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水解-液相色谱-同位素稀释质谱法测定人绒毛促性腺激素的质量分数: 本文建立了水解-液相色谱-同位素稀释质谱法准确测定人绒毛促性腺激素(h CG)质量分数的方法,在h CG水解定量实验中优化了人绒毛促性腺激素的完全水解时间。水解后的样品经高效液相色谱分离,采用串联质谱检测,以多离子监测模...; 黄挺张晓光宋德伟武利庆全灿李红梅杨屹; 关键词：人绒毛促性腺激素高效液相色谱苯丙氨酸脯氨酸缬氨酸; 文献传递

瘦素减轻6-羟基多巴胺诱导的SH-SY5Y细胞损伤被引量：1: 2014年; 目的探讨瘦素对6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)所诱导的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)凋亡的抑制作用。方法建立6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞损伤模型,用瘦素进行干预,采用倒置显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞活性,LDH法检测细胞损伤,台盼蓝检测细胞死亡率,流式细胞术检测细胞凋亡率,并用免疫荧光检测active caspase-3的荧光强度,Western blot检测Bcl-2和Bax的表达水平。结果成功建立了6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞损伤模型。在模型的基础上,瘦素干预后,细胞凋亡率降低约15%,细胞存活率提高约14%,细胞损伤降低率和死亡率,active caspase-3的浓度下降,Bcl-2/Bax的比值显著提高(P<0.05)。结论瘦素对6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有一定的抑制作用,这对瘦素可能参与帕金森病的保护作用提供了证据。; 韩铭邓子辉薛辉李永明颜光涛; 关键词：6-羟基多巴胺细胞损伤瘦素

同位素稀释-激光剥蚀-电感耦合等离子体质谱法测定生物组织样品中铁元素的含量被引量：12: 2014年; 针对目前采用同位素稀释-激光剥蚀-电感耦合等离子体质谱(ID-LA-ICP-MS)对固体生物组织切片样品难以实现原位准确定量的难题,本研究将同位素稀释法与LA-ICP-MS技术相结合,通过开展生物组织样品与浓缩稀释剂的同位素充分交换平衡、稀释剂添加方式、原位的同位素比测量等关键技术研究,确定了组织切片与同位素稀释剂的最佳平衡时间、稀释剂的质量以及选用甲醇作为稀释剂溶剂等实验条件,建立了基于同位素稀释技术的LA-ICP-MS技术在生物样品组织切片中Fe元素的微区定量分析方法,并采用实验室自行制备的均匀的山羊脑和牛肝组织切片标准样品对方法进行了验证,通过ID-LA-ICP-MS方法的测量结果与微波消解-同位素稀释方法的测量结果相一致,验证了该方法的有效性和可靠性。本方法可进一步应用于临床中生物组织切片样品中金属元素的原位、微区定量测量及成像分析。; 冯流星王军; 关键词：同位素稀释组织切片

C-反应蛋白纯品的同位素稀释质谱法测定与国际比对被引量：9: 2014年; 建立了C-反应蛋白的液相色谱-同位素稀释串联质谱检测方法。作为C-反应蛋白纯品标准物质的潜在定值方法,选取同位素标记亮氨酸和缬氨酸为内标,重量法与待测样品准确混合。利用Zorbax SB-Aq色谱柱分离,电喷雾三重四极杆串联质谱多反应监测模式(MRM)测定。对样品的测定不确定度进行计算与分析,测得结果为(41.5±0.9)mmol/kg。利用该方法参加了基于中、日、韩三国计量院合作框架下的国际比对,并取得了比对结果的等效一致。; 宋德伟董晓杰徐蓓武利庆黄挺李红梅; 关键词：C-反应蛋白同位素稀释质谱法标准物质

同位素稀释质谱法测定人绒毛促性腺激素的含量: 2014年; 建立了水解后同位素稀释质谱准确测定人绒毛促性腺激素（ hCG）含量的方法，在hCG水解定量实验中优化了人绒毛促性腺激素的完全水解时间。水解后的样品经高效液相色谱分离，采用串联质谱检测，以多离子监测模式分别检测苯丙氨酸（m/z＝166→120），标记苯丙氨酸（m/z＝174→128）；脯氨酸（m/z＝116→70），标记脯氨酸（m/z＝121→74）；缬氨酸（m/z＝118→72），标记缬氨酸（m/z＝123→76）。根据的三种氨基酸含量分别计算出人绒毛促性腺激素的含量。并对测定结果进行了不确定度评估，相对扩展不确定度3.0％。; 张晓光黄挺宋德伟武利庆杨屹全灿李红梅; 关键词：人绒毛促性腺激素苯丙氨酸脯氨酸缬氨酸

高脂饮食诱导的肥胖对颞叶癫痫小鼠海马损伤的影响被引量：1: 2015年; 目的探讨肥胖对颞叶癫痫发生、发展的影响。方法高脂饲料喂养C57BL/6J小鼠建立肥胖小鼠模型,建模成功后单侧海马微量注射200 ng海人酸(kainic acid,KA)诱导颞叶癫痫,记录小鼠癫痫评分,测定血清肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme,CK-MB)浓度,Western blot检测海马S-100β的表达。海人酸注射5周后,观察小鼠海马病理结构改变。结果海人酸注射后,肥胖小鼠的癫痫行为评分较野生型鼠显著增高;海人酸注射24 h后,与野生型鼠相比,肥胖小鼠海马血清CK-MB浓度和海马S-100β表达升高;海人酸注射后,病理切片显示肥胖鼠海马CA3区神经元丢失和星形胶质细胞活化较野生型鼠更严重,肥胖鼠星形胶质细胞形态发生明显变化。结论肥胖可能加重了小鼠对海人酸诱导颞叶癫痫的损伤。; 冯杰邓子辉张金英薛辉梁辰李建华颜光涛; 关键词：肥胖海人酸 C57BL/6J小鼠

瘦素减轻鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞损伤被引量：2: 2014年; 目的探讨瘦素对鱼藤酮(rotenone)所诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的抑制作用。方法建立鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞损伤模型,用瘦素进行干预,采用MTT比色法检测细胞存活率,锥虫蓝检测细胞死亡率,细胞形态学观察,并用Western blot法检测Bcl-2、Bax、p-GSK-3β(Ser9)和GSK-3β的表达水平,免疫荧光检测α-synuclein的表达水平。结果成功建立了鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞损伤模型。在模型的基础上,瘦素干预后,细胞状态改善,细胞存活率提高约14%(P<0.05),细胞死亡率降低约17%(P<0.05),α-synuclein的浓度下降,Bcl-2和p-GSK-3β的表达显著提高。结论瘦素对鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞损伤具有明显的抑制作用,可能是通过抑制GSK-3β的活性上调Bcl-2/Bax的比率和降低α-synuclein的表达而得以实现。; 韩铭张金英宋翠红梁辰冯杰颜光涛; 关键词：鱼藤酮瘦素

瘦素在海人酸诱导小鼠颞叶癫痫海马损伤中的作用被引量：4: 2015年; 目的探讨瘦素(Leptin)与颞叶癫痫发生、发展过程的关系。方法外源Leptin注射C57BL/6J小鼠后,右侧海马微量注射200 ng海人酸(kainic acid,KA)诱导颞叶癫痫,记录小鼠癫痫评分,1周后观察小鼠海马病理变化,包括Western blot检测Bax的表达水平,尼式染色(Nissl staining)观察海马Hilus区神经元丢失,免疫荧光检测Hilus区星形胶质细胞活化与增殖。结果在200 ng KA诱导的颞叶癫痫模型基础上,10 mg/kg外源Leptin预处理后,癫痫评分增加约52%,Bax表达水平升高约75%(P<0.05),海马Hilus区神经元丢失严重,星形胶质细胞过度活化。结论 Leptin增加了KA诱导的神经元凋亡,加重KA诱导的神经病理过程。; 冯杰邓子辉张金英薛辉梁辰李建华颜光涛; 关键词：瘦素海人酸颞叶癫痫星形胶质细胞

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科技基础性工作专项(2011FY130100)