国家教育部博士点基金(20091202110009)
- 作品数：7 被引量：8H指数：2
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- 相关机构：天津医科大学总医院天津医科大学天津医科大学代谢病医院更多>>
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- 人食管鳞癌细胞株中RIZ1基因启动子区甲基化状态的研究
- 2012年
- 目的:探讨6种人食管鳞癌细胞株KYSE150,KYSE510,TE13,EC9706,CaEs17和EC109中RIZ1基因启动子区的甲基化状态;观察特异性DNA甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR对存在甲基化的细胞株RIZ1基因的转录调控作用及其对该细胞生长增殖的影响。方法:甲基化特异PCR(MSP)法检测6种人食管鳞癌细胞株中RIZ1基因启动子区的甲基化状态;实时定量PCR法检测5-Aza-CdR处理前后RIZ1基因启动子区CpG岛高度甲基化的人食管鳞癌细胞株TE13中RIZ1 mRNA表达量的变化;MTT法检测5-Aza-CdR对TE13细胞生长增殖的影响。结果:(1)6种人食管鳞癌细胞株中TE13,CaEs17,EC109三株细胞RIZ1基因启动子区存在甲基化;(2)5-Aza-CdR处理细胞株TE13后,RIZ1 mRNA表达量上调;(3)5-Aza-CdR能抑制TE13的生长增殖,并随时间的延长和浓度的增加抑制作用变明显。结论:启动子区CpG岛高度甲基化是人食管鳞癌细胞株TE13 RIZ1基因表达沉默的重要原因;5-Aza-CdR能使TE13 RIZ1 mRNA表达上调;并能抑制TE13细胞的生长增殖,并呈时间和浓度依赖性。
- 崔元涛张鹏梁冬春董尚文王元国吕杨钟荣荣
- 关键词：启动子甲基化甲基化特异性聚合酶链反应
- 人食管癌细胞缺氧培养条件下HIF-1α和VEGF表达的研究
- 2010年
- 目的:探讨人低分化食管鳞癌细胞系EC-109、CaEs-17在缺氧条件下,缺氧诱导因子-1α及血管内皮生长因子随缺氧时间不同,在基因水平和蛋白水平上的表达。方法:1)体外培养人低分化食管鳞癌细胞系EC-109、CaEs-17,利用免疫荧光染色方法观察细胞在缺氧培养条件下HIF-1α和VEGF蛋白表达情况。2)提取总RNA,逆转录为cDNA,并进行实时PCR,观察细胞在不同缺氧时间,hif-1α及vegf基因表达峰度及相互关系。结果:1)EC-109、CaEs-17细胞在缺氧培养条件下HIF-1α、VEGF蛋白表达增加。2)EC-109、CaEs-17细胞在缺氧培养条件下hif-1α、vegf基因表达上调。3)EC-109、CaEs-17细胞在缺氧条件下vegf表达峰度上调滞后于hif-1α表达,自缺氧培养8h起,hif-1α基因表达峰度持续高于vegf基因表达。结论:缺氧环境是诱导人食管癌细胞缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子表达上调的因素之一,vegf基因表达滞后于hif-1α基因表达。
- 吕扬张鹏
- 关键词：缺氧诱导因子-1Α食管癌聚合酶链式反应
- PR结构域真核表达载体的构建
- 2012年
- 目的:构建能够稳定克隆、表达RIZ1基因中PR结构域的真核表达载体。方法:首先用RT-PCR方法从人食管组织中提取mRNA,逆转录为cDNA,利用cDNA模版扩增出PR结构域,连入T载体。然后提取PR结构域及pcDNA3.1(+)质粒,酶切后连接,转入Trans-T感受态细胞中。结果:提取pcDNA3.1/PR结构域质粒,琼脂糖凝胶电泳,可见大于5 000 bp的目的条带,与预测结果一致,测序结果正确。结论:构建PR结构域真核表达载体成功,为进一步实验研究PR结构域在食管癌细胞中的表达与功能奠定了基础。
- 陈渊张鹏王元国
- 关键词：食管癌RIZ1真核表达载体
- Twist基因联合p53 E-cadherin检测在食管癌中的意义被引量：4
- 2010年
- 目的:检测食管癌患者的癌组织、癌旁组织和正常食管组织中Twist、p53、E-cadherin蛋白表达水平,探讨Twist蛋白表达与食管癌临床病理参数的关系,并阐述Twist与p53、E-cadherin蛋白表达的相关性。方法:各选取30例食管癌组织和癌旁组织,同时选取10例良性食管疾病的正常食管组织,应用免疫组化和免疫印迹方法进行蛋白检测,实验结果应用SPSS 15.0统计软件包进行数据分析处理。结果:Twist、p53、E-cadherin蛋白表达水平在食管癌组织、癌旁组织和正常食管组织中有明显差异;在不同浸润深度、有无淋巴结转移、TNM分期及肿瘤分化程度不同的食管癌组织Twist蛋白表达具有明显差异;食管癌组织中Twist表达水平与p53、E-cadherin之间存在一定的相关性。结论:Twist可能通过调节ARF/p53途径抑制细胞凋亡促进肿瘤细胞形成,同时影响E-cadherin的表达而促进上皮一间质转化现象,参与食管癌的发生和转移,其可能成为食管癌诊断的分子生物学指标和分析食管癌患者病程以及判断疾病预后的特异性指标之一。
- 温昱鹏张鹏宋世辉商忠良王忠义刘毅梅
- 关键词：免疫组织化学食管癌上皮-间质转化
- 视网膜母细胞瘤蛋白结合锌指结构基因1真核表达质粒对人食管癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用被引量：1
- 2013年
- 食管癌是最常见的恶性肿瘤之一，其发病和死亡平均水平位于恶性肿瘤前列。目前，食管癌的治疗主要以手术切除、化疗为主，但这些治疗手段不能明显改善患者5年生存率，因此寻求新的食管癌的治疗方法尤为重要。近年来肿瘤的基因治疗成为人们关注的焦点，有关研究认为，视网膜母细胞瘤蛋白结合锌指结构基因1（RIZ1）其正常表达可导致细胞生长阻滞并诱导细胞凋亡，发挥抑癌基因的作用。我们通过建立人食管癌TE13细胞裸鼠移植瘤模型，采用瘤体内直接注射RIZ1真核表达质粒的方法，观察抑癌基因RIZ1对人食管癌细胞TE13裸鼠移植瘤生长的影响。
- 徐聪张鹏董尚文王元国李栋郭峰孙蓓
- 关键词：视网膜母细胞瘤真核表达质粒裸鼠移植瘤人食管癌结构基因蛋白结合
- 抑癌基因RIZ1的研究进展被引量：2
- 2011年
- 视网膜母细胞瘤蛋白结合锌指结构基因（retinoblastoma protein-interacting zinc finger gene,RIZ）是由Buyse等应用Rb探针在对可与Rb结合的蛋白质进行功能性筛选时分离出来的,RIZ基因由于转录起始位点的不同可表达RIZ1以及RIZ2两种蛋白质,RIZ1基因属于核组蛋白甲基转移酶超家族,是新近发现的肿瘤抑制基因。
- 崔元涛张鹏
- 关键词：RIZ1肿瘤抑癌基因
- 人食管鳞癌组织中RIZ1基因表达水平的研究被引量：1
- 2012年
- 目的:研究RIZ1基因mRNA及蛋白在人食管鳞癌中的表达。方法:以48例人食管鳞癌组织、相应癌旁及正常组织为研究对象,Real-time PCR法检测RIZ1基因mRNA表达情况;55例癌组织及相应正常组织采用免疫组织化学法检测RIZ1蛋白的表达情况。结果:统计结果显示人食管鳞癌组织中RIZ1 mRNA的表达量显著低于正常食管组织(P<0.01),癌旁组织中的表达量也显著低于正常食管组织(P<0.01),但癌组织与癌旁组织的表达量无显著性差异(P=0.067)。RIZ1蛋白在癌组织中阳性表达率为29.1%(16/55),在正常食管组织中阳性表达率为76.4%(42/55),差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:人食管鳞癌组织中RIZ1基因不仅在mRNA转录水平,而且在蛋白表达水平明显减低。提示RIZ1表达降低可能与食管鳞癌的发生有关,RIZ1在食管鳞癌的发生过程中起到抑制作用。RIZI可能是食管鳞癌的潜在抑制基因。
- 钟荣荣张鹏梁冬春董尚文王元国崔元涛王硕
- 关键词：RIZ1基因抑癌基因食管鳞癌免疫组织化学法
