重庆市卫生局科研项目(2009-2-21)
- 作品数：8 被引量：13H指数：2
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- 苦参碱诱导白血病TF-1细胞凋亡及对SALL4基因表达的影响被引量：4
- 2011年
- 目的:探讨苦参碱(matrine,Mat)诱导急性髓性白血病M6型人红白血病TF-1细胞凋亡及对SALL4基因表达的影响。方法:将不同质量浓度(0.5,1.0,1.52,.0 g.L-1)的Mat分别作用于体外培养的TF-1细胞不同时间(24,48,72 h),MTT检测Mat对细胞增殖的影响;流式细胞术(flow cytometry,FCM)测定细胞周期;Annexin V和PI双染色法检测细胞凋亡;逆转录RT-PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)检测SALL4 mRNA表达。结果:Mat(0.5～2.0 g.L-1)作用TF-1细胞24,48,72 h后均有增殖抑制作用(P<0.01),在该浓度范围内抑制率呈剂量和时间依赖4,8 h半数抑制浓度(IC50)为1.0 g.L-1;Mat作用TF-1细胞48 h后,与对照组相比G0/G1期细胞比例增加,S期细胞下降(P<0.01);流式细胞术检测细胞凋亡率分别为8.6%1,1.21%,15.26%,17.63%,与对照组(5.05%)相比较,差异具有统计学意义(P<0.01);RT-PCR结果显示SALL4mRNA表达量与β-actin(内参照)表达量的比值,随Mat剂量增加而显著减小(P<0.01)。结论:Mat在一定浓度和时间范围内对TF-1细胞具有增殖抑制作用,其机制是使细胞发生G0/G1期阻滞;抑制SALL4基因的表达,诱导细胞凋亡。
- 喻依川王兰傅雷华胡成琳陈林
- 关键词：苦参碱白血病细胞凋亡
- 硼替佐米诱导急性髓性白血病细胞凋亡及对SALL4基因表达的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨蛋白酶体抑制剂硼替佐米(bortezomib、Bor)诱导急性红白血病细胞株(TF1)和急性早幼粒白血病细胞株(NB4)凋亡及其对SALL4基因表达的影响。方法 MTT法检测细胞的增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡;免疫细胞化学检测SALL4蛋白表达;实时荧光定量PCR检测SALL4 RNA的表达变化;Western Blotting检测SALL4蛋白的表达情况。结果 MTT结果显示,硼替佐米能够抑制两种细胞的增殖,呈时间和计量依赖性,TF1细胞和NB4细胞48 h IC50分别为(29.15±0.55)和(30.55±0.74)nmol.L-1;流式细胞术结果显示,细胞凋亡率随着硼替佐米浓度的增加而增加,呈剂量依赖性。免疫细胞化学显示两种细胞均表达SALL4蛋白,定位于细胞核;实时荧光定量PCR结果表明,经不同浓度Bor(10,30,50 nmol.L-1)处理24 h后,两种细胞的SALL4 RNA均出现了不同程度的下调,50 nmol.L-1 Bor作用后,SALL4基因表达下降为对照组的45.11%(TF1)和69.77%(NB4),差异均具有统计学意义(P<0.05);Western Blotting结果表明,Bor能够抑制两种细胞中SALL4B蛋白的表达,具有时间剂量依赖性。结论硼替佐米能够抑制TF1、NB4细胞的增殖并促进细胞凋亡,同时抑制SALL4基因表达。
- 傅雷华王兰喻依川胡成琳陈林
- 关键词：硼替佐米凋亡
- 硼替佐米诱导TF-1细胞凋亡及其对SALL4基因表达的影响
- 2011年
- 目的:探讨蛋白酶体抑制剂硼替佐米(Bortezomib)诱导人红系白血病细胞株TF-1凋亡的作用,及其对Sall4基因表达水平的影响。方法:(1)MTT法检测细胞增殖抑制率。(2)光学显微镜观察细胞的形态学改变。(3)电镜观察超微结构变化。(4)流式细胞仪检测Annexin V-FITC细胞凋亡率。(5)流式细胞仪分析细胞周期。(6)RT-PCR检测Sall4 mRNA的表达水平。结果:(1)硼替佐米呈时间和剂量依赖性抑制TF-1细胞生长,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。24 h和48 h的药物半数抑制浓度(Halfmaximal inhibitory concentration of a substance,IC50)分别为52 nmol/L和27 nmol/L。(2)显微镜下观察细胞皱缩变小,细胞密度明显下降。(3)电镜下观察可见凋亡小体。(4)Annexin V-FITC检测显示随着硼替佐米作用浓度的增加,凋亡率增加,呈剂量依赖关系(P<0.05)。(5)流式细胞仪分析细胞周期,随着硼替佐米作用时间的增加,G2/M期细胞比例逐渐增高,而G0/G1和S期细胞比例则逐渐减少,呈时间依赖关系(P<0.05)。(6)RT-PCR结果示Sall4基因在TF-1细胞上高表达,并随着硼替佐米作用浓度和时间的增加,Sall4 mRNA与β-actin mRNA表达量的积分光密度比值(Integral optical density ratio,V/B)水平下降(P<0.05)。结论:硼替佐米能抑制TF-1细胞增殖,诱导其凋亡,呈时间-剂量依赖关系。Sall4基因在TF-1细胞株上高表达,并随着硼替佐米作用浓度和时间的增加表达水平下降,呈时间-剂量依赖关系。
- 王兰喻依川傅雷华胡成琳陈林
- 关键词：硼替佐米细胞凋亡
- 硼替佐米对急性髓性白血病细胞凋亡及SALL4基因和Wnt/β-catenin信号通路的影响
- 2012年
- 目的探讨硼替佐米(Bortezomi,Bor)对急性早幼粒细胞白血病NB4细胞株和急性红白血病TF1细胞株增殖、凋亡及SALL4基因和Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因C-myc、CCDN1表达的影响。方法分别用10、30、50 nmol/L的Bor处理NB4和TF1细胞12、24、48 h,并设对照组(不加Bor)。采用MTT法检测细胞的增殖活力;流式细胞术检测细胞凋亡率;RT-PCR和荧光定量PCR法检测细胞中SALL4、C-myc和CCDN1基因的表达。结果 Bor可抑制两种细胞的增殖,且呈时间和剂量依赖性,NB4和TF1细胞经Bor处理48 h的IC50值分别为23.97和25.36 nmol/L。Bor可诱导两种细胞凋亡,且呈剂量依赖性,经30和50 nmol/L Bor处理24 h的NB4细胞的凋亡率与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);经50 nmol/L Bor处理24 h的TF1细胞的凋亡率与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。Bor可显著抑制两种细胞中SALL4基因及C-myc、CCDN1基因的表达。经50 nmol/L Bor作用24 h后,两种细胞中3种基因的表达与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。SALL4基因与C-myc和CCDN1基因的表达明显相关(rs值分别为0.857和0.929,P均<0.01)。结论 SALL4基因及Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因C-myc和CCDN1基因表达的抑制在Bor诱导NB4和TF1细胞凋亡的过程可能起重要作用。
- 傅雷华王兰喻依川胡成琳陈林
- 关键词：硼替佐米急性早幼粒细胞白血病急性红白血病细胞凋亡WNT/Β-CATENIN信号通路
- 难治性/复发性弥漫大B细胞淋巴瘤的生物治疗被引量：1
- 2013年
- 尽管弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)患者的总体预后有所改善,但仍有大约三分之一患者属于难治性/复发性DLBCL,这是导致其发病率和病死率增加的主要原因。临床上治疗难治性/复发性DLBCL的方法仍以大剂量化疗以及对无并发症的患者进行大剂量化疗-自体干细胞移植(high-dose chemotherapy-autologous stem cell trans-plant,HD-ASCT)为主。但对于给予利妥昔单抗联合CHOP化疗(rituximab-CHOP,R-CHOP)治疗后无反应的难治性DLBCL患者进行HD-ASCT,预后极差。因此,如何提高难治性/复发性DLBCL患者总生存期成了新的研究热点。本文主要从治疗方面对难治性/复发性DLBCL进行综述。
- 史丽君陈林
- 关键词：弥漫大B细胞淋巴瘤复发性
- SALL4基因在苦参碱诱导白血病THP-1细胞凋亡过程中的表达被引量：2
- 2011年
- 目的探讨癌基因SALL4在苦参碱诱导人急性单核细胞白血病M5型THP-1细胞株凋亡过程中的表达及其意义。方法分别以1.0、1.5及2.0 g/L的苦参碱处理THP-1细胞,于24、48及72 h后,电镜观察细胞形态学改变;MTT法检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡;RT-PCR检测细胞SALL4基因mRNA的表达。结果经1.0 g/L苦参碱作用24 h的THP-1细胞呈不同程度的凋亡形态改变;与对照组相比,各浓度苦参碱组均能显著抑制THP-1细胞增殖及促进细胞凋亡,且呈浓度和时间依赖性(P<0.05);各浓度苦参碱组SALL4基因mRNA的表达水平较对照组均显著下降,且呈浓度和时间依赖性(P<0.05)。结论 SALL4基因表达下降在苦参碱诱导白血病THP-1细胞凋亡过程中可能可能起重要作用。
- 喻依川王兰胡成琳傅雷华陈林
- 关键词：癌基因白血病苦参碱THP-1细胞细胞凋亡
- SALL4基因在恶性血液病中的研究被引量：1
- 2011年
- SALL4与造血系统恶性肿瘤的发生有密切关系。深入研究SALL4基因及蛋白的功能，将有助于阐明白血病的发病机制，为治疗白血病提供新靶点。
- 喻依川陈林
- 关键词：肿瘤白血病干细胞
- 苦参碱对人急性红白血病细胞株TF-1SALL4基因及Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因表达的影响被引量：7
- 2013年
- 目的探讨苦参碱对人急性红白血病细胞株TF-1 SALL4基因及Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因表达的影响。方法用不同浓度的苦参碱(0.5、1.0、2.0 g/L)处理TF-1细胞,另设对照组(不加苦参碱)。苦参碱作用48 h后,采用实时荧光定量PCR法检测各组TF-1细胞中SALL4基因及Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因β-catenin、C-myc、Cyclin DI的表达水平,并分析SALL4基因与β-catenin、C-myc及Cyclin DI表达的相关性;Western blot法检测各组TF-1细胞中SALL4蛋白的表达水平。结果经不同浓度苦参碱处理48 h后,TF-1细胞中SALL4、β-catenin、C-myc、Cyclin DI基因的表达水平及SALL4蛋白的表达水平与对照组相比,均明显下降,且呈浓度依赖性(P<0.05);SALL4基因与β-catenin、C-myc、Cyclin DI基因的表达明显相关(r s值分别为0.912、0.818和0.832,P均<0.01)。结论苦参碱对TF-1细胞中SALL4基因和蛋白表达及Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因β-catenin、C-myc、Cyclin DI的抑制可能在抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡过程中起重要作用。
- 周陈姣史丽君傅雷华王兰喻依川胡成琳陈林
- 关键词：苦参碱红白血病WNTΒ-CATENIN信号通路
