广西壮族自治区自然科学基金(0832036)
- 作品数：5 被引量：16H指数：3
- 相关作者：张为宇黄维义沈前程韩忠燕钟恒禄更多>>
- 相关机构：广西大学广西医科大学第一附属医院中国农业科学院水牛研究所更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 不同重悬细胞法在洗涤过程中对水牛外周血单个核细胞活率的影响被引量：5
- 2009年
- 为了探讨在离心洗涤水牛外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)过程中以移液器吹打法和晃动离心管法重悬细胞对其活率的影响。对经密度梯度离心后初步收集到的PBMC,分别用移液器吹打和晃动离心管2种方法重悬细胞,离心洗涤后对细胞活率进行计数。结果发现,移液器吹打法得到的细胞活率为(74.9±2.6)%,而晃动离心管法使细胞活率达到(98.5±0.5)%,差异极显著(P<0.01)。说明在洗涤PBMC时,晃动离心管法重悬细胞能大大提高细胞活率,可为那些对细胞活率要求高的试验提供一个较为有效的方法。
- 韩忠燕张宝红黄海愉张为宇黄维义钟恒禄
- 水牛肺泡巨噬细胞的分离、培养及鉴定被引量：7
- 2010年
- 为了深入研究水牛巨噬细胞(Macrophage,Mφ)的生物学特性,探索一种简便的水牛肺泡巨噬细胞(Alveolarmacrophage,AM)分离、培养方法,采用肺气管冷PBS灌洗法分离获得水牛肺泡细胞,并进行鉴定和功能检测。结果表明,采用肺气管冷PBS灌洗法可获得大量贴壁细胞,经光学显微镜和电子显微镜观察,其形态具备巨噬细胞的典型特征;酸性磷酸酶和非特异性酯酶阳性率分别为(89.4±3.5)%和(83.6±3.4)%;细胞表面抗原MHCⅡ阳性率为(96.6±1.3)%;鸡红细胞吞噬率为(23.6±4.2)%,墨汁吞噬率为(92.3±0.6)%。可见,肺气管冷PBS灌洗法是一种获取水牛肺泡巨噬细胞的可行方法。
- 韩忠燕黄海愉沈前程张为宇黄维义钟恒禄
- 关键词：水牛肺泡巨噬细胞
- 大片吸虫ESP对水牛外周血单核/巨噬细胞NO表达的影响
- 2011年
- 为探讨水牛易感大片吸虫的免疫机理,采用Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离水牛外周血单个核细胞,再经贴壁法纯化单核/巨噬细胞,用Geriss法检测在大片吸虫分泌排泄产物(ESP)或脂多糖(LPS)作用下,水牛外周血单核/巨噬细胞一氧化氮(NO)的表达量。结果显示,大片吸虫ESP或LPS都可单独作用刺激水牛外周血单核/巨噬细胞产生NO。大片吸虫ESP(0.1、1μg/mL)和LPS(0.1μg/mL)联合作用时水牛外周血单核/巨噬细胞产生NO的量低于LPS(0.1μg/mL)单独作用时的量,差异显著(P<0.05)。大片吸虫ESP(10μg/mL)和LPS(0.1μg/mL)联合作用时水牛外周血单核/巨噬细胞产生NO的量与LPS(0.1μg/mL)单独作用时差异不显著(P>0.05)。结果表明,大片吸虫ESP或其中组分能抑制水牛外周血单核/巨噬细胞产生NO的作用,这可能是水牛易感大片吸虫的一个原因。
- 沈前程林莹王树艳张为宇黄维义潘玉红罗华
- 关键词：大片吸虫水牛
- 水牛外周血单核巨噬细胞的培养与鉴定被引量：3
- 2011年
- 本试验旨在为阐明水牛感染大片吸虫的免疫机理提供单核巨噬细胞材料。经过密度梯度离心分离,贴壁法培养水牛外周血单核巨噬细胞,以MTT法检测培养4、24、48、72、96、120、144、168、192h时贴壁单核巨噬细胞的相对存活数量,结果显示贴壁细胞体外培养72、96、120h时,细胞数量相对稳定,组间差异不显著(P<0.05)。贴壁72h的细胞通过倒置显微镜、瑞氏染色观察,结果显示其具备单核巨噬细胞的典型形态特征;酸性磷酸酶、非特异性酯酶染色阳性率分别为(72.8±0.5)%和(84.6±0.4)%,显示其具备单核巨噬细胞酶化学特性;贴壁细胞表达单核巨噬细胞特异性表面抗原MHCⅡ;墨汁的吞噬率为(87.5±0.6)%,表明该细胞具有单核巨噬细胞的吞噬功能。结果表明贴壁法分离,5%BSA的DMEM培养水牛外周血单核巨噬细胞,培养72h贴壁细胞具备单核巨噬细胞特征,在细胞数量相对稳定期(72、96、120h)可以进行相应的试验研究。
- 沈前程林莹王树艳张为宇黄维义郑威王华俊
- 关键词：单核巨噬细胞大片吸虫水牛细胞培养
- siRNA对体外培养红系细胞α-珠蛋白基因表达的影响被引量：3
- 2010年
- 目的研究针对α-珠蛋白基因的小分子干扰RNA(si RNA)对体外培养红系细胞α-珠蛋白肽链mRNA表达的影响。方法将针对α-珠蛋白肽链设计、化学方法合成的si RNA通过脂质体转染体外培养正常人的红系细胞,在转染后24、48、72 h,用流式细胞术检测转染效率,RT-PCR检测α链mRNA表达水平。结果脂质体转染FCM标记的si RNA进入红系细胞后,24、48、72 h的转染效率分别为61.2%、44.3%、33.7%。si RNA作用于体外培养的红系细胞,经RT-PCR检测,转染后α-珠蛋白基因mRNA相对表达量下降,浓度越高,相对表达量越低。随着作用浓度增加,红系细胞台盼兰拒染率越低;且作用时间越长,台盼兰拒染率也越低。结论脂质体转染si RNA能特异性地抑制体外培养的红系细胞中α-珠蛋白基因表达,可能会成为β-珠蛋白生成障碍性贫血基因治疗的一个新靶点。
- 罗琳赖永榕刘容容
- 关键词：Β-珠蛋白生成障碍性贫血小分子干扰RNAΑ-珠蛋白
