四川省卫生厅科研基金(070222)
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
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- hMAM融合HSP70基因真核表达载体的构建及其免疫学活性测定
- 2009年
- 目的构建融合人乳腺珠蛋白(hMAM)与人热休克蛋白70(HSP70)基因的真核表达载体pcDNA3.1-hMAM-HSP70,为乳腺癌的基因治疗奠定基础。方法采用PCR法扩增hMAM基因,酶切测序分析后,与人HSP70基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1,构建重组载体pcDNA3.1-hMAM-HSP70,采用电穿孔法转染入COS-7细胞,间接免疫荧光法和ELISA法检测目的基因的表达。结果成功扩增HSP70与hMAM基因,酶切测序结果表明,重组载体含有hMAM与人HSP70的融合基因,COS-7细胞中可检测到hMAM表达;重组质粒免疫小鼠可诱导产生抗HSP70抗体。结论hMAM与人HSP70融合基因的真核表达载体构建成功;此为进一步进行乳腺癌的基因治疗提供了实验依据。
- 赵矫税青林田强陈绍坤周进
- 关键词：人乳腺珠蛋白COS-7细胞
- hMAM与人HSP70融合基因真核表达载体的构建与表达被引量：1
- 2009年
- 目的:构建人乳腺珠蛋白(hMAM)与人热休克蛋白70(hHSP70)融合基因的真核表达载体pcDNA3.1-hMAM-HSP70,并观察重组载体在COS-7细胞中的表达,为肿瘤DNA疫苗研究奠定基础。方法:利用PCR方法扩增hMAM基因,经酶切测序分析后,与人HSP70基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1,构建了融合基因真核表达载体pcDNA3.1-hMAM-HSP70。将重组载体电穿孔法转染入COS-7细胞,间接免疫荧光法检测目的基因的表达。结果:成功扩增了人HSP70基因与hMAM基因,酶切测序结果表明,重组载体含有hMAM与人HSP70的融合基因,在COS-7细胞中可检测到hMAM表达。结论:hMAM与人HSP70融合基因的真核表达载体构建成功,为进一步进行DNA肿瘤疫苗研究提供了实验依据。
- 赵矫余红税青林周进赵小平黄燕
- 关键词：人乳腺珠蛋白融合基因
