基础研究重大项目前期研究专项([2001]50)
- 作品数：9 被引量：137H指数：7
- 相关作者：刘茹陈建锋王心如何俊宋玲更多>>
- 相关机构：南京医科大学江苏省人民医院南京大学更多>>
- 发文基金：基础研究重大项目前期研究专项国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 小鼠精母细胞钙通道特性及硝苯地平的作用被引量：7
- 2003年
- 目的 为了建立一个合理、客观评价药物或毒物对生殖系统影响的细胞模型 ,研究了机械分离、未经酶消化的小鼠精母细胞Ca2 + 通道特性及硝苯地平对其的作用。方法 采用全细胞膜片钳技术。结果阻断K+ 电流后 ,当钳制电位 -90mV、指令电压 -80～ +1 0mV、步阶电压 1 0mV时 ,记录到Ca2 +电流 ,二价无机阳离子对Ca2 + 电流的抑制作用Ni2 +>Cd2 + ,而L型Ca2 + 通道激动剂BayK8644对电流无任何影响。分析小鼠精母细胞上记录的Ca2 + 电流为T型Ca2 + 通道开放产生。L型Ca2 + 通道阻断剂硝苯地平对精母细胞Ca2 + 电流有明显的抑制作用 ,半数最大抑制浓度为 0 .3 9μmol·L-1,而且细胞外液冲洗恢复缓慢 ,这支持了二氢吡啶类药物可用于男性避孕。结论 机械分离。
- 张莉张习春高蓉肖杭
- 关键词：精母细胞膜片钳技术钙通道硝苯地平
- 苯甲酸雌二醇诱导小鼠尿道下裂动物模型的建立被引量：5
- 2007年
- 目的：建立苯甲酸雌二醇诱导的小鼠尿道下裂模型，为研究雌激素致尿道下裂的分子作用机制提供进一步研究的基础。方法：100只ICR孕小鼠随机分成A、B、C、D、E5组，每组20只，在孕12～16d连续5d各组每只皮下分别注射苯甲酸雌二醇0、0．2、1、5、25mg·kg^-1·d^-1，出生时观察仔鼠死亡率。每组取2只母鼠所生的雄性仔鼠，解剖观察仔鼠睾丸位置、前列腺发育情况。出生后4周，观察有无尿道下裂和隐睾。结果：A、B、C、D、E各组仔鼠死亡率分别为21．6％、21．5％、41．4％、56．6％、75．0％。新生鼠解剖，各组均未发现前列腺，C、D、E组睾丸均在下极，A、B组睾丸均在膀胱两侧。仔鼠尿道下裂发生率分别为0、0、3．3％（2／60）、20．0％（8／40）、23．0％（6／26），尿道下裂发生率D、E组与A组间差异有显著性（P〈0．05），而D、E组间差异无显著性（P〉0．05）；隐睾发生率分别为0、0、6．6％（4／60）、30．0％（18／60）、61．5％（16／26），隐睾发生率A、C组间差异无显著性（P〉0．05），D、E组与A组间差异有显著性（P〈0．05），而D、E组之间差异无显著性（P〉0．05）。结论：孕鼠注射大剂量的雌激素可以诱导出仔鼠尿道下裂的模型，C组诱导率较低，D、E组诱导率接近，但是E组母鼠及其仔鼠死亡率均较高，因此5mg·kg^-1·d^-1苯甲酸雌二醇用药量为小鼠尿道下裂造模的适宜剂量。
- 贺厚光张炜吴天麟眭元庚
- 关键词：尿道下裂雌激素动物模型小鼠
- 氰戊菊酯对卵巢细胞、组织钙稳态和激素水平的影响被引量：21
- 2004年
- 目的 观察氰戊菊酯对卵巢颗粒细胞钙稳态、卵巢组织钙稳态相关酶及血清类固醇激素水平的影响。方法 用激光共聚焦显微镜、放射免疫法和定磷比色法、酶免疫法等技术测定氰戊菊酯对人卵巢颗粒黄体细胞钙稳态和 30d染毒大鼠卵巢组织Ca2 + ATP酶、磷酸化酶a(P a)活性、钙调素含量和血清雌二醇、孕酮水平。结果 氰戊菊酯浓度为 2 0 0和 2 0 μmol/L时 ,可见人卵巢颗粒黄体细胞内游离Ca2 + 浓度缓慢上升 ,外钙内流为胞内钙升高的主要来源。染毒大鼠Ca2 + ATP酶活性总体趋势下降 ,对照组为 (10 3 9± 10 5 7) μmol磷·g蛋白 -1·h-1,1/ 2 5 0LD50 为 (80 6± 5 11) μmol磷·g蛋白 -1·h-1;P a活性增高 ,均显著高于对照组 ;钙调素含量升高 ,动情期显著升高 ,对照组为 (35 7± 2 32 ) μg/L ,1/ 2 5 0LD50 为 (90 5± 30 8) μg/L ,1/ 15LD50 为 (110 6± 36 7) μg/L ;血清雌二醇水平上升 ,对照组为 (0 2 6± 0 13)nmol/L ,1/ 2 5 0LD50 为 (0 4 1± 0 19)nmol/L ;孕酮水平下降 ,对照组为 (7 0 5± 5 6 7)nmol/L ,1/ 15LD50 为 (3 35± 1 14 )nmol/L。结论 氰戊菊酯干扰卵巢颗粒细胞内钙稳态 ,影响体内激素水平 ,钙信号通路可能为其影响机制之一。
- 何俊陈建锋刘茹王玉邦王心如
- 关键词：氰戊菊酯卵巢细胞激素酶免疫法急性中毒
- 氯代酚和烷基酚类化合物对斑马鱼胚胎发育影响的研究被引量：46
- 2004年
- 为研究氯代酚和烷基酚类化合物的毒性 ,采用斑马鱼胚胎发育技术 ,观察这两类化合物对不同发育阶段斑马鱼卵的影响。结果显示 ,在受精卵产出后立即染毒 ,胚胎对这些化合物最敏感的毒理学终点分别为 :五氯酚—— 48h心律、色素和水肿的 EC50 值均为 0 .2 mg/L;对 -壬基酚—— 72 h孵化 EC50 为 0 .5 mg/L;对 -辛基酚—— 72 h畸形 EC50 为 0 .5 mg/L;对 -氯酚—— 48h色素 EC50 为 1.5 mg/L;染毒时刻的不同对胚胎所造成的毒性效应也不同。几种氯代酚和烷基酚对发育 2 4h胚胎染毒 ,五氯酚毒性最大 ,对 -辛基酚和对 -壬基酚次之 ,对 -氯酚毒性最小。研究表明 ,该类化合物对斑马鱼胚胎发育均有明显抑制作用 ,可以造成胚胎发育畸形甚至死亡 。
- 刘红玲周宇许妍于红霞
- 关键词：环境毒理学氯代酚烷基酚斑马鱼毒性效应
- 邻苯二甲酸二丁酯对大鼠精子运动能力及氧化应激的影响被引量：20
- 2004年
- 目的 :探讨邻苯二甲酸二丁酯 (DBP)对大鼠睾丸抗氧化系统和精子运动能力的影响。 方法 :将 6周龄雄性SD大鼠随机分成 0 (对照组 )、2 5 0、5 0 0、10 0 0mg/(kg·d) 4组 ,每组 8只 ,灌胃给予DBP ,共染毒 4周。用计算机辅助精子分析系统 (CASA)观察附睾尾部精子运动速度参数 :曲线运动速度 (VCL)、直线运动速度 (VSL)、平均路径速度 (VAP)、鞭打频率 (BCF)和精子运动方式参数 :精子头侧摆幅度 (ALH)、直线性 (LIN)、平均移动角度 (MAD)、前向性 (STR)的变化。用分光光度法测定血清和睾丸匀浆中超氧化物歧化酶 (SOD)活力和丙二醛 (MDA)含量 ,同时观察每日体重增加量及肝、睾丸、附睾等脏器系数的变化。 结果 :染毒后肝脏器系数显著上升 ,各剂量组与对照组相比差异均有显著性 (P <0 .0 1) ;睾丸脏器系数下降 ,10 0 0mg/(kg·d)组与对照组相比P <0 .0 1;VCL、ALH随染毒剂量的增加呈下降趋势 ,10 0 0mg/(kg·d)组与对照组相比差异均有显著性 (P <0 .0 5 ) ;睾丸匀浆SOD活力降低 ,10 0 0mg/(kg·d)组与对照组相比差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;其他指标的改变差异无显著性。 结论 :DBP可引起大鼠睾丸精子运动能力和抗氧化能力的下降。睾丸是DBP毒作用的主要靶器官之一。
- 王玉邦宋玲陈建锋何俊刘茹朱正平王心如
- 关键词：邻苯二甲酸二丁酯精子计算机辅助精子分析氧化应激
- 辛硫磷对大鼠卵巢抗氧化系统功能的影响被引量：14
- 2004年
- [目的 ]研究辛硫磷 (phoxim ,pho)对大鼠卵巢抗氧化系统功能的影响。 [方法 ]雌性SD大鼠经口染毒农药辛硫磷 ,剂量为 5 .88、2 9.4和 98.0mg·kg-1,对照组给予等量色拉油。阴道脱落细胞涂片法观察动情周期变化 ,连续染毒 3 0d后处死 ,分离卵巢、子宫、脑、肝、脾、肾、肾上腺等脏器 ,计算脏器系数 ;分光光度法测定大鼠卵巢组织和血清中的超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽硫转移酶 (GST)的活性以及丙二醛 (MDA)、谷胱甘肽 (GSH)的含量 ;提取卵巢组织的DNA ,进行琼脂糖凝胶电泳 ,观察DNA完整性 ;免疫组化SP法观察bcl 2蛋白在卵巢组织中的表达。 [结果 ]各染毒组大鼠的动情周期异常率均高于对照组 ,体重增长均低于对照组 ,其中高剂量组与对照组相比差异具有显著性 ;各染毒组大鼠的卵巢、子宫重量均显著降低 ,卵巢中的SOD、GST和GSH水平均增高 ,MDA含量降低 ,血清中SOD、GST水平显著降低 ,MDA含量升高 ;卵巢bcl 2蛋白表达增强 ,低剂量组与对照组比较差别有显著性。 [结论 ]在 5 .88、2 9.4和 98.0mg·kg-1剂量下 ,辛硫磷对卵巢功能可产生一定影响 ,可使卵巢的抗氧化能力代偿性增强 ,但未对卵巢的抗氧化系统功能造成损伤。
- 刘茹陈建锋何俊宋玲王心如
- 关键词：辛硫磷卵巢抗氧化系统动情周期BEL-2
- 小鼠尿道下裂动物模型的建立被引量：14
- 2004年
- 目的 :采用抗雄激素类药物氟他胺诱导建立小鼠尿道下裂动物模型 ,为进一步研究尿道下裂发病的分子作用机制和治疗提供理论和试验依据。 方法 :80只 6～ 8周龄ICR孕小鼠 ,体重 2 8～ 30 g ,随机分成 4组 ,每组 2 0只。在孕 12～ 16d时连续 5d皮下分别注射氟他胺 0 (A组 )、2 5 (B组 )、5 0 (C组 )、10 0 (D组 )mg·kg-1·d-1,出生后每组 2只母鼠的雄性仔鼠解剖观察睾丸位置、前列腺发育情况 ,出生后 4周观察有无尿道下裂、隐睾和前列腺发育情况。 结果 :A～D组子一代尿道下裂发生率分别为 0、4 4 .2 %、92 .7%、10 0 % ;隐睾发生率分别为 0、4 .8%、2 3.2 %、32 .4 %。C和D组前列腺均不发育 ,B、C和D组肛门至尿生殖结的距离均缩短。 结论 :用氟他胺可以诱导出稳定的雄性小鼠尿道下裂模型 ,适宜推广。
- 贺厚光张炜朱佳庚
- 关键词：动物模型尿道下裂氟他胺小鼠
- 邻苯二甲酸二丁酯对大鼠睾丸生化酶及脂质过氧化的影响被引量：12
- 2004年
- 目的 :探讨邻苯二甲酸二丁酯 (DBP)对睾丸生化酶及脂质过氧化的影响 ,为接触人群早期诊断及生物学监测提供参考评价指标。 方法 :选择 6周龄雄性SD大鼠随机分成 4组 ,每组 16只。灌胃给予DBP ,剂量为 0 (对照组 )、2 5 0、5 0 0、10 0 0mg/ (kg·d)。于染毒 2周和 4周末分别处死 8只大鼠 ,收集睾丸及其他脏器和血清 ,以 1∶3的比例制备睾丸匀浆。测定血清和睾丸匀浆中生化酶及谷胱甘肽过氧化物酶 (GSHPx)的活性和谷胱甘肽 (GSH)的含量。 结果 :随DBP染毒剂量的增加 ,肝脏器系数明显上升 ,而睾丸脏器系数显著下降 (P <0 .0 1)。染毒 2周后 ,血清中GSHPx活性和睾丸匀浆中GSH水平下降趋势明显 ,而匀浆中GSHPx活性呈上升趋势 ,10 0 0mg/ (kg·d) 组与对照组相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。染毒 4周后 ,血清中碱性磷酸酶活性呈上升趋势 ,血清和睾丸匀浆中山梨醇脱氢酶 (SDH )活性受到明显抑制 ,10 0 0mg/ (kg·d) 组与对照组相比差异均有显著性 (P <0 .0 1)。血清GSH水平呈上升趋势 ,10 0 0mg/ (kg·d) 组与对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。 结论 :DBP可对机体产生明显的毒性作用 ,主要靶器官为肝脏和睾丸。脂质过氧化可能是DBP毒性作用的机制之一 ,SDH是DBP对睾丸毒性作用较为敏感的指标之一。
- 王玉邦宋玲朱正平陈建锋何俊刘茹王心如
- 关键词：邻苯二甲酸二丁酯碱性磷酸酶谷胱甘肽睾丸
- 黄土高原沟壑区原状土壤氮素迁移被引量：1
- 2010年
- 以中国生态系统研究网络CERN长武王东沟实验站的坡耕地和塬耕地为供试土壤,研究了黄土高原沟壑塬区旱耕地原状土壤氮素迁移和时空变异。结果表明：耕作土壤NO3--N为23.1－33.8 mg/kg,NH4＋-N为0.23－0.50mg/kg,DOC为9.17－13.38 mg/kg,P为0.18－0.23 mg/kg;坡耕地和塬耕地的NO3--N和NH4＋-N主要集中在0－20 cm的上层土壤,中下层土壤NO3--N和NH4＋-N起源于上层淋溶迁移和累积;高含量时养分淋溶溶出呈指数衰减型;NO3--N、NH4＋-N、DOC向下层的迁移塬耕地慢于坡耕地。
- 杨毓峰李世清
- 关键词：氮素迁移坡耕地黄土高原沟壑区
