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国家自然科学基金(39970785)

作品数:16 被引量:33H指数:4
相关作者:李胜利朱宏亮姚小宝闫利英刘晖更多>>
相关机构:西安交通大学医学院第二附属医院西安交通大学西安交通大学医学院第一附属医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 16篇中文期刊文章

领域

  • 16篇医药卫生

主题

  • 10篇细胞
  • 8篇耳蜗
  • 7篇毛细胞
  • 5篇外毛细胞
  • 3篇小鼠
  • 3篇基因
  • 3篇耳蜗外毛细胞
  • 2篇听性
  • 2篇听性脑干
  • 2篇听性脑干反应
  • 2篇豚鼠耳蜗
  • 2篇蝙蝠
  • 2篇腺病
  • 2篇腺病毒
  • 2篇小鼠耳蜗
  • 2篇脑干
  • 2篇脑干反应
  • 2篇畸变产物耳声...
  • 2篇耳声发射
  • 2篇耳蜗毛细胞

机构

  • 8篇西安交通大学...
  • 7篇西安交通大学
  • 7篇西安交通大学...
  • 2篇汕头大学
  • 1篇中国人民解放...
  • 1篇第四军医大学...
  • 1篇武警陕西总队...
  • 1篇解放军451...
  • 1篇西京医院

作者

  • 12篇朱宏亮
  • 12篇李胜利
  • 8篇姚小宝
  • 6篇闫利英
  • 6篇刘晖
  • 5篇王晓侠
  • 3篇张少强
  • 3篇黄沂传
  • 2篇郑庆印
  • 2篇李白芽
  • 2篇付员根
  • 2篇刘思伟
  • 1篇张敏燕
  • 1篇王晓侠
  • 1篇赵谦
  • 1篇马伟军
  • 1篇刘恩伟
  • 1篇刘晖
  • 1篇郑有礼
  • 1篇刘志国

传媒

  • 3篇西安交通大学...
  • 3篇中华耳科学杂...
  • 2篇听力学及言语...
  • 2篇Journa...
  • 1篇临床耳鼻咽喉...
  • 1篇西安医科大学...
  • 1篇第四军医大学...
  • 1篇南方医科大学...
  • 1篇中华耳鼻咽喉...
  • 1篇Journa...

年份

  • 1篇2011
  • 2篇2010
  • 1篇2008
  • 2篇2007
  • 3篇2006
  • 1篇2005
  • 1篇2004
  • 1篇2003
  • 4篇2002
16 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
腺病毒携带GFP在豚鼠耳蜗基因转导的形态结构与功能改变被引量:3
2002年
目的 带有绿色荧光蛋白 (GFP)基因的腺病毒注入豚鼠耳蜗后 ,观察不同时间段GFP基因的表达和分布情况及手术操作对听力的影响 ,为内耳基因治疗提供理论依据。方法  1 5只杂色豚鼠术前及术后行听性脑干反应 (ABR)和畸变耳声发射 (DPOAE)检查 ,空白对照组经圆窗或底回钻孔注入人工外淋巴液。实验组注入带有GFP基因的腺病毒。分别于 3、5、7和 1 0d后取材 ,耳蜗标本经硝酸银染色后铺片。结果 腺病毒注入耳蜗后对听阈影响不大。术前术后的DP值有差异。荧光显微镜下可见 3d组表达产物最高。 7d后逐渐减弱 ,1 0d后更弱 ,表达产物主要分布于支持细胞、螺旋神经节细胞和基底膜下的间皮细胞。对照组均无绿色荧光。结论 通过圆窗或底回注入腺病毒对听阈没有影响。单一位点的接种就能使神经营养因子通过耳蜗液扩散到整个耳蜗。有效的基因转移在耳蜗是可行的 ,但表达相对短暂。
王晓侠李胜利刘晖黄沂传姚小宝刘志国付员根朱宏亮
关键词:GFP耳蜗基因转导腺病毒
内耳疾病基因治疗方法的研究被引量:1
2002年
目的:探讨一种高效、安全和简便的内耳疾病基因转移和导入方法。方法:将30只健康豚鼠随机分为A、B、C 3组,每组10只。用Ad—GFP报告基因分别由圆窗、耳蜗底回和脑脊液三种途径导入30只豚鼠内耳,在术前和术后测定听性脑干反应(ABR)阈值和畸变产物耳声发射(DPOAE)振幅改变。再行耳蜗铺片,观察AdGFP在内耳组织中的转染表达和耳蜗毛细胞的形态结构。结果:三种途径导入Ad—GFP在耳蜗螺旋神经节、血管纹和Corti器上均有转染和表达。在术后3 d的表达产物最高,7 d后减弱,10 d后更弱。圆窗和耳蜗底回钻孔导入手术可引起蜗内出血,凝血块淤积在耳蜗顶回的中阶,造成顶回毛细胞损害。而脑脊液给药途径无此现象。ABR阈值在各组动物手术前后无明显改变,而圆窗和耳蜗底回给药途径造成DPOAE幅度明显下降,脑脊液给药组无DPOAE改变。结论:应用腺病毒载体进行基因转移通过圆窗和耳蜗底回钻孔途径可引起蜗内出血,影响DPOAE幅度,而应用脑脊液给药途径则相对安全和方便。
李胜利王晓侠刘晖黄沂传姚小宝朱宏亮
关键词:腺病毒基因转移内耳疾病基因治疗脑脊液
蝙蝠耳蜗Corti器的电子显微镜观察被引量:4
2007年
目的研究蝙蝠耳蜗基底膜毛细胞及静纤毛的特化现象。方法扫描电镜和透射电镜观察三种蝙蝠耳蜗毛细胞及静纤毛的表面亚显微结构形态。结果外毛细胞静纤毛特别的短,外毛细胞体呈瓶状或哑铃状,外毛细胞体被Deiters细胞的杯状膜包裹。结论我们观察到三种蝙蝠耳蜗外毛细胞体基本呈烧瓶状和哑铃状,明显有别于其他哺乳类耳蜗外毛细胞呈圆柱型的形态。这种毛细胞体的独特形态,可能是蝙蝠为适应高频回声定位的需要出现的特化现象。
闫利英李胜利李白芽张少强刘思伟朱宏亮郑庆印
关键词:外毛细胞耳蜗回声定位蝙蝠
增龄相关听力丧失小鼠耳蜗毛细胞表型与基因突变的关系被引量:6
2004年
目的 观察增龄相关听力丧失 (AHL)小鼠耳蜗毛细胞病理改变的超微结构 ,为老年性聋病理生理及临床表现+基因表型提供形态学改变依据。方法 应用扫描电镜 (SEM)观察BALB/c小鼠耳蜗Corti器毛细胞的超微结构改变 ,测定动物ABR反应阈值。DNA提取PCR扩增分析基因型。结果  6月龄BALB/c小鼠耳蜗底回内外毛细胞有连续的缺失 ,静纤毛束有融合、散乱、变短和失去劲度。ABR阈值呈中到重度听力损失。证明种系特异的Ahl基因位点和基因功能。结论 耳蜗毛细胞静纤毛束融合、散乱、变短是老年性聋早期的主要病理改变 ,mdfw与Ah1的表现形式是同一基因位点 ,可能与myosin基因突变有关。
李胜利郑庆印闫利英朱宏亮姚小宝郑有礼
关键词:基因突变耳蜗毛细胞遗传性耳聋老年性聋
耳蜗外毛细胞静纤毛束变异与听功能改变的关系被引量:4
2002年
目的 探讨耳蜗毛细胞静纤毛束变异与听功能改变的关系。方法 测定 2 0只豚鼠听性脑干反应(ABR)阈和畸变产物耳声发射 (DPOAE)振幅 ,观察耳蜗毛细胞静纤毛变异形态 ,计数变异的毛细胞数目。结果 耳蜗毛细胞静纤毛束变异主要为第一排外毛细胞静纤毛转位 ,多呈 90° ,少数达 180°,两臂长短不一 ,“W”型夹角变大。在这些动物中 ,ABR反应阈变化不明显 ,DPOAE振幅显著增大。结论 豚鼠耳蜗外毛细胞静纤毛束变异具有普遍性 ,变异者伴有一定的听功能改变 ,DPOAE可作为判断变异的指标。
李胜利朱宏亮刘晖黄沂传王晓侠姚小宝
关键词:耳蜗毛细胞听性脑干反应畸变产物耳声发射
Toll样受体2和4在小鼠肺炎链球菌中耳急性感染中的作用被引量:1
2011年
目的 探讨Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)和Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)在小鼠肺炎链球菌中耳感染中的作用.方法 野生型(wild type,WT)C57BL/6J小鼠、TLR2缺陷(TLR2-/-)和TLR4缺陷(TLR4-/-)小鼠分别通过中耳鼓膜接种肺炎链球菌悬液[1×106菌落形成单位(colony forming unit,CFU)].在细菌接种前、接种后第3天和第7天分别进行听性脑干反应(ABR)和鼓室声导抗测试,血液及中耳积液中细菌滴度测定,颞骨病理切片形态学观察,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同基因型小鼠炎性细胞因子IκB激酶β(IκB kinase β,IKKβ)、核因子κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)、黏蛋白/黏液素5AC和5B(MUC5AC和MUC5B)mRNA的表达.结果 中耳接种肺炎链球菌3d后,TLR2-/-小鼠死亡率为58.8%(40/68),TLR4-/-小鼠死亡率为35.6%(21/59),而WT小鼠的死亡率仅为17.3%(9/52).接种7d后,TUR2-/-小鼠死亡率为82.4%(54/68),TLR4-/-小鼠死亡率为54.2%(32/59),而WT小鼠的死亡率仅为23%(12/52),三组之间差异具有统计学意义(P<0.01).ABR测试结果显示,接种后存活3d及7d的TLR2-/-和TLR4-/-小鼠ABR阈值高于WT小鼠,三组之间的差异具有统计学意义(P<0.01).颞骨病理发现,TLR2-/-和TLR4-/-小鼠接种肺炎链球菌后第3天中耳出现积液和组织破坏,接种后第7天感染极为严重.TLR2-/-鼠出现严重的耳蜗炎性细胞浸润,内外毛细胞破坏、盖膜肿大和血管纹退变,以及螺旋神经节细胞的损伤;TLR4-/-鼠可见耳蜗内外毛细胞和螺旋神经节细胞的损伤;而WT鼠的耳蜗未见炎性细胞浸润和组织破坏,内外毛细胞基本正常.在接种细菌3d和7d的TLR2-/-鼠中耳黏膜未发现肥大细胞,但在TLR4-/-和WT鼠中耳黏膜发现较多的肥大细胞并有脱颗粒现象.接种肺炎链球菌后3d和7
李胜利张敏燕李白芽郑庆印朱宏亮
关键词:TOLL样受体2TOLL样受体4细胞因子类小鼠
HAIR CELL-LIKE CELL GENERATION INDUCED BY NATURE CULTURE OF ADULT RAT AUDITORY EPITHELIUM
2006年
Objective To establish adult rat auditory epithelial cell culture and try to find precursor cells of auditory hair cells in vitro. Methods With refinement of culture media and techniques, cochlear sensory epithelial cells of adult rat were cultured. Immunocytochemistry and Bromodeoxyuridine (BrdU)labeling were used to detect properties and mitotic status of cultured cells. Results The cultured auditory epithelial cells showed a large, flat epithelial morphotype and expressed F-actin and cytokeratin, a subset of cells generated from auditory epithelium were labeled by calretinin, a specific marker of early hair cell. Conclusion Adult rat auditory epithelium can be induced to generate hair cell-like cells by nature culture, this phenomenon suggests that progenitor cells may exist in rat cochlea and they may give birth to new hair cells. Whether these progenitor cells are tissue specific stem cells is still need more study.
刘晖朱宏亮李胜利姚小宝王晓侠
关键词:COCHLEACULTURE
胎鼠听囊细胞体外培养研究
2006年
目的:了解哺乳动物听觉细胞的来源,探索听觉细胞前体细胞体外增殖和分化.方法:取孕鼠胚胎听囊细胞进行体外培养,用免疫细胞化学方法,分别对培养的细胞进行细胞角蛋白、F肌动蛋白和calretinin染色观察细胞特征;BrdU染色观察细胞增殖.结果:培养的细胞在体外进行分化和增殖,细胞形态主要有上皮细胞形态、成纤维细胞形态和神经细胞形态3种.对细胞角蛋白和F肌动蛋白这两种上皮细胞的标志染色呈阳性.在原代培养就出现calretinin染色明显阳性的细胞.传代后结果仍为阳性着染,但强度减弱.BrdU染色显示培养细胞具有明显的增殖活性.本研究共传8代,历时4mo,细胞形态维持稳定.结论:胎鼠听囊细胞在体外自然培养条件下可以分化或者增殖为未成熟毛细胞.本研究为探索刺激听觉毛细胞再生的治疗方法提供研究思路和方法.
刘晖程随涛许珉梁建民马伟军
关键词:干细胞细胞增殖细胞分化胎鼠
Mammalin cochlear supporting cells transdifferentiation into outer hair cells被引量:1
2008年
Objective To study the recovery of the outer hair cells in the bat cochlea after gentamicin exposure. Methods Bats were injected with a daily dose of gentamicin for 15 consecutive days and bromodeoxyuridine (BrdU) was given from day 16 to day 40 of this recovery phase. Hearing was assessed by overt acoustic behavior and auditory brainstem responses analysis, which was performed one day prior to the first injection and a day after the last injection (day 16). On day 40 animals were sacrificed for detection of cells that could take up BrdU. Results After 15 days of gentamicin treatment, all of the animals were proved to be deafened with significant increases of ABR thresholds, compared with control group. The findings in immunocytochemical stained samples and scanning electron microscopy revealed that BrdU labeled nuclei were observed in the cochlea in all of the deafened animals most commonly in the regions of the first-row and second-row Deiter's cells (DCs) and occasionally in the regions of the third-row DCs. Conclusion We suggest that, under sufficient drug and enough time, the bat cochlear supporting cells can directly transdifferentiate into the outer hair cells after aminoglycoside exposure. This transdifferentation process is essential for repair of outer hair cells and recovery of normal function after gentamicin exposure.
刘思伟张少强朱宏亮李白牙郑庆印李胜利
小鼠耳蜗感觉上皮细胞的自然培养诱导毛细胞的产生被引量:3
2003年
目的 培养小鼠耳蜗上皮细胞,寻找听觉毛细胞的前体细胞,从而研究听觉毛细胞的再生。方法 改良细胞培养基和培养技术,建立小鼠耳蜗听觉上皮细胞的培养;用免疫细胞化学方法和BrdU标记法检测培养细胞的性质和分裂状态。结果 培养的听觉上皮细胞表现为大而扁平的上皮细胞形态,并且表达上皮细胞的标志F-actin和cytokeratin,部分新生的细胞可被早期毛细胞的特异标志calretinin着染,表明有听觉毛细胞样的细胞产生,这种现象经3次传代培养后仍然存在。结论 自然细胞培养方法可能诱导小鼠听觉毛细胞的产生,在小鼠的耳蜗内可能存在听觉毛细胞的前体细胞,而这些前体细胞是否是组织特异性干细胞还需要更进一步的研究。
刘晖李胜利朱宏亮姚小宝王晓侠
关键词:耳蜗毛细胞前体细胞
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