辽宁省教育厅高等学校科学研究项目(202011001)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：徐晓雪赵雨杰潘忠诚房凯胥威更多>>
- 相关机构：中国医科大学更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- C型乙型肝炎病毒基因SOEing法引入228位点突变被引量：1
- 2008年
- 目的为获取乙型肝炎病毒(HBV)基因分型芯片病毒靶序列,对C型HBV第228位碱基进行点突变。方法通过不同基因型HBV全基因组的序列比对分析,显示基因型A,C,D,G在228位上的碱基为G,而基因型B,E,F,H为A,所以检测该位点的碱基类型可以实现HBV基因型的初步分型。结果将C型乙肝病毒第228位上的单位碱基由G突变为A,经测序后证明突变成功。结论重叠区扩增基因拼接法(SOEing)是一种简便引入点突变的方法,可以应用此法制备HBV基因分型芯片检测基因片段序列。
- 徐晓雪房凯钟连生潘忠诚吴土焕赵雨杰
- 关键词：乙型肝炎病毒基因分型重叠区扩增基因拼接法
- 应用免疫组化法验证细胞芯片的特异性被引量：1
- 2008年
- 目的研究适用于芯片捕获细胞的最佳免疫组化方法,并用其验证细胞芯片的特异性。方法CD7、CD13、CD19抗体固定于醛基玻片上,形成3×3阵列的芯片,从外周血中分离全白细胞,芯片上孵育后,细胞芯片捕获的细胞固定,S-P法进行免疫组化及苏木素复染,显微镜下观察和计数。结果乙醇∶甲醛∶水(AF液)固定胞内外抗原染色阳性率、阳性程度高,阳性细胞形态较好;芯片上免疫组化所用抗体最佳浓度为1μg/ml,最佳孵育条件为室温,1h;芯片上阳性细胞胞浆或胞膜有棕色颗粒,阴性抗体点细胞无此表现;细胞芯片的特异性结合阳性率在96.7%以上,非特异性结合阳性率在0.8%以下。结论本实验方法能将细胞芯片捕获细胞的胞内及胞浆抗原直观稳定表达出来,设计出了细胞芯片上免疫组化方法,同时验证了细胞芯片的特异性。
- 胥威赵雨杰卢永平宋瑾陈亚男李春丽徐晓雪
- 关键词：细胞芯片免疫组化
- 乙型肝炎病毒基因生物信息学分析及特异片段的制备被引量：3
- 2008年
- 目的制备HBV基因分型芯片模板。方法通过不同基因型HBV全基因组的序列比对,选取6个碱基位点作为分型位点,应用重叠区扩增基因拼接法(SOEing法)对C型HBV片段进行点突变。结果在所选位点上成功引入点突变。结论SOEing法是一种简便引入点突变的方法,可以应用此法制备HBV基因分型检测基因所需的模板DNA。
- 徐晓雪房凯钟连声潘忠诚李超胥威赵雨杰
- 关键词：重叠区扩增基因拼接法乙型肝炎病毒基因分型
