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武汉市科技攻关计划项目(20027006144)

作品数：1 被引量：1H指数：1
相关作者：朱传龙罗小平宁琴习东汪之沫更多>>
相关机构：华中科技大学更多>>
发文基金：武汉市科技攻关计划项目国家杰出青年科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇质粒
  • 1篇体外
  • 1篇凝血
  • 1篇凝血酶
  • 1篇凝血酶原
  • 1篇凝血酶原酶
  • 1篇小鼠
  • 1篇RNA干扰
  • 1篇SHRNA表...
  • 1篇表达质粒

机构

  • 1篇华中科技大学

作者

  • 1篇严伟明
  • 1篇汪之沫
  • 1篇习东
  • 1篇宁琴
  • 1篇罗小平
  • 1篇朱传龙

传媒

  • 1篇中华肝脏病杂...

年份

  • 1篇2006
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
小鼠纤维介素基因shRNA表达质粒的构建及体外RNA干扰被引量：1
2006年
目的探讨纤维介素蛋白(fg12)的双链RNA(dsRNA)在体外对fg12凝血酶原酶基因表达的干扰作用及其规律。方法构建能产生鼠垃12(mfg12)的发夹状双链RNA(shRNA)的载体p-mfg12shRNA,将其与mfg12- EGFP融合基因表达质粒pEGFP-mfg12共转染(用量比为1:5)到中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)作为实验组,另仅转染pEGFP-mfg12或共转染无关序列shRNA表达质粒和pEGFP-mfg12(用量比为1:5)作为对照组。转染24、48、 72 h后,观察mfg12-EGFP融合蛋白在CHO细胞中的表达情况,并通过流式细胞仪检测荧光细胞阳性率。分别将p- mfg12shRNA和mfg12cDNA表达质粒pcDNA3．1-mfg12共转染(用量比为1:5)到CHO细胞和人宫颈癌细胞(Hela 细胞),作为试验组,另转染pcDNA3．1-mfg12或共转染无关序列shRNA表达质粒和pcDNA3．1-mfg12(用量比为1:5) 或不转染任何质粒作为对照组。通过逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学检测mfg12在CHO和Hela这两种细胞株中表达的情况。结果实验组较对照组的绿色荧光强度明显减弱,荧光细胞数明显减少。在CHO和Hela两种细胞株,均显示mfg12shRNA显著抑制mfg12 mRNA和蛋白质的表达。结论本研究所构建的mfg12shRNA表达质粒p-mfg12shRNA 可在体外高效特异地抑制mfg12的表达,为进一步的体内实验奠定了基础。
汪之沫严伟明习东朱传龙罗小平宁琴
关键词：凝血酶原酶RNA干扰
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