国家自然科学基金(39970724)
- 作品数：6 被引量：39H指数：5
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- 相关机构：中国人民解放军总医院军事医学科学院空军总医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 应用基因芯片技术比较两种不同表型的胆管癌组织中基因表达的差异被引量：5
- 2002年
- 目的 研究与胆管癌侵袭、转移表型及预后相关的基因表达情况。方法 应用基因芯片（cDNA array）技术,从两个胆管癌标本分离得到的 mRNA逆转录合成探针,分别与尼龙膜上的14802个基因进行杂交,杂交后的膜经扫描仪成象和软件进行光密度分析后得出表达发生改变的基因。结果 所分析的14802个基因或序列中,表达差异的基因或序列共有754条,其中有455条是已知功能的基因,经进一步分析得出有30余条是比较有意义的,如:MUC18、KGF、TCF-4、PSP94、Smad5、TACC1、α-Catenin、Syndecan-1、Angiogenin、myosin等。结论 胆管癌组织中与肿瘤转移及预后相关的基因是很多的,应用基因芯片技术,为同时分析多个基因的表达状况提供了一个可用的方法,这一方法为了解不同生命过程中基因表达概况提供了一种途径。
- 张效东周宁新卢柏松黄培堂
- 关键词：基因芯片胆管癌基因表达
- 胆管癌新鲜组织标本库建立与鉴定被引量：13
- 2005年
- 目的利用解放军总医院肝胆外科的医疗优势,摸索一套合理的操作方法,有计划地建立胆管癌新鲜组织标本库,为系统开展胆道肿瘤研究做好准备。方法选取2000年1月～2001年6月解放军总医院肝胆外科以胆道肿瘤为主要诊断而行手术切除的患者的手术标本21例,包括肿瘤组织、正常组织和(或)癌旁组织,将切取的组织块分割后装入编号的灭菌贮藏管,迅速放入液氮转移罐,深低温冰柜保存。全部组织标本均经常规病理组织学检查予以鉴定,并取其中部分组织使用Trizol试剂提取总RNA鉴定以判断组织成分的完整性。结果21例标本中肝内胆管癌4例,肝门胆管癌6例,肝外胆管癌7例,壶腹癌4例。由于肿瘤标本大小不同,所切取的组织块数目各异;因手术难度及人为因素的影响使得组织留取平均时间为(47.60±43.87)min。所取组织经Trizol试剂提取后,可见离心管底部沉淀的呈黄白薄片状的RNA,经紫外分光光度计分析得出其A260/A280=1.6～1.8,总RNA经1%琼脂糖凝胶电泳后可见明显的28s和18s条带,而且28s条带的亮度大约是18s的2倍;2例超过2h的标本的A260/A280<1.6,且电泳显示28s和18s条带不清、消失及拖尾。结论人类遗传资源库的建设是开展疾病相关基因研究的重要的基础性工作,本实验建立的胆管癌组织标本留取操作流程可保证标本库质量。标本的留取必须在知情同意和保证留有足够的用于病理诊断的组织前提下,由有经验的相对固定的医护人员完成;标本离体时间应掌握在1h之内,应常规将标本分割多管保存。
- 万涛周宁新黄志强
- 关键词：胆管癌标本库
- 佛波醇酯和三羟基异黄醇对雌激素受体阳性细胞中三苯氧胺作用的影响
- 2002年
- 探讨三苯氧胺作用的组织学特异性及乳腺癌内分泌治疗抵抗的可能机制。向 MCF7及 Hela细胞中转染入含周期素 D1基因调控序列的报告基因 ,用佛波醇酯 (TPA)、 5 ,7,4 -三羟基异黄醇 (Genistein)处理细胞后 ,检测三苯氧胺对报告基因表达的调控作用。结果发现 :MCF7细胞中 ,TPA可使三苯氧胺产生促进报告基因表达作用。Hela细胞中 ,Genistein预先作用 12 h后 ,三苯氧胺表现出抑制报告基因表达作用。提示雌激素信号传导途径以外的蛋白激酶活性改变可明显影响三苯氧胺的作用 。
- 蔡开琳陈道达王国斌卢晓明张波张锦辉田元
- 关键词：雌激素受体三苯氧胺佛波醇酯HELA细胞乳腺癌
- 半定量检测胆管癌组织中人fxyd6基因的表达被引量：7
- 2008年
- 目的研究人fxyd6基因在正常胆管与胆管癌组织中的表达,检测该基因在胆管癌组织切片中的亚细胞表达定位。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测人fxyd6基因在正常胆管和胆管癌新鲜组织中的表达;采用原位RT-PCR(IS-RT-PCR)方法原位检测该基因在胆管癌石蜡组织切片中的亚细胞表达定位,并应用多媒体图像分析软件进行半定量分析。结果人fxyd6基因在正常胆管和胆管癌组织中存在差异性表达;原位RT-PCR检测表明人fxyd6基因定位于胆管癌上皮细胞胞浆内,在肿瘤细胞中的表达明显高于在正常胆管细胞中的表达(P<0.05)。结论人fxyd6基因在胆管癌的转化、演进过程中可能起重要作用。
- 肖梅周宁新高丽杰张爱群郭维高亚兵彭瑞云张效东万涛
- 关键词：胆管癌离子转运生物信息学聚合酶链反应
- mRNA差异显示技术的应用与改进被引量：11
- 2000年
- 目的 :克隆和研究高低分化胆管癌间差异表达基因。方法 :对mRNA差异显示PCR(DDRT PCR)的一系列条件进行了探索和改进 ,建立了有效的DDRT PCR法。结果 :在高、低分化胆管癌差异分化基因的研究方面获得了满意的结果 ,共获得 9个有显著差异的cDNA片段 ,测序后进行同源序列比较 ,有一个与层粘连蛋白受体基因高度同源 ,还有一个可能是一个新基因的部分序列。结论 :通过对传统方法的改进 ,大大提高了工作效率 ,降低了实验成本和工作量并对相关问题进行了探讨 ,为进一步的研究奠定了基础。
- 周宁新张效东卢柏松贾熙华黄培堂
- 关键词：DDRT-PCR胆管癌MRNA
- 不同分化胆管癌间差异表达基因的研究被引量：6
- 2002年
- 目的 从基因表达水平上探讨不同分化胆管癌及其预后的机理,寻找与胆管癌分化发育相关的基因,从整体上分析不同分化胆管癌差异表达基因的情况,为胆管癌的早期诊断和治疗寻找一些Marker。方法 从高、低分化胆管癌组织中提取总RNA作为比较材料,采用差异显示PCR（DDRT-PCR）技术,将两种组织中差异表达的基因cDNA经PCR扩增,采用反向Northern blot鉴定,以排除假阳性,将有显著差异的PCR产物克隆到质粒载体上,测序并进行同源性比较。结果 得到了9个有显著差异的cDNA片段,其中一个序列分析的结果与LR（Laminin receptor）基因序列高度同源。另有一个序列与EST的大量序列同源。结论 通过对差异显示技术一系列条件的探索和改进,建立了有效的DDRT-PCR法,并在高、低分化胆管癌差异表达基因的研究方面获得了满意结果。
- 张效东周宁新卢柏松贾熙华黄培堂
- 关键词：胆管癌肿瘤分化预后基因表达
