广东省中医药管理局基金(2009454)
- 作品数：11 被引量：46H指数：4
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- 低糖诱导的HUVEC-12细胞氧化损伤与线粒体膜电位的关系被引量：2
- 2011年
- 目的 探讨低浓度葡萄糖对人脐静脉内皮细胞株HUVEC-12细胞的氧化损伤作用及其与线粒体膜电位的关系。方法 以人脐静脉内皮细胞株HUVEC-12细胞为研究对象，用5.5mmol/L及低浓度葡萄糖（2.8 mmol/L或0mmol/L）培养液培养HUVEC-12细胞4h，甲基噻唑基四唑（MTT）法测定细胞活力；超氧化物阴离子荧光探针标记测定细胞活性氧（ROS）产量；罗丹明123荧光探针标记测定线粒体膜电位（MMP）水平。结果 与5.5 mmol/L葡萄糖组（正常对照组）的细胞活力（96.80±3.20）％相比，2.8 mmoL/L葡萄糖组活动度（66.40±1.60）％与0 mmol/L葡萄糖组细胞活力（58.93±1.67）％分别低约32％、40％ （P＜0.01）；5.5mmol/L葡萄糖组、2.8mmol/L葡萄糖组、0 mmol/L葡萄糖组的ROS水平分别为0.59±0.02、0.74±0.04、0.88±0.05，2.8mmoL/L葡萄糖组、0 mmoL/L葡萄糖组的ROS水平较正常对照组分别高25％和48％ （P＜0.01）；5.5 mmol/L葡萄糖组、2.8 mmol/L葡萄糖组、0 mmol/L葡萄糖组的MMP水平分别为148.83±3.51、271.07±19.54、357.74±51.32,2.8 mmol/L葡萄糖组、0mmol/L葡萄糖组的MMP水平分别是正常对照组的1.8倍和2.4倍（P＜0.01）。结论 低浓度葡萄糖可以导致HUVEC-12细胞损伤，这种损伤作用可能与线粒体膜电位升高导致的氧化应激有关。
- 陆雯薛耀明朱波连欣刘宁
- 关键词：低血糖症氧化性应激内皮细胞脐静脉线粒体膜电位
- 核转录因子-κB在高浓度葡萄糖诱导INS-1细胞凋亡中的作用
- 2010年
- 目的研究核转录因子(NF-κB)在高浓度葡萄糖诱导INS-1细胞凋亡中的作用。方法大鼠胰岛素瘤细胞系(INS-1)细胞以RPMI1640培养基常规培养。实验分对照组(11.1mmol/l葡萄糖组)、高糖组(33.3mmol/l葡萄糖组)、高糖+NF-κB抑制剂组(33.3mmol/l葡萄糖+NF-κB抑制剂(5μmol/l)干预组)3组。以荧光定量RT-PCR检测IKKβ mRNA水平,Western blot法检测细胞核内NF-κB亚基P65蛋白表达量,Annexin V-PI双染法检测细胞凋亡率。结果与对照组相比较,高糖组IKKβ mRNA水平显著升高(P<0.01),INS-1细胞胞核内P65蛋白表达显著增多(P<0.01),细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。与高糖相比较,高糖+NF-κB抑制剂组IKKβ mRNA水平显著下降(P<0.01),胞核内P65蛋白表达显著减少(P<0.01),INS-1细胞凋亡率显著下降(P<0.05)。结论高浓度葡萄糖诱导INS-1细胞NF-κB活化,抑制NF-κB活化可有效抑制高糖诱导的INS-1细胞凋亡。
- 张巧玲薛耀明朱波李佳沙建平李圣坚
- 关键词：高浓度葡萄糖INS-1细胞P65
- 六味地黄丸影响2型糖尿病大鼠肝脏SREBP-1和ACC表达的实验研究被引量：3
- 2013年
- 目的:观察六味地黄丸对2型糖尿病大鼠肝脏脂代谢调控相关基因固醇调节元件结合蛋白(SREBP)和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)表达的影响。方法 :以LETO鼠为正常组,糖尿病大鼠模型OLETF鼠分为不加药的对照组以及加药的干预组,制作病理切片观察各组肝脏组织形态学改变,RT-PCR检测SREBP-1、ACC在各组大鼠肝脏组织中的表达情况。结果:与对照组相比,干预组大鼠肝脏细胞索结构完整,仅见轻度肝细胞脂肪变性。RT-PCR检测显示SREBP-1在正常组表达稳定,而在对照组和干预组的表达均随周龄增加而增加(P<0.01),但干预组SREBP-1的表达显著低于对照组(P<0.01)。ACC在对照组中的表达亦随周龄增加而明显增加,但其在正常组及干预组中的表达要显著低于对照组(P<0.01)。结论:六味地黄丸能降低糖尿病大鼠模型肝脏中SREBP mRNA和ACC mRNA的表达,可能通过减轻脂肪变性,改善糖尿病肝脏的脂代谢紊乱。
- 杜华薛耀明朱波钱毅
- 关键词：六味地黄丸固醇调节元件结合蛋白乙酰辅酶A羧化酶
- 六味地黄丸对OLETF大鼠脂肪组织脂联素mRNA转录水平的影响被引量：4
- 2011年
- 目的:研究六味地黄丸对自发性2型糖尿病大鼠脂肪组织脂联素的影响。方法:OLETF鼠40只,分为干预组和对照组,LETO鼠10只作为正常对照组。干预组于8周龄起以六味地黄丸灌胃给药。监测不同周龄体质量、血糖、血浆胰岛素水平,并于8、32和40周分批宰杀大鼠,检测其脂肪组织脂联素mRNA。结果:8周龄OLETF鼠和LETO鼠脂肪组织脂联素mRNA水平差异无显著性,32和40周时OLETF鼠脂肪组织脂联素mRNA水平显著低于LETO鼠(均P<0.01)。六味地黄丸可显著升高32和40周龄的OELTF鼠脂肪组织脂联素水平(均P<0.05)。OLETF鼠胰岛素敏感指数在32和40周龄显著低于LETO鼠(均P<0.01),六味地黄丸可显著增高胰岛素敏感指数(ISI)(均P<0.05)。各周龄OLETF鼠脂肪组织脂联素mRNA水平与ISI显著相关(P<0.01)。结论:OLETF鼠脂肪组织脂联素mRNA水平与胰岛素敏感性呈正相关。六味地黄丸早期干预能显著增加OLETF鼠脂脂肪组织脂联素mRNA水平,改善OLETF鼠胰岛素抵抗。
- 郭煜朱波李晨钟潘永华张燕薛耀明
- 关键词：胰岛素抵抗脂联素六味地黄丸
- OLETF鼠内脏脂肪沉积与脂肪组织脂联素mRNA水平的关系
- 2011年
- 目的探讨OLETF大鼠内脏脂肪沉积与脂肪组织脂联素(APN)mRNA水平的关系。方法自发性2型糖尿病大鼠OLETF鼠20只,同系健康对照LETO鼠10只作为正常对照组。监测体质量,定期口服葡萄糖耐量试验(OGTT),于8、32和40周分批处死大鼠,检测血糖(BG)、胰岛素、血清甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)、胆固醇(CHOL)和血浆APN水平。分离并称量腹部脂肪,并检测脂肪组织APN的mRNA水平。结果随病程进展,OLETF鼠体质量和内脏脂肪/体质量逐渐高于LETO组(P<0.05),并表现出糖耐量受损。血浆胰岛素、TG、FFA、CHOL显著高于LETO鼠(P<0.05),血浆APN水平不同周龄均显著低于LETO组(P<0.05)。脂肪组织APN的mRNA水平8周龄与LETO组无显著差异(P>0.05),在32和40周龄显著降低(P<0.01)。结论血浆APN水平可较好地反映OLETF鼠胰岛素抵抗和内脏脂肪含量。内脏脂肪APN转录水平降低不是初期血浆APN降低的主要原因。
- 朱波李晨钟钱毅潘永华张燕薛耀明
- 关键词：脂联素脂肪沉积
- 脂联素对自发性2型糖尿病大鼠肝脏IRS-1磷酸化的影响及其可能机制被引量：4
- 2011年
- 目的探讨脂联素对自发性2型糖尿病(OLETF)大鼠肝脏胰岛素信号通路的影响及其分子信号机制。方法自发性2型糖尿病大鼠OLETF鼠20只,同系健康对照LETO鼠10只。于8周和32周龄分别宰杀。检测空腹血糖、血浆胰岛素、脂联素、血脂水平,并以ELISA、免疫印迹和免疫组化法检测肝脏脂联素、胰岛素受体底物-1酪氨酸磷酸化水平(py-IRS-1)以及IKKβ和NFkB表达水平。结果 OLETF鼠血浆脂联素水平在8周龄和32周龄均显著低于LETO鼠(P<0.05)。32周龄时OLETF鼠血清胰岛素、TG、FFA、ISI均显著升高(P<0.05)。脂联素水平与FBG、血清胰岛素、TG、FFA、ISI数显著相关(P均<0.01)。OLETF鼠肝脏脂联素和py-IRS-1水平在8周龄和32周龄均显著低于LETO鼠,IKKβ和NFkB水平也显著升高(P<0.01)。py-IRS-1与肝组织脂联素、IKKβ和NFkB变化显著相关(P<0.01)。32周龄时脂联素水平与NF-κB和py-IRS-1显著负相关(P<0.05)。结论 OLETF鼠脂联素可能通过NFkB通路影响肝脏IRS-1酪氨酸磷酸化水平,导致肝脏的胰岛素信号传导障碍及糖、脂代谢紊乱,参与2型糖尿病的发生发展。
- 朱波李晨钟钱毅潘永华李佳张燕薛耀明
- 关键词：糖尿病脂联素胰岛素受体底物-1
- 六味地黄丸改善OLETF鼠肝脏胰岛素抵抗的实验研究被引量：12
- 2012年
- 目的探讨六味地黄丸改善2型糖尿病大鼠模型中肝细胞胰岛素抵抗的作用机制。方法以正常LETO鼠为LETO组,OLETF鼠分为不加药的对照组以及予六味地黄丸加药的干预组,分别于8、32、40周龄随机处死,收集肝组织。制作病理切片观察各组肝脏组织形态学改变,RT-PCR检测PEPCK表达改变以及免疫印迹(Western blot)检测IRS-1、IRS-2蛋白表达。结果与LETO组相比,对照组肝脏细胞随着时间延长出现明显的小叶结构破坏以及肝脏脂肪变性,而干预组小叶结构基本正常,仅有轻度脂肪变性。RT-PCR检测显示对照组PEPCK表达显著高于LETO组(P<0.01),而给予六味地黄丸的干预组PEPCK的表达则显著低于对照组(P<0.01)。免疫印迹检测对照组p-IRS-1和p-IRS-2蛋白表达水平显著低于LETO组以及干预组(P<0.05)。结论六位地黄丸通过抑制肝脏中糖异生关键酶PEPCK的活性以及提高胰岛素信号通路中IRS-1和IRS-2的表达,改善肝细胞的胰岛素抵抗。
- 杜华薛耀明朱波
- 关键词：六味地黄丸胰岛素抵抗磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶胰岛素受体底物
- 自发性2型糖尿病大鼠血浆低脂联素血症导致胰岛素抵抗被引量：6
- 2011年
- 目的观察自发性2型糖尿病大鼠血浆脂联素(APN)与胰岛素抵抗的关系。方法自发性2型糖尿病大鼠OLETF鼠20只,同系健康对照LETO鼠10只作为正常对照组。饲养13和40周后,行口服葡萄糖耐量试验;于8、32和40周分批宰杀,检测血糖、血浆脂联素、胰岛素、血清甘油三酯、游离脂肪酸和胆固醇水平。结果 8周龄时OLETF鼠血浆APN水平显著低于LETO组(P<0.05),并进行性降低。32周龄和40周龄时OLETF组大鼠血浆胰岛素水平和甘油三酯、胆固醇、游离脂肪酸显著高于LETO组(P<0.01)。结论 OLETF鼠血浆APN水平与胰岛素抵抗显著负相关,且先于胰岛素抵抗和葡萄糖耐量受损发生;低脂联素血症可能是导致胰岛素抵抗的重要原因。
- 郭煜朱波李晨钟潘永华张燕薛耀明
- 关键词：2型糖尿病胰岛素抵抗脂联素OLETF大鼠
- 胰高血糖素样肽-1通过抑制NF-κB信号通路减轻白介素-1β诱导的INS-1细胞损伤被引量：7
- 2010年
- 目的探讨胰高血糖素样肽-1(GLP-1)对白介素-1β(IL-1β)诱导INS-1细胞损伤的影响及其可能机制。方法体外培养大鼠胰岛素瘤细胞株细胞(INS-1)至对数生长期,根据干预方案进行分组:正常对照组、IL-1β组、GLP-1+IL-1β组。采用MTT法观察细胞活力、荧光实时定量PCR检测细胞内IKKβmRNA水平的表达,免疫印迹法(Western blotting)检测转入细胞核内NF-κB p65亚基的蛋白水平。结果与对照组相比,IL-1β组细胞活力下降29%,差异具有统计学意义(P<0.001);当加入GLP-1预处理后,细胞活力上升了30%,差异具有统计学意义(P<0.001)。与对照组相比,IL-1β组的IKKβmRNA表达显著增加(1.967±0.091vs1±0);当加入GLP-1预处理后,与IL-1β组相比,GLP-1+IL-1β组的IKKβmRNA表达显著降低(1.967±0.091vs1.287±0.084)。与对照组相比,IL-1β组核内NF-κB蛋白水平显著增高(0.814±0.111vs0.396±0.026);而加入GLP-1预处理后,与IL-1β组相比,GLP-1+IL-1β组核内NF-κB蛋白水平显著减少(0.622±0.059vs0.814±0.111)。结论 GLP-1抑制IL-1β诱导的INS-1细胞损伤,其机制可能与其抑制NF-κB信号通路有关。
- 李圣坚薛耀明李佳朱波张巧玲陈毅光
- 关键词：胰高血糖素样肽-1白介素-1Β核因子-KBINS-1
- 血清炎症因子在OLETF鼠2型糖尿病发病过程中的动态变化被引量：9
- 2014年
- 目的探讨自发性T2DM大鼠模型OLETF鼠发病过程中炎症因子与IR的关系。方法 20只雄性OLETF鼠(OLETF组)和10只雄性LETO鼠(LETO组)在8、32和40周龄被分批处死。检测血糖和血浆胰岛素水平。免疫散射比浊法检测各组血清高敏C反应蛋白(hsC-RP),ELISA检测血清TNF-α、IL-6、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)水平,并计算ISI。结果 8周龄时,OLETF组血清hsC-RP和MCP-1均高于LETO组;随周龄增加,OLETF组血清hsC-RP、TNF-α、IL-6、MCP-1水平逐渐升高,且40周龄时,均高于LETO组,仅ISI低于LETO组(P<0.01)。32周龄和40周龄时,ISI与hsC-RP、IL-6呈负相关(P<0.01),血清各炎症因子之间互为正相关(P<0.05)。结论 OLETF鼠血清炎症因子在糖尿病发生前即升高,并随病情进展持续升高,与IR密切相关,参与T2DM的发生发展。
- 朱波薛耀明张燕李晨钟潘永华王玲何飞英
- 关键词：炎症因子胰岛素抵抗糖尿病
