国家自然科学基金(30070934)
- 作品数：10 被引量：71H指数：6
- 相关作者：李双杰王佐杨永宗陈瑞珍张宝林更多>>
- 相关机构：南华大学复旦大学中南大学更多>>
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- 核因子-κB活化在小鼠CVB_3病毒性心肌炎的病理作用机制研究被引量：2
- 2008年
- 目的观察Balb/c小鼠CVB3病毒性心肌炎心肌组织核因子-κB活化的动态变化并探索其病理机制。方法采用CVB3感染Balb/c小鼠,分别于感染后2h、第3、7、14、21天取其心肌,采用凝胶滞留分析法检测NF-κB活性、TUNELassay检测心肌组织细胞凋亡,测定心肌组织Caspase3酶活性。结果小鼠感染CVB3后NF-κB迅速活化,并呈持续性活化状态,主要是P65-P50二聚体活化。TUNEL检测细胞凋亡发现病毒感染第7天病灶内炎症细胞凋亡,至第15、21天心肌细胞凋亡。Caspase3酶活性在病毒感染后第7天开始升高,第14、21天明显升高。结论NF-κB活化在病毒性心肌疾病的病理机制中,对炎症反应与细胞凋亡的调控均起重要作用。
- 钟飞李双杰王佐陈瑞珍杨美珍
- 关键词：柯萨奇病毒B组核因子-ΚBBALB/C小鼠
- 苦瓜素对小鼠柯萨奇B_3病毒性心肌炎的治疗作用被引量：7
- 2004年
- 病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)是常见的获得性心肌疾病之一,近年来发病率逐年上升,成为青少年猝死的重要原因,严重危害人类健康,但目前尚无有效的抗病毒药物治疗.苦瓜为葫芦科属植物苦瓜Momordica charantia L.的果实,已有数百年的药食两用史.最近国内外学者从苦瓜果肉、种仁中分离纯化出多种有效成分,发现有明显的抗病毒、抗肿瘤、调节免疫等多种功效,具有很高的药用价值[1].笔者从苦瓜果肉中分离纯化一种相对分子质量为2.8×104的蛋白质有效成分,称之为苦瓜素(momordicin),在体外有明显的抗亲心性柯萨奇B3病毒(coXsickievirus B3,CVB3)的作用[2],本实验观察苦瓜素治疗实验性小鼠CVB3病毒性心肌炎的疗效.
- 李双杰王佐张召才陈瑞珍杨英珍陈灏珠葛均波
- 关键词：苦瓜素小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎
- 核因子κB在BALB/C小鼠柯萨奇B3型病毒性心肌炎中被活化
- ＜正＞柯萨奇B3型病毒（coxsackievirus B3,CVB3）是引起心肌炎的主要病毒,而核因子κB可被病毒、炎性介质等激活而从胞浆进入细胞核中,调控炎症、免疫反应以及细胞的增殖和凋亡相关基因的表达。核因子κB是多...
- 王佐李双杰杨英珍杨永宗
- 关键词：核因子КBBALB/C小鼠
- 文献传递
- 苦瓜蛋白的分离纯化及其体外抗CoxB3型病毒作用的研究被引量：16
- 2002年
- 目的 探讨苦瓜蛋白的分离纯化方法 ,研究其体外抗病毒作用 ,为开发这一新型抗病毒药物打下前期工作基础。方法 离心、超滤、阳离子交换色谱、反相高效液相色谱等分离纯化方法 ,体外抗病毒实验方法。结果 得到了色谱纯的抗 3型科萨奇病毒的苦瓜蛋白 ,其抗病毒作用有明显的剂量 -效应关系 ,在浓度为 2 1 5 μg mL时具有最大的抗病毒作用 ,与对照组相比 ,苦瓜蛋白对CoxB3感染的HepG2的保护作用十分明显。结论 体外抗病毒实验表明一定范围内的苦瓜蛋白对CoxB3感染的HepG2有明显的保护作用。
- 王佐李双杰杨永宗
- 关键词：分离纯化苦瓜蛋白病毒性心肌炎药理
- 苦瓜蛋白对BALB/C小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎核因子κB的调节作用被引量：20
- 2002年
- 为探讨苦瓜蛋白对BALB C小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎的治疗作用机制 ,以核因子κB为对象 ,来观察苦瓜蛋白的调节作用。从苦瓜果肉中提取苦瓜蛋白后 ,将动物分为 5组 :病毒对照组、正常对照组、药物对照组、高剂量治疗组、低剂量治疗组 ,分别在实验的第 0d、3d、7d、14d和第 2 1d处死动物 ,提取核蛋白 ,在用BCA方法进行蛋白定量后作凝胶滞留分析 (EMSA) ,测定核因子κB的活性 ,并进行比较分析。结果发现 ,①病毒对照组在第 2 1天时仍然有一定量的核因子κB活化 ,且其活化程度明显高于正常对照组 ;②高、低剂量的苦瓜蛋白对核因子κB表现出不同程度的抑制作用 ,其中高剂量组核因子κB几乎看不到活化 ,低剂量组比病毒对照组核因子κB活化程度明显降低 ;③正常对照组和药物对照组核因子κB只有低水平活化。结果提示 。
- 王佐李双杰杨永宗
- 关键词：苦瓜蛋白病毒性心肌炎核因子ΚB
- 病毒性心脏病细胞凋亡与纤维化的研究被引量：9
- 2005年
- 目的:观察心肌细胞凋亡与纤维化在小鼠CVB3慢性病毒性心肌炎(VMC)转化为扩张型心肌病 (DCM)病理机制中的作用。方法:4周龄、雄性Balb/c小鼠反复感染CVB3(Nancy株),建立慢性VMC与DCM 模型,分别于病毒感染后1、3、6、9个月处死小鼠,进行心肌苏木精 伊红、VG染色,检测细胞凋亡及凋亡指数、心 肌组织caspase3活性与血清胶原前肽(PⅠNP、PⅠCP、PⅢNP)。结果:病毒感染后1、3个月心肌病理符合慢性 VMC病理特征,6、9个月后符合DCM病理特征;TUNEL检测发现,病毒感染后1、3个月细胞凋亡发生在病变 部位与周围,6、9个月细胞凋亡则呈现散在性分布;细胞凋亡指数与心肌组织caspase3活性则随病程的迁延而 呈增高趋势;VG染色发现病毒感染后1、3个月病灶内及周围组织纤维化变化,而6、9个月则呈现出弥漫性纤维 组织增生,心肌胶原容积较正常对照组明显增加(P<0.01);血清PⅠCP与PⅢNP较正常对照组显著增加(P <0.01),但PⅠNP则变化不明显(P>0.05)。结论:细胞凋亡与心肌纤维化是小鼠CVB3病毒性心脏病由 VMC向DCM转化的重要病理机制。
- 李双杰张召才陈瑞珍杨英珍陈灏珠葛均波
- 关键词：心肌炎病毒细胞凋亡纤维化
- 苦瓜蛋白通过阻止核因子κB核转位抑制炎性因子生成被引量：9
- 2013年
- 目的研究苦瓜蛋白对载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠炎症因子核因子κB(NF-κB)蛋白核转位的影响,探讨苦瓜蛋白抗炎的分子机制。方法 40只6周龄雄性ApoE-/-小鼠,随机分为普食组、高脂高胆固醇组、高脂高胆固醇苦瓜蛋白组、普食苦瓜蛋白组。12周后眼球采血,ELISA测定血浆中炎性因子NF-κB、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6和γ干扰素(IFN-γ)及抗炎因子IL-10的水平,免疫组织化学检测主动脉壁IκB表达,RT-PCR和Western blot检测NF-κB和IκB表达。结果 ApoE-/-小鼠经高脂高胆固醇饲料喂养12周后,血液中炎症因子NF-κB、IL-1β、TNF-α、IL-6、IFN-γ水平均显著高于普食组(P<0.01,n=5),但抗炎因子IL-10仍维持较高水平。经苦瓜蛋白干预后,血清中炎症因子水平下降,而抗炎因子IL-10水平并不上升。RT-PCR以及Western blot检测结果表明,苦瓜蛋白显著降低高脂高胆固醇饲料喂养小鼠动脉血管壁细胞核内NF-κB蛋白水平,阻止其核转位。与普食组比较,高脂高胆固醇组IκB被显著降解(0.19±0.05比0.74±0.15,P<0.05,n=5),但其经苦瓜蛋白干预后,这种降解作用得到显著的抑制(0.19±0.05比0.36±0.07,P<0.01,n=5)。结论苦瓜蛋白通过减少IκB降解抑制NF-κB蛋白核转位而发挥抑制炎性因子生成的作用。
- 黄贤生王仁马小峰陈娜平张凯王佐
- 关键词：苦瓜蛋白载脂蛋白E基因敲除小鼠核因子ΚBIΚB
- 苦瓜素对柯萨奇B_3病毒核糖核酸的作用及其机制被引量：11
- 2004年
- 目的 观察苦瓜素对急性柯萨奇B3 病毒 (CVB3 )心肌炎心肌中CVB3 RNA量的影响 ,并对苦瓜素的抗病毒机制及其与干扰素 (INF)的关系进行探讨。方法 以CVB3 感染Balb/C小鼠建立病毒性心肌炎实验模型 ,随机分为苦瓜素处理组和生理盐水对照组 ,同时设立正常小鼠对照组。用定量逆转录聚合酶链反应技术(RT PCR)检测心肌组织中CVB3 RNA量 ,酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测小鼠血浆INF α及INF γ含量。结果 苦瓜素处理组心肌中CVB3 RNA量明显低于生理盐水对照组 ,两者比较有显著差异 (t =5 .14 6 8 P =0 .0 0 0 9) ;生理盐水对照组INF α水平较正常小鼠对照组低 ,两者有显著差异 (P <0 .0 1) ,INF γ较正常稍高 ,但两者无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;苦瓜素处理组两种INF水平均升高 ,与生理盐水对照组比较 ,INF α水平两者显著性差异 (P <0 .0 1) ,但INF γ水平两组无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;心肌组织中CVB3 RNA量与血浆INF α具有明显负相关 (r=- 0 .8390 P =0 .0 0 2 4 ) ,而与INF γ相关性不明显 (r =- 0 .6 0 5 9 P =0 .0 6 34)。结论 苦瓜素抑制CVB3 RNA复制 ,为一种有效的抗CVB3 药物 ,抗病毒作用与诱生干扰素 ,尤其是与INF
- 李双杰王佐邓晖万腊香吴孟津张宝林
- 关键词：苦瓜素心肌炎病毒性干扰素
- 苦瓜素对柯萨奇B_3病毒所致病毒性心肌炎小鼠肿瘤坏死因子-α表达的影响被引量：6
- 2008年
- 目的观察苦瓜素对柯萨奇B3病毒(CVB3)所致病毒性心肌炎大鼠心肌组织TNF-α水平、基因转录及相应蛋白质表达的影响,探索苦瓜素治疗病毒性心肌炎的药理机制。方法50只Balb/c实验小鼠随机分为苦瓜素治疗组(20只)、病毒感染空白对照组(20只)、正常对照组(10只)。苦瓜素治疗组与病毒感染空白对照组分别予腹腔注射0.1mL内含1×105TCID50的PRIM1640液,而正常对照组予腹腔注射同等体积培养液。苦瓜素剂量为25mg/(kg.d),1次/d,疗程7d。第15天取小鼠心肌采用ELISA进行TNF-α测定,HE染色行心肌病理检查,RT-PCR检测TNF-αmRNA转录水平,免疫组织化学测定TNF-α蛋白表达。结果与病毒感染空白组比较,苦瓜素治疗组小鼠心肌病理积分明显减少[(3.26±0.84)vs(1.56±0.48),t=3.90P<0.01],大鼠心肌组织TNF-α水平明显降低[(85.6±16.7)vs(34.5±10.3),t=5.24P<0.01],大鼠TNF-αmRNA转录水平亦显著减少[(0.09±0.02)vs(0.41±0.06),t=7.37P<0.01]。结论苦瓜素通过抑制TNF-α基因转录与蛋白质表达、降低心肌TNF-α水平,对Balb/c小鼠CVB3致病毒性心肌炎具有明显的治疗作用。
- 田红李小鸣李双杰
- 关键词：苦瓜素心肌炎病毒肿瘤坏死因子-Α小鼠
- 苦瓜蛋白对柯萨奇B3病毒性心肌炎小鼠半胱天冬酶3活性及凋亡的抑制作用被引量：4
- 2003年
- 为研究苦瓜蛋白对凋亡的关键酶半胱天冬酶 3及凋亡的调节作用 ,用已经建立起来的方法从苦瓜果肉中提取苦瓜蛋白。将BALB/C小鼠分为 4组 :病毒对照组、正常对照组、药物对照组和药物治疗组 ,分别在第 0天、第 3天、第 7天和第 14天各处死 5只小鼠 ,第 2 1天全部处死动物 ,心肌组织半胱天冬酶 3活性测定按照CAL BIOCHEM公司的试剂说明书进行 ,并稍加改正 ,凋亡鉴定按照Oncogene公司的TdT DNA裂解片断末端原位标记试剂说明书进行。结果发现 ,①病毒对照组第 7天开始出现半胱天冬酶 3活性 (0 .6 3± 0 .2 1pmol/min ,n =5 ) ,第 14天的活性 (10 .9± 1.5pmol/min ,n =5 )显著高于第 7天 ,第 2 1天的活性 (12 .6± 1.3pmol/min ,n =5 )又高于第 14天。②药物治疗组 ,只有一个第 2 1天的标本有半胱天冬酶 3活性 (0 .4 1pmol/min) ,其它两组均未检测到此酶的活性。③DNA裂解片断末端原位标记法发现 ,病毒对照组在第 7天心肌中有少数细胞凋亡 ,第 14天、第 2 1天凋亡细胞明显增多 ,在非病变区域可发现单个凋亡的心肌细胞。治疗组未发现凋亡细胞 ,其它两组也未发现凋亡细胞。结果提示 ,CVB3病毒性心肌炎中发现有明显的凋亡现象 ,凋亡和半胱天冬酶 3发现于第 7天 ,且随着时间增加而逐渐加重(增强 ) ;苦瓜蛋白可显?
- 王佐李双杰杨永宗
- 关键词：半胱天冬酶3心肌细胞凋亡苦瓜蛋白
