国家自然科学基金(30830052)
- 作品数：6 被引量：12H指数：2
- 相关作者：赵春华陈斌林瑞竹马杰胡建立更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院清华大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金全球变化研究国家重大科学研究计划长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miR-424负向调节人脂肪源间充质干细胞向成脂细胞分化被引量：2
- 2012年
- 目的研究miR-424对人脂肪源间充质干细胞(hAMSCs)向成脂分化的影响。方法用real-time PCR检测hAMSCs成脂分化前后细胞内miR-424水平的变化。在脂质体介导下,用人工合成的miR-424模拟物转染hAMSCs提高细胞内miR-424的含量,随后对其进行成脂诱导。用油红O染色法观察细胞内脂滴形成情况,用real-time PCR和Western blot检测成脂关键转录因子PPARγ及相关标记物mRNA的表达。结果 hAMSCs成脂分化后,miR-424表达下调。与对照组细胞相比,转染miR-424模拟物的实验组细胞中miR-424含量明显升高。成脂诱导第8天油红O染色结果显示,实验组脂滴形成显著少于对照组。PPARγ和成脂相关标记物的表达量也出现下调。结论 miR-424可负向调节hAMSCs向脂肪细胞分化。
- 黄姗徐琦璘王世华韩钦赵春华
- 关键词：成脂分化
- microRNA-373参与调控人脂肪来源间充质干细胞成骨分化被引量：3
- 2012年
- 目的用microRNA-373(miR-373)的模拟物转染人脂肪来源Flk1+间充质干细胞(MSC),探讨microRNA-373对Flk1+MSC成骨分化的影响。方法利用脂质体作为载体,用miR-373模拟物瞬时转染Flk1+MSCs,然后对其进行成骨诱导,碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红染色观察成骨情况,real-time PCR技术检测成骨标志性基因的表达。结果 ALP染色和茜素红可见明显差异;real-time PCR检测结果显示,实验组(miR-373组)成骨标志基因runt相关转录因子2(RUNX2)(0.543±0.021)、ALP(0.556±0.024)和骨钙蛋白(OC)(0.499±0.017)的表达都明显低于对照组(NC组)(P<0.05)。结论 miR-373参与调控Flk1+MSC向骨细胞分化。
- 曾洋刘星霞林瑞竹赵春华
- 关键词：间充质干细胞成骨分化
- 体外诱导脂肪来源间充质干细胞间质-上皮转换被引量：2
- 2012年
- 目的探讨在体外诱导人脂肪来源间充质干细胞(hAD-MSCs)发生间质-上皮转换(MET)的可行性。方法从人脂肪中分离、培养间充质干细胞,流式细胞术鉴定其细胞表面标志。在体外添加激活素A(activin A)、维甲酸(RA)和骨形态发生蛋白7(BMP7)培养后,倒置显微镜下观察hAD-MSCs诱导后的形态变化,采用RT-PCR方法检测间质和上皮细胞相关基因vimentin,E-cadherin,ZO-1和β-catenin在诱导分化过程中表达水平改变。Western blot检测诱导前后间质标记vimentin和上皮标记β-catenin的表达。结果诱导后细胞形态发生改变,由长梭形变为卵圆形,上皮标记基因E-cadherin,ZO-1和β-catenin的mRNA表达显著上调(P<0.05),同时间质标志基因vimentin的mRNA表达显著下降(P<0.05)。Western blot结果显示,与未诱导组相比,诱导后细胞开始表达β-catenin,而vimentin的表达明显下降(P<0.05)。结论 Activin A、RA和BMP7联合使用可诱导hAD-MSCs发生MET的过程。
- 杨倩张丽娜李康华赵春华
- 关键词：脂肪间充质干细胞
- 2％成人AB型血清扩增的骨髓间充质干细胞的分化潜能研究
- 2011年
- 寻找一种合适的、可以替代胎牛血清、用以扩增骨髓间充质干细胞的产品,并研究其扩增产品的多向分化潜能。采用贴壁筛选法分离培养成人骨髓间充质干细胞,并利用不同代次的扩增细胞在诱导体系中向成骨细胞、成脂细胞诱导分化。分别采用Vonkossa、碱性磷酸酶染色观察成骨情况,采用油红O染色观察成脂情况。在用2%成人血清配置的完全培养基中,不同代次的成人骨髓间充质干细胞仍旧具有成骨、成脂分化潜能。研究表明,该方法所扩增的成人骨髓间充质干细胞具有成骨、成脂分化潜能,有可能成为理想的体外扩增成人骨髓间充质干细胞的方法。其扩增产品有可能用于骨的组织工程修复。
- 胡建立李健李静马杰陈斌赵春华
- 关键词：骨髓间充质干细胞分化
- 成人AB型血清取代胎牛血清在体外有效扩增骨髓间充质干细胞被引量：4
- 2010年
- 目的找到一种合适的胎牛血清的替代品,可以在体外有效扩增间充质干细胞。方法比较骨髓间充质干细胞(BMSCs)在健康成人AB型血清、AB型脐带血清和胎牛血清培养体系中的不同代次的细胞形态、免疫表型、周期、生长曲线等生物学特性。结果骨髓间充质干细胞在3种不同血清的培养体系中的生物学特性无明显差异。结论 AB型血清可以取代胎牛血清在体外扩增骨髓间充质干细胞。
- 胡建立李静陈斌边春景马杰赵春华
- 关键词：骨髓间充质干细胞血清扩增
- 小鼠胚胎干细胞来源的神经干细胞的稳定传代体系探索被引量：1
- 2012年
- 目的探讨体外诱导、获取均一的神经干细胞群(NSCs)的有效方法,并建立神经干细胞体外稳定传代扩增体系。方法首先采用无血清的诱导培养基贴壁诱导mESCs形成神经上皮祖细胞(NPCs)。然后将经添加表皮生长因子(EGF)和成纤维细胞生长因子-2(FGF2)的无血清培养基短暂悬浮培养后的NPCs再贴壁培养,诱导形成NSCs。通过细胞系46C监测NPCs的形成,同时对分化细胞进行定量PCR和免疫荧光染色,在不同水平检测细胞分化效果。结果 mESCs神经诱导5 d出现大量Sox1+的NPCs;NPCs悬浮培养后,进一步诱导可得到形态均一的NSCs。第2代和第6代NSCs的神经干细胞标志定量PCR检测结果为:Pax6、Nestin、Mash1、BLBP高表达。第8代NSCs免疫荧光染色显示90%以上的细胞均为Nestin、RC2和Pax6阳性。结论成功诱导mESC生成神经干细胞群,并且可以在体外连续稳定的传代。
- 林瑞竹徐琦璘赵春华
- 关键词：胚胎干细胞神经分化神经干细胞
