国家高技术研究发展计划(2011AA100201) 作品数:57 被引量:280 H指数:10 相关作者: 苏晓华 卢孟柱 丁昌俊 胡建军 黄秦军 更多>> 相关机构: 中国林业科学研究院 北京林业大学 河北农业大学 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 国家林业公益性行业科研专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
杨树CDPK基因家族的表达分析及功能预测 被引量:7 2014年 为探究CDPK基因在木材形成过程中的作用,本研究在基因组水平上对杨树CDPKs基因家族的成员进行分析,找到32个CDPKs及10个CRKs成员。对CDPK基因家族成员在杨树中表达特性进行了分析,发现其家族成员在不同组织、不同发育阶段以及毛白杨次生维管发育不同时期的表达特性不同。分析杨树CDPK基因家族中3个基因Pt CPK1、Pt CPK6、Pt CPK15,其蛋白质一级结构均存在1个跨膜区,其蛋白定位在细胞膜上。 张进 李建波 刘伯斌 陈军 卢孟柱关键词:杨树 CDPK 基因家族 基因表达 转Bt基因南林895杨抗虫性及对土壤微生物影响分析 被引量:13 2012年 以转Bt基因南林895杨株系B1、B4、B17、B21扦插苗为试验材料,分析其在室内和野外自然条件下对靶标害虫杨小舟蛾幼虫的抗虫性。结果表明:转Bt基因杨树4个株系均有一定的杀虫活性,其中株系B21对杨小舟蛾1龄幼虫12 d校正死亡率高达95.3%;虫试表明转Bt基因杨树各株系扦植苗在野外自然条件下的12 d幼虫校正死亡率8月份为35.0%88.8%,9月份为40.5%95.3%。用转Bt基因杨树叶片饲养杨小舟蛾,对照植株杨小舟蛾幼虫化蛹率为83.3%96.0%,而转Bt基因株系幼虫化蛹率为8.0%76.7%,二者有显著差异。转Bt基因杨树对杨小舟蛾幼虫的生长发育有抑制作用,饲喂8 d后害虫取食量、体质量增长速率显著低于对照。此外,为了解转Bt基因杨树对土壤微生物的影响,对转Bt基因杨树株系及对照进行了根际土壤微生物可培养类群的分析,初步结果显示:转Bt基因杨树根际土壤微生物中细菌、真菌、放线菌的数量与对照比较无显著差异。 张雁 郭同斌 潘惠新 黄敏仁 王明庥 诸葛强关键词:南林895杨 BT基因 抗虫性 土壤微生物 杨树中I类Clp基因家族的表达分析 2014年 Clp蛋白属于AAA+类ATP酶超级家族,广泛参与各种生物学过程。本研究在基因组水平上对杨树I类Clp基因家族的成员,从系统进化、基因结构及表达特性方面进行分析。杨树中共有9个I类Clp基因,各成员在不同组织、发育阶段及各种胁迫条件下的表达特性不同,说明它们参与不同的生物学过程。研究结果为进一步研究杨树I类Clp基因功能奠定了基础。 张进 刘伯斌 李建波 陈军 卢孟柱关键词:杨树 CLP 基因家族 基因表达 双元细菌人工染色体基因组文库研究进展 2013年 酵母人工染色体(YAC)、细菌人工染色体(BAC)是伴随着人类基因组计划的实施而产生的,这些大片段基因克隆载体的应用推动了分子生物学、遗传学等学科的快速发展。以农杆菌介导的直接转化植物为代表的双元细菌人工染色体(BIBAC)载体的发展,加速植物基因组的研究,成为植物基因组分析、基因功能鉴定、染色体结构与功能关系研究的重要工具。介绍了人工染色体文库的发展史,根据建库经验,着重阐述了BIBAC文库的构建、鉴定与应用。 朱丹 张杰伟 陈亚娟 张少斌 魏建华关键词:人工染色体 基因组文库 美洲黑杨杂种不同生长势无性系光合特征 被引量:26 2013年 以美洲黑杨杂交子代2年生的高(H4)、低(L3)生长势无性系及父本(F)为试验材料,比较其净光合速率(Pn)日变化及对有效光辐射(PAR)和CO2响应等生理特征差异。结果表明:H4,L3,F的Pn日变化曲线没有显著的双峰现象,H4的光合优势主要集中在6:00-12:00之间;光响应曲线数据分析表明:3个系号除暗呼吸速率(Rd)外,最大光合速率(Pnmax)、表观光合量子效率(AQY)、光补偿点(LCP)、光饱和点(LSP)等存在显著差异,H4的Pnmax最大,为21.47μmol·m-2s-1,超过L3达39.42%,其LCP最小,仅15.09μmol·m-2s-1,LSP值又最大,分别超过L3和F值的17.03%和10.35%;CO2响应曲线数据分析表明:各系号间仅Pnmax有显著差异,羧化效率、CO2补偿点(CCP)、光呼吸速率等差异均不显著,H4的羧化效率略高于L3和F,而CCP则稍低于L3和F,表明高生长势植株在CO2的转化效率和利用效率上稍有优势。高生长势无性系H4利用弱光的能力较强,且能在强光下进行相对高效的光合作用,其光合速率的优势主要集中在上午,日积累的优势更加明显,但对于CO2的吸收利用能力仅略有优势。 黄秦军 黄国伟 丁昌俊 张新叶关键词:美洲黑杨 杂交 生长势 光合特征 杨树中与次生细胞壁生物合成相关的糖基转移酶研究进展 被引量:2 2013年 随着杨树基因组测序计划的完成,加之生物信息学、生物化学、分子生物学和遗传学等研究方法的不断完善,杨树功能基因组学研究近年来被大大推进。目前,有关杨树材性的研究主要集中于MYBs、NACs、bZIP、HB、WRKY、MADS等转录因子的调控机制以及木质素的合成途径。与之相比,有关次生细胞壁中关键碳水化合物结构的合成及代谢仍然不清楚。糖基转移酶参与木本植物次生细胞壁中碳水化合物的合成和架构,直接影响木质部的发育过程。着重介绍了木本模式植物———杨树中参与次生细胞壁生物合成的糖基转移酶基因家族及其生物学功能,并对其在利用基因工程手段改良杨树材性和选育新品种方面进行了展望。 杨少辉 王洁华 宋英今 胡荣峰关键词:杨树 糖基转移酶 基因家族 河北杨CBF类基因的克隆及其进化 被引量:1 2013年 CBF转录因子属于AP2/EREBP转录因子家族,是植物特有的一类转录因子,在植物应对外界非生物胁迫的过程中起了非常重要的作用。在前期克隆河北杨PhCBF4a、PhCBF4b基因的基础上,通过同源克隆方法,从河北杨中继续分离出其它CBF类基因:PhDREB66、PhDREB67-1、PhDREB67-2、PhDREB68、PhDREB69、PhDREB70。与PhCBF4a、PhCBF4b基因相似,这6个基因包含AP2区域、核定位位点(NLS)以及AP2区域侧翼的两个CBF类基因所特有的基序。与相应毛果杨基因比对分析发现,这8个河北杨基因可分为3个Groups(旁系同源基因群),其中2个各包括3个基因,1个包含2个基因,河北杨旁系同源基因及其与毛果杨直系同源物之间在氨基酸水平上表现出了较高的序列一致性。进化分析结果显示,CBF基因可分为真双子叶植物分支与单子叶植物分支。真双子叶植物分支又可以分为3个分支,可分别由3个河北杨CBF旁系同源基因群所代表,显示在从共同的双子叶祖先分离之前或分离过程中,杨树CBF基因经历了复制与趋异的进化过程。PAML分析检测到PhCBF4a基因在进化过程中承受了正向的选择压力,表明其在河北杨响应并适应外界胁迫中的重要作用。表达分析结果显示河北杨CBF类基因能够应答干旱、低温、高温、盐及ABA胁迫,显示了其在调控河北杨胁迫抗性中的作用。 王泽亮 秦鹏飞 郭洪英 庄国庆 宋跃朋 安新民 张志毅关键词:河北杨 CBF DREB 进化 毛白杨PtFT1和PtFT2基因编码区克隆与表达模式分析 被引量:2 2011年 以毛白杨为材料,采用同源基因克隆法从毛白杨中分离了FT(FLOWERING LOCUS T)同源基因PtFT1和PtFT2编码区序列。测序结果表明PtFT1和PtFT2编码区长度均为525bp,可编码174个氨基酸。蛋白序列比对发现这两个基因与拟南芥、葡萄等物种中FT同源基因所编码的氨基酸同源性达到75%以上,PtFT1和PtFT2所推测的氨基酸序列包含FT类蛋白保守基序(LGRQTVYAPGWRQN)和两个关键性氨基酸残基Tyr84(Y),Gln139(Q)。系统进化分析进一步表明PtFT1和PtFT2属于FT亚家族成员。采用Real-time qRT-PCR技术检测PtFT1和PtFT2在各个组织部位中的表达模式,结果表明PtFT1和PtFT2在各个组织部位均有表达,但这两个基因的表达水平存在差异;两个基因在早期雌雄花芽(7月5日)表达量明显高于成熟雌雄花芽(翌年3月10日)表达量,进而推测在毛白杨中PtFT1和PtFT2的表达响应日照长短,长日照条件促进这两个基因的表达,它们可能在光周期调控的开花途径中促进花芽分化和开花发挥特定作用。这些研究对于阐明PtFT1和PtFT2在光周期开花调控途径中的作用机制具有重要意义,为进一步开展毛白杨开花调控基因工程研究奠定了工作基础。 陈仲 李昊 李英 王佳 叶梅霞 郭斌 季乐翔 安新民关键词:毛白杨 FT QRT-PCR 干旱胁迫对红皮柳光合特性日变化及生长的影响 被引量:12 2016年 红皮柳(Salix purpurea)是我国西北地区重要的乡土树种,生长快、适应性强,在水土保持、防护林和生物质能源等方面发挥重要作用。以红皮柳扦插苗为研究材料,通过盆栽试验,在4种不同程度干旱胁迫处理(对照、轻度干旱、中度干旱和重度干旱胁迫)下,测定叶片的光合作用参数及生长量,分析探讨干旱胁迫对红皮柳光合特性及生长的影响。结果表明:在轻度、中度和重度干旱胁迫下,红皮柳叶片净光合速率(Pn)日均值分别比对照下降10.4%(P>0.05)、17.9%(P<0.05)和58.2%(P<0.05),中度和重度干旱胁迫下Pn下降量达到显著水平;随着干旱胁迫程度的加剧,Pn的下降伴随着蒸腾速率(Tr)和气孔导度(Gs)的显著下降,水分利用效率(EWUE)逐渐升高,胞间CO_2浓度(Ci)先下降后上升;轻度干旱胁迫和中度干旱胁迫下Pn的降低是由于气孔限制引起,而重度干旱胁迫下受到气孔因素与非气孔因素的共同作用。而且,红皮柳生长受到干旱胁迫的显著影响,随着干旱胁迫程度的加重,株高和基径的相对增长率下降程度增大。 姬慧娟 贾会霞 章小铃 胡建军关键词:干旱胁迫 光合特性 日变化 741杨双Bt基因的遗传转化及转基因株系的抗虫性 被引量:8 2012年 以含有Cry3Aa基因的重组质粒pBCC3为基础,利用PCR和DNA重组技术,从pBCC3中克隆出抗虫基因Cry3Aa,将其正向插入载体pCAMBIA1305的CaMV35S启动子和NOS终止子之间,构建成pCAMBIA1305-Cry3Aa植物表达载体,并导入根癌农杆菌EHA105。采用农杆菌介导的遗传转化法,将Cry3Aa基因转入已转Cry1Ac+API基因的741毛白杨无性系pB29中,获得转双Bt基因的741杨。在含潮霉素的培养基中进行多次继代筛选,获得抗性稳定的无性系9个,编号为pCCA1—pCCA9。采用特异引物分别对转基因植株进行PCR检测,结果显示Cry1Ac基因稳定存在于pB29中,Cry3Aa基因已整合到各无性系的基因组DNA中。ELISA毒蛋白检测,转基因株系都有Cry1Ac和Cry3Aa杀虫蛋白表达。用转基因植株叶片进行柳蓝叶甲(鞘翅目)和美国白蛾(鳞翅目)室内饲虫试验结果表明,转基因植株具有双抗性。根据对测试昆虫的致死率划分高中低3个抗性水平,其中pCCA2,pCCA5,pCCA6,pCCA9具有双高抗;pCCA3,pCCA4和pCCA7对柳蓝叶甲表现出中、低抗性,对美国白蛾则高抗;而pCCA1表现对美国白蛾的极低抗性,对柳蓝叶甲则高抗。 王桂英 杨敏生 霍雪梅 王艳平 李珊珊关键词:CRY1AC基因 抗虫性