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葛根素对MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞线粒体途径凋亡的保护作用被引量：12: 2011年; 目的:探讨葛根素对MPP+诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护机制。方法:台盼蓝染色检测细胞存活率;PI单染流式细胞术分析细胞凋亡率、细胞周期分布;ELISA和Western blotting法检测胞浆Cyt C的变化;ELISA方法检测Caspase-3,Caspase-8和Caspase-9酶活性;DNA ladder分析药物对细胞凋亡的干预作用。结果:在12.5~50μmol.L-1,葛根素对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞损伤具有一定的保护作用,并呈一定的量效关系;PI单染流式细胞术检测结果显示MPP+诱导SH-SY5Y细胞发生凋亡,并阻滞细胞于G2/M期,预先加入不同剂量的葛根素可以逆转MPP+对SH-SY5Y细胞损伤作用。West-ern blotting和ELISA分析结果均显示葛根素能够抑制MPP+诱导SH-SY5Y细胞的Cyt C的释放。不同剂量的葛根素也能够抑制MPP+诱导SH-SY5Y细胞的Caspase-3和Caspase-9的活性,但对Caspase-8的活性影响不明显;DNAladder分析也显示葛根素可以抑制MPP+诱导SH-SY5Y细胞凋亡。结论:葛根素可以提高MPP+诱导的SH-SY5Y损伤的细胞存活率,抑制细胞凋亡的发生,其机制可能与调节线粒体Caspase通路和干预细胞周期有关。; 程月发朱国旗关亚丽刘颖硕胡艳李庆林; 关键词：帕金森病葛根素线粒体

自噬/溶酶体途径在帕金森病发生发展中的角色: 2011年; 帕金森病是一种以黑质纹状体区多巴胺能神经元进行性缺失和纹状体多巴胺含量显著减少为特征的中枢神经系统变性疾病。近年来,蛋白质的降解障碍被认为是帕金森病发病过程中的重要因素,自噬/溶酶体途径是细胞内一种重要的蛋白降解途径,负责胞内泛素-蛋白酶体系统未能降解的大分子物质。自噬功能的失调和神经元的退行有重要的联系,自噬在清除与神经变性疾病相关的错误折叠蛋白和易聚集蛋白方面起关键作用,尤其在帕金森病的发生、发展过程中发挥重要作用。; 王秀李庆林朱国旗; 关键词：泛素-蛋白酶体系统帕金森病

酸枣仁皂苷A对脂多糖诱导小胶质细胞活化的影响及神经保护作用被引量：11: 2018年; 目的:研究酸枣仁皂苷A(Ju A)对脂多糖(LPS)诱导BV-2小胶质细胞神经炎症发生的影响及神经炎症导致的神经元细胞损伤的保护作用。方法:以LPS(1μg/mL)刺激BV-2小胶质细胞24 h建立神经炎症模型,采用不同浓度的Ju A(2.5、5、10μmol/L)进行干预。MTT法检测Ju A单独及联合LPS对BV-2细胞存活率的影响;Griess法检测Ju A对激活的BV-2细胞NO释放的影响;ELISA法检测BV-2细胞上清液中TNF-α、IL-1β分泌水平;DCFH-DA探针法检测BV-2细胞内ROS水平;MTT法检测Ju A干预后的BV-2条件培养基对正常小鼠海马神经元细胞(HT-22)存活率的影响。结果:MTT结果显示,Ju A在浓度范围内对BV-2的存活率无明显影响。Griess和ELISA实验结果表明,Ju A可抑制激活的BV-2细胞NO、TNF-α、IL-1β释放水平,同时Ju A还可抑制细胞内ROS水平。此外,Ju A干预的BV-2条件培养基可抑制神经炎症对HT-22海马神经元细胞的损伤。结论:Ju A可在体外抑制LPS诱导的BV-2细胞的炎症发生并保护HT-22细胞因神经炎症受到的损伤。; 张睿李冰洁李庆林; 关键词：酸枣仁皂苷A 小胶质细胞海马神经元细胞神经炎症神经保护

伴侣自吞噬在MPP^+损伤的SH-SY5Y细胞中的影响及葛根素的干预作用被引量：5: 2014年; 目的:研究葛根素通过分子伴侣自吞噬途径保护MPP+损伤的SH-SY5Y细胞。方法:以1 mmol·L-1MPP+损伤SH-SY5Y细胞建立帕金森病细胞模型。采用CCK-8染色检测不同浓度的葛根素对MPP+损伤的SH-SY5Y细胞存活率的影响;透射电镜、AO染色观察自噬体的形成及检测溶酶体活性的变化;RT-PCR检测Lamp2a,Hsc70 mRNA表达的变化,Western blotting法检测细胞内Lamp2a,Hsc70,α-synuclein蛋白的表达。结果:在12.5~50.0μmol·L-1,预先30 min加入葛根素可以保护SH-SY5Y细胞抵抗MPP+诱导的损伤,并呈一定的量效关系;AO染色和电子显微镜检测25.0,50.0μmol·L-1葛根素作用于1 mmol·L-1MPP+损伤的SH-SY5Y细胞,细胞内出现自噬体,并且随着葛根素剂量的增加,胞质中形成的自噬体增多;流式细胞术检测结果显示50.0μmol·L-1葛根素可以拮抗1 mmol·L-1MPP+诱导的SH-SY5Y细胞内ROS水平的增加,阻止氧化损伤的发生;RT-PCR和Western blotting结果表明在12.5~50.0μmol·L-1葛根素通过上调细胞内Hsc70,Lamp2a mRNA和蛋白水平保护MPP+造成的SH-SY5Y细胞损伤并抑制MPP+诱导的SH-SY5Y细胞α-synuclein蛋白的积聚。结论:葛根素可以拮抗MPP+诱导的SH-SY5Y细胞损伤,其保护机制可能与干预分子伴侣自吞噬途径有关。; 王训翠王秀李庆林; 关键词：葛根素 MPP+ROS

益母草碱对缺糖/缺氧损伤PC12细胞的保护作用被引量：4: 2012年; 目的研究盐酸益母草碱对缺糖/缺氧损伤大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞株(PC12)的保护作用。方法采用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)+缺糖建立PC12细胞缺糖/缺氧损伤模型(oxygen and glucose deprivation,OGD),MTT法检测各组细胞存活率,流式细胞仪检测各组细胞内活性氧含量。结果与模型组相比,25μmol·L-1盐酸益母草碱显著提高细胞存活率,降低细胞内的活性氧含量。结论盐酸益母草碱对PC12细胞缺糖/缺氧损伤模型有明显的保护作用。; 袁楠王训翠李晓祥李庆林

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国家自然科学基金(30973894)