国家自然科学基金(21076013)
- 作品数:3 被引量:6H指数:1
- 相关作者:葛喜珍韩增叶孙继国田平芳王爽更多>>
- 相关机构:北京化工大学北京联合大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 紫外线—氯化锂诱变选育吡咯喹啉醌高产菌被引量:1
- 2013年
- 以K.pneumoniae为出发菌株,通过紫外线和氯化锂诱变筛选PQQ高产菌。结果表明,当紫外照射时间为45 s时,致死率为85%;当氯化锂剂量为0.3%时,致死率达85%。紫外诱变所得菌株U1和U2的PQQ产量分别是出发菌株的2.7倍和6倍。氯化锂诱变所得菌株L1的PQQ产量是出发菌株的5倍。紫外线和氯化锂复合诱变所得菌株F1的PQQ产量是出发菌株的1.4倍。紫外诱变所得菌株U2经连续传代15次,其PQQ产量仍能达到原代菌的95%,表明该菌能稳定生产PQQ。该研究为进一步提高PQQ产量奠定了基础。
- 王朝绚李会玉王爽葛喜珍
- 关键词:吡咯喹啉醌肺炎克雷伯氏菌紫外线氯化锂诱变
- 基于重组大肠杆菌无细胞体系生产吡咯喹啉醌被引量:4
- 2014年
- 采用无细胞体系生产吡咯喹啉醌(pyrroloquinoline quinone,PQQ)。首先将肺炎克雷伯氏菌PQQ基因簇pqqABCDEF置于半乳糖苷酶启动子之下,构建表达载体,经转化筛选获得重组大肠杆菌。制备重组菌的细胞匀浆,体外反应后测定PQQ产量。结果显示,与活体重组菌相比,无细胞体系的PQQ产量提高约30%,表明胞内存在PQQ合成的限速反应,而无细胞体系可解除此限速反应。
- 孙继国韩增叶葛喜珍田平芳
- 关键词:大肠杆菌吡咯喹啉醌
- 大肠杆菌葡萄糖脱氢酶基因的克隆与原核表达被引量:1
- 2012年
- 克隆出大肠杆菌编码葡萄糖脱氢酶(PQQGDH)的gcd基因,构建了诱导型表达载体pET28a-gcd,转化大肠杆菌E.coli BL21后获得阳性克隆菌株BL21/pET28a-gcd。IPTG诱导后,经SDS-PAGE分析表明,该工程菌PQQG-DH的表达量约为对照菌的18倍,约为18.2 mg/L,实现了高表达。此外,研究发现添加MgCl2能提高PQQGDH的表达量。
- 韩增叶孙继国葛喜珍田平芳
- 关键词:葡萄糖脱氢酶吡咯喹啉醌传感器