。q RT-PCR结果显示:mi R-103a-3p相对表达量在未感染mi R-103a-3p-inhibitor慢病毒的PANC-1组(1.002±0.160)与阴性病毒感染的PANC-1组(0.956±0.250)间差异无显著性,但慢病毒感染的PANC-1组的相对表达量(0.317±0.320)显著下降(P<0.05)。结论:mi R-103a-3p在侵袭能力较强的胰腺癌细胞株中表达增高,mi R-103a-3p-inhibitor能稳定转染PANC-1细胞系并抑制其mi R-103a-3p表达。
- 贺军曹金敏陈国栋贺更生凌晖
- 关键词：胰腺癌慢病毒
- RORα miRNA转染对DADS抑制胶质瘤U251细胞增殖的影响被引量：1
- 2011年
- 背景与目的:维甲酸相关孤核受体α(retinoid acid receptor related orphan receptorα,RORα)可能参与肿瘤的调控。本实验室前期研究发现,二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)可抑制人胶质瘤U251细胞增殖,其抑制增殖作用可能与诱导RORα蛋白表达上调有关。为了明确RORα在DADS抑制人胶质瘤细胞增殖中的作用,本研究采用miRNA干扰技术抑制RORα表达,观察其对DADS抑制U251细胞增殖的影响。方法:首先将RORαmiRNA转染人胶质瘤U251细胞,运用Western blot检测转染前后RORα蛋白表达情况。实验分为未转染组、脂质体转染组和RORαmiRNA转染组及分别经30 mg/L DADS处理后的3组,共6组。MTT法检测RORα表达下调对DADS抑制胶质瘤U251细胞增殖的影响。结果:Western blot结果显示,转染RORαmiRNA细胞的RORα蛋白表达(0.09±0.05)明显低于未转染组(0.81±0.11)和脂质体转染组(0.89±0.15),其蛋白表达下调了89.5%(P<0.05)。MTT结果显示,U251细胞增殖活性在RORαmiRNA转染后48 h A570值为(0.98±0.15),高于未转染组(0.47±0.11)和脂质体转染组(0.45±0.10)(P<0.05),其增殖率高达108.5%。并且RORαmiRNA转染削弱了DADS对U251细胞的增殖抑制作用,转染RORαmiRNA细胞加入DADS后的细胞增殖率(A570值为0.69±0.20)明显高于DADS处理的未转染组(0.28±0.13)和脂质体转染组(0.25±0.12)(P<0.05),其抑制率由40.4%下降为29.6%。结论:miRNA干扰RORα表达可促进U251细胞增殖,并且削弱了DADS对U251细胞的增殖抑制作用,说明RORα参与了DADS抗胶质瘤U251细胞增殖的作用。
- 凌晖李振丰曾铁兵文玲刘芳李艳兰朱亚平
- 关键词：胶质瘤二烯丙基二硫增殖U251细胞
