国家自然科学基金(31071734)
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
- 相关作者：王超许小霞王爽张文庆金丰良更多>>
- 相关机构：华南农业大学中山大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 斜纹夜蛾抗菌肽基因Moricin和Cecropin时空表达模式及微生物敏感性的分析被引量：1
- 2012年
- 抗菌肽是一类具有广谱抗菌活性的小分子多肽,包括抗细菌、病毒和真菌。本研究以斜纹夜蛾Spodoptera litura(Fabricius)为研究对象,利用Real-timePCR和半定量RT-PCR检测了其体内两个重要抗菌肽基因Cecropin和Moricin的时空表达模式及其对微生物的敏感性。Real-timePCR检测结果表明,抗菌肽基因Cecropin和Moricin在斜纹夜蛾各个龄期(1,2,3,4,5和6龄幼虫、蛹、成虫)都有表达,随着龄期的增长,表达量逐渐增加,6龄幼虫中表达量达到最高。半定量RT-PCR检测表明,抗菌肽基因Cecropin和Moricin在7个不同组织(气管、卵巢、马氏管、体壁、中肠、脂肪体和血细胞)中都有表达,Cecropin在脂肪体中表达量最高,而Moricin在血细胞中表达量相对较高;RT-PCR检测表明,Cecropin和Moricin的表达在大肠杆菌Escherichia coli诱导后迅速上升,其中诱导后8h达到高峰期,一直持续到48h。不同病原微生物(大肠杆菌E.coli、金黄色葡萄球菌Staphyloccocus aureus和白僵菌Beauveria bassiana)分别诱导后,Real-timePCR检测表明,斜纹夜蛾抗菌肽基因Cecropin和Moricin对大肠杆菌的刺激最为敏感。本研究结果为进一步研究斜纹夜蛾抗菌肽基因Cecropin和Moricin的功能奠定基础。
- 许小霞王爽张文庆孙强王超金丰良
- 关键词：斜纹夜蛾抗菌肽CECROPIN
- An integrated analysis of miRNA and mRNA of Plutella xylostella to infection with the entomopathogenic fungi Isaria fumosorosea Wize
- ＜正＞Background:The entomopathogenic fungi represent a threat to the diamondback moth（DBM）,Plutella xylostella（L...
- Xiaoxia XuShuang WangZhihua ZhengPeng LiHongzhi XuWanjun HuangFengliang Jin
- 文献传递
- Molecular cloning and characterization of Sptzle from Plutella xylostella
- ＜正＞The cytokine Sptzle（Spz）,as a extracellular dimeric ligand,binds to the Toll receptor and activates the Tol...
- Shuang WangZhihua ZhengXiaoxia XuPeng LiHongzhi XuFengliang Jin
- 文献传递
- Isolation and analysis of an antifungal moricin-like peptdie from Plutella xylostella
- ＜正＞It is particularly interesting that to date the moricin-like peptides have only been found in the Lepidopte...
- Xiaoxia XuPeng LiHongzhi XuWanjun HuangZhihua ZhengShuang WangFengliang Jin
- 文献传递
- Dynamic Analysis of microRNAs and m RNAs Response to Bacillus thuringiensis in Plutella xylostella
- ＜正＞Diamondback moth（DBM）,Plutella xylostella（L.）is a worldwide pest of cruciferous crops（Brassiaceae）,and buil...
- Jing YuXiao-Xia XuYan-Fu GaoLi-Na OuyangYu-Qing ZhangWen-Yan JuFeng-Liang Jin
- 文献传递
- 小菜蛾C型凝集素基因PxCTL5的克隆及其在细菌刺激下的转录水平变化被引量：5
- 2017年
- 【目的】本研究旨在克隆小菜蛾Plutella xylostella体内一种C型凝集素基因,检测其在小菜蛾体内的表达模式,并探讨该蛋白对细菌的凝集作用。【方法】基于对小菜蛾转录组和基因组进行生物信息学分析的基础上,RT-PCR结合RACE技术克隆小菜蛾C型凝集素基因全长cDNA序列。构建原核表达质粒载体,在大肠杆菌BL21中高效表达小菜蛾C型凝集素融合蛋白,利用纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔,获得了高效价的抗血清。利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测小菜蛾C型凝集素基因在小菜蛾不同发育时期(卵期、1-4龄幼虫、预蛹期、蛹期和成虫期)和小菜蛾4龄第1天幼虫不同组织(血细胞、表皮、脂肪体、中肠和马氏管)中的表达模式。RT-qPCR和Western blot检测小菜蛾C型凝集素基因在大肠杆菌和苏云金芽孢杆菌刺激下的表达差异。显微镜下观察重组蛋白对这两种细菌的体外凝集现象。【结果】克隆了小菜蛾型C型凝集素基因PxCTL5(GenBank登录号:KY807084),cDNA序列全长1 243 bp,开放阅读框(ORF)序列长672bp,编码223个氨基酸残基。RT-qPCR显示PxCTL5基因在小菜蛾各个龄期均有表达,在成虫期处于高水平表达;主要在表皮中表达,可被苏云金芽孢杆菌和大肠杆菌强烈诱导表达,表达高峰期分别为诱导后18 h和24 h。Western blot检测表明,经苏云金芽孢杆菌和大肠杆菌诱导后,小菜蛾血淋巴中PxCTL5蛋白表达量明显提高。体外凝集实验表明,在钙离子存在下,PxCTL5蛋白对两种细菌都有一定的凝集作用,对苏云金芽孢杆菌的凝集作用较强。【结论】小菜蛾PxCTL5可经细菌诱导表达,PxCTL5对苏云金芽孢杆菌有较强凝集作用。
- 余静许小霞高延富金丰良
- 关键词：小菜蛾C型凝集素基因克隆免疫应答
- Molecular cloning and characterization of a short peptidoglycan recognition protein （PGRP-SA） from Plutella xylostella
- ＜正＞Peptidoglycan recognition proteins（PGRPs）are pattern recognition molecules of the innate immune system that...
- Zhihua ZhengXiaoxia XuShuang WangPeng LiHongzhi XuFengliang Jin
- 文献传递
