中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室开放课题基金
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 相关作者：斯日古楞周建华罗军荣马学恩刘霄卉更多>>
- 相关机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所内蒙古农业大学江西农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 基于转录组测序技术分析猪德尔塔冠状病毒诱导IPEC-J2细胞中自噬相关的变化
- 2023年
- 为了探究猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)感染宿主细胞后诱导细胞中发生的自噬相关变化,建立了PDCoV感染IPEC-J2细胞模型,通过间接免疫荧光和荧光定量PCR试验确定PDCoV在细胞中显著增殖。利用转录组测序获得了IPEC-J2细胞感染模型和正常细胞中的全部表达基因15393个。通过基因覆盖度和测序饱和度分析明确数据符合分析要求后,进一步筛选了PDCoV感染导致表达量发生显著变化的基因(差异基因)2056个,其中自噬相关基因33个。采用荧光定量PCR方法检测12个自噬基因在细胞感染模型和正常细胞中的相对表达量,检测结果与高通量测序结果一致。通过GO功能和KEGG通路富集分析,明确差异基因主要富集的功能和信号通路,并重点展示了6条自噬相关信号通路。本研究初步展示了PDCoV在IPEC-J2细胞增殖过程中诱导细胞发生的自噬相关变化,为研究PDCoV通过诱导细胞自噬促进自身复制的分子机制提供了理论依据。
- 江珊李秀丽李富强李富强陈建飞张莉陈建飞张莉冯力任卫科
- 关键词：转录组测序细胞自噬病毒复制
- JSRV衣壳蛋白单克隆抗体的制备及免疫学鉴定被引量：5
- 2009年
- 经纯化的JSRV-CA融合蛋白乳化后免疫Balb/c小鼠,四免后,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞经杂交瘤技术进行融合.最终获得了三株稳定分泌单克隆抗体的细胞系.同时,分段克隆绵羊肺腺瘤病毒ca基因并构建原核表达质粒,在E.coliBL21中诱导表达.以获得的三株抗JSRV-CA蛋白的单克隆细胞分泌的McAb为一抗,应用Western blot对分段表达的CA蛋白进行肽探针扫描,初步鉴定了三株单抗识别的线性表位,并应用非竞争性ELISA法测定了三株单抗的功能性亲和常数.为建立特异性的病原诊断方法、分析CA蛋白的功能及疫苗设计奠定了基础.
- 罗军荣斯日古楞刘霄卉周建华马学恩
- 关键词：绵羊肺腺瘤病毒表位衣壳蛋白抗体亲和力单克隆抗体
