黑龙江省教育厅科学技术研究项目(11551377)
- 作品数：3 被引量：12H指数：3
- 相关作者：赵凯王歆李秀凉刘丹肖野更多>>
- 相关机构：黑龙江大学黑龙江省农业科学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省教育厅科学技术研究项目黑龙江省普通高等学校新世纪优秀人才培养计划哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 高产紫杉醇菌株的诱变选育及其差异表达基因消减cDNA文库的构建被引量：7
- 2011年
- 【目的】选育高产紫杉醇菌株,并构建选育到的高产紫杉醇菌株与出发菌株HD1-3差异表达的cDNA消减文库。【方法】分别采用硫酸二乙酯和紫外线与硫酸二乙酯复合诱变处理菌株HD1-3孢子;以选育到的高产紫杉醇菌株为tester,菌株HD1-3为driver,应用抑制性消减杂交技术构建选育到的高产紫杉醇菌株与菌株HD1-3差异表达的cDNA消减文库。【结果】试验确定的Nodulisporium sylviforme紫杉醇产生菌HD1-3孢子复合诱变的适宜条件为:将106 cfu/mL孢子悬液经过8%硫酸二乙酯处理15 min后,在电磁搅拌下,用紫外灯(30 w,距离30 cm)照射处理45 s,获得了1株遗传性状稳定、高产紫杉醇的突变株——UD14-11,其紫杉醇产量从出发菌株HD1-3的232.73±4.61μg/L提高至312.81±7.51μg/L;构建的文库滴度为1.2×107 cfu/mL,阳性克隆率75.3%,片段大小主要集中在300 bp-1.0 kb。【结论】选育到了1株遗传性状稳定、高产紫杉醇突变株;成功地构建了高产紫杉醇菌株UD14-11与菌株HD1-3差异表达的cDNA消减文库,为寻找、分离微生物生物合成紫杉醇相关基因和利用基因工程或代谢工程手段定向设计改造菌株奠定基础。
- 赵凯孙立新王旋李秀凉王歆周东坡
- 关键词：紫杉醇内生真菌诱变育种抑制性消减杂交CDNA文库
- 紫杉醇诱导凋亡的信号传导通路及与凋亡相关的基因和蛋白被引量：3
- 2013年
- 紫杉醇对临床多种恶性肿瘤都有疗效,并具广阔的市场应用前景,其抗癌机制是致使肿瘤细胞发生细胞周期阻滞而凋亡。作者结合课题组多年来的研究,对紫杉醇诱导凋亡过程中的信号通路、相关基因及蛋白进行介绍,包括微生物发酵生产紫杉醇的基因、细胞周期蛋白、端粒酶等。
- 刘丹康宏孙传真肖野赵凯
- 关键词：紫杉醇信号传导凋亡基因
- 东北红豆杉细胞GGPPS基因cDNA的克隆被引量：3
- 2012年
- 牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶是红豆杉细胞紫杉醇生物合成途径中的关键酶。试验采用RT-PCR技术从东北红豆杉中克隆GGPPS基因片段,将GGPPS基因片段与pMD20-Tvector连接,转化E.coli DH5α,对阳性克隆进行序列测定。生物信息学分析结果表明,获得GGPPS基因片段长度为371 bp,与GenBank中收录的GGPPS同源性达到99%。为从内生真菌紫杉醇生物合成途径中克隆关键酶基因和高产紫杉醇基因工程菌株的构建提供了借鉴。
- 王歆肖野刘丹李秀凉赵凯
- 关键词：红豆杉紫杉醇
