宁波市自然科学基金(2012A610186)
- 作品数：5 被引量：16H指数：2
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- 相关机构：宁波市第一医院无锡市克隆遗传技术研究所杭州市余杭区中医院更多>>
- 发文基金：宁波市自然科学基金浙江省中医药管理局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 10种单味中药对鲍曼不动杆菌的抗菌作用和对主动外排机制抑制作用的研究被引量：11
- 2016年
- 目的:研究10种单味中药对临床分离的鲍曼不动杆菌的抗菌作用和对主动外排机制的抑制作用。方法:收集2011年1月至2011年12月宁波市第一医院患者临床标本中分离到的20株鲍曼不动杆菌,按照耐药性把20株菌分为多重耐药组和敏感组,每组10株。先检测10种单味中药对鲍曼不动杆菌的抑菌作用,再分别用外排抑制剂氰氯苯腙(终浓度15 mg/L)、利血平(终浓度20 mg/L)检测四环素和氯霉素外排泵表型,抗生素MIC值比空白对照下降4倍或以上时判为外排泵表型阳性。然后用终浓度2 000g/L的10种单味中药做外排抑制剂,检测四环素和氯霉素MIC值是否比空白对照下降4倍或以上。最后对数据进行统计分析。结果:10种单味中药对鲍曼不动杆菌都有不同程度的抑菌作用,黄岑和连翘的抑菌作用最强,金银花、三叶青、大青叶、黄连、野菊花的抑菌作用稍弱;焦栀子、蒲公英、紫花地丁的抑菌作用较弱。金银花、连翘、三叶青、焦栀子、大青叶、野菊花、蒲公英这7味中药对两组菌的抑菌作用有统计学差异(P<0.05):对敏感组菌的MIC_(50)和MIC_(90)都明显低于多重耐药组,而黄连、紫花地丁、黄岑对两组菌的抑菌作用无显著差异(P>0.05)。两组鲍曼不动杆菌对四环素和氯霉素的外排泵表型阳性率高,终浓度2 000 g/L的10种单味中药对氯霉素和四环素没有外排抑制作用。重新配制并提高本试验中10种单味中药水煎液浓度至终浓度为20 000 g/L,对氯霉素和四环素仍然没有外排抑制作用。结论:中药对鲍曼不动杆菌有抑菌作用,可作为抗生素的辅助用药。主动外排机制是鲍曼不动杆菌对四环素和氯霉素耐药的一种重要机制,但在20 000 g/L的浓度下,10种单味中药对氯霉素和四环素没有外排抑制作用。
- 翁幸鐾朱可奇孙定河史煜波胡丽庆王盛
- 关键词：鲍曼不动杆菌中药抗菌主动外排
- 泛耐药肺炎克雷伯菌全基因组测序相关基因分析被引量：1
- 2017年
- 肺炎克雷伯菌是一种机会性致病菌,可引起社区获得性感染和医院获得性感染. 我们从宁波市第一医院1例36岁男性患者的血液中分离到1株泛耐药肺炎克雷伯菌,进行全基因组测序,并分析其耐药和毒力相关基因.
- 翁幸鐾糜祖煌王春新朱健铭
- 关键词：全基因组测序相关基因分析泛耐药医院获得性感染社区获得性感染毒力相关基因
- 多耐药大肠埃希菌NB8株全基因组耐药基因检测被引量：2
- 2016年
- 目的检测1株多耐药大肠埃希菌NB8株的遗传学背景。方法病原分离自2012年4月宁波市第一医院住院患者尿液,作16SrDNA和gyrA基因测序、BLASTn比对确认为大肠埃希菌,采用Illumina HiSeq与Ion Torrent PGM两种大规模并行测序仪进行全基因组分析,再行人工测序。最后NB8株和9株已完成全基因组测序的大肠埃希菌耐药基因的比较基因组学研究。结果多耐药大肠埃希菌NB8株全基因组测序得到一条推定的染色体序列,长4 550 369bp(内含14个缺口),得到一条推定的质粒序列,长635 377bp(内含33个缺口)。从NB8株全基因组数据中挖掘出了β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类、大环内酯类、磺胺类、四环素类、多粘菌素的耐药基因,并挖掘出接合性质粒、转座子、插入序列、整合子的遗传标记,以及5大类外排泵基因。结论多耐药大肠埃希菌NB8株遗传学背景明确,主动外排机制增强也会导致或者增强NB8株的耐药性。质粒、转座子和整合子等可移动遗传元件可以使细菌的耐药性得以快速传播,使受体菌表现为多重耐药。
- 翁幸鐾糜祖煌王春新朱健铭
- 关键词：大肠埃希菌全基因组多耐药耐药基因可移动遗传元件外排泵基因
- 气单胞属菌粪便分离株分子鉴定与耐药元件检测被引量：1
- 2015年
- 目的调查一组14株气单胞属菌的菌种分子鉴定情况,以及β-内酰胺酶类、氨基糖苷类耐药的遗传学背景。方法14株气单胞属菌均分离自2012年1月至12月宁波市第一医院肠道门诊腹泻患者的粪便标本,再作通用引物16SrDNA测序比对判定菌种,然后用聚合酶链反应(PCR)的方法分析23种β-内酰胺酶基因、6种氨基糖苷类修饰酶基因和6种16SrRNA甲基化酶基因以及6种可移动遗传元件分子标记。结果本组14株菌经16SrDNA测序比对,10株为嗜水气单胞菌,水簇箱气单胞菌、温和气单胞菌、肠棕气单胞菌、斑点气单胞菌各1株。14株气单胞菌共检出5种β-内酰胺酶基因、4种氨基糖苷类修饰酶基因和3种可移动遗传元件遗传标记基因。其中4号株(嗜水气单胞菌)AQU基因是新的基因亚型,命名为AQU-2,11号株(水簇箱气单胞菌)AQU基因也是新的基因亚型,命名为AQU-3。结论气单胞菌属的菌种鉴定应该以分子鉴定法为准。本组14株气单胞属菌耐药严重,已呈多重耐药。
- 翁幸鐾糜祖煌周铁丽
- 关键词：分子鉴定基因亚型可移动遗传元件
- 高通量全基因组测序法对尿道致病性大肠埃希菌NB8株毒力因子数据的初步分析被引量：1
- 2016年
- 目的:调查1株尿道致病性大肠埃希菌(UPEC)NB8株携带的毒力因子和可能存在的致病机制。方法:UPEC NB8株分离自2012年4月宁波市第一医院住院患者尿液标本,做16Sr DNA和gyr A基因测序BLASTn比对确认为UPEC,用Illumina Hi Seq与Ion Torrent PGM这2种大规模并行测序仪进行全基因组分析,再进行人工测序补缺口。再对NB8株做毒力因子数据挖掘和分析,最后把NB8株和9株全基因组测序的UPEC的毒力因子做比较基因组学研究。结果:UPEC NB8株全基因组测序得到一条推定的染色体序列,长4 550 369 bp(内含14个缺口)。推定的质粒序列,长635 377 bp(内含33个缺口)。NB8株全基因组中挖掘出黏附(黏附素、P菌毛、1型菌毛、大肠埃希菌共同菌毛)、铁摄取系统(产气菌素、血红素摄取、肠杆菌素)、蛋白酶(分泌自转运毒素)、毒素(溶血素)、抗原43、SHI-2毒力岛等多种毒力因子。结论:UPEC NB8株中检出的多种毒力因子可能会在细菌黏附、侵袭、溶细胞活性、细胞毒性等方面起着重要作用,并能增强细菌的生存能力和致病力,导致宿主的泌尿道感染。全基因组测序技术具有超高速、高通量、低成本和高效益的优势,值得推广。
- 翁幸鐾糜祖煌王春新朱健铭
- 关键词：大肠埃希菌全基因组多药耐药毒力因子
