国家留学基金(21822067)
- 作品数：5 被引量：14H指数：3
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- 去氢表雄酮及其代谢产物对人肿瘤细胞系的抗增殖作用被引量：3
- 2008年
- 目的:研究去氢表雄酮(DHEA)及其代谢物去氢表雄酮硫酸酯(DHEAs)对HepG2和HT-29细胞增殖的抑制作用及其机制。方法:HepG2和HT-29细胞分别分为对照组、不同浓度(1、10、50、100及200μmol·L-1)DHEA组和DHEAs组,孵育8、24、48及72h后,分别采用噻唑蓝(MTT)比色法和BrdU测定法检测DHEA对肿瘤细胞的生长抑制率,同时测定3-羟基-3-甲基戊二酸单酰A还原酶(HMGR)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)及乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果:①MTT法结果显示,与对照组比较,不同浓度DHEA组HepG2和HT-29细胞增殖抑制率均显著增加(P<0.05)。作用24h时,100μmol·L-1DHEA组细胞增殖抑制率降低最显著(P<0.05),而DHEAs组差异无显著性(P>0.05)。②BrdU法结果显示,当DHEA浓度在50、100和200μmol·L-1时细胞的生长均显著受到抑制,尤其以HepG2细胞的生长抑制率最高(P<0.05)。③DHEA对HepG2细胞HMGR活性抑制率为62%,对HT-29细胞HMGR活性抑制率为51%,而DHEAs则无明显作用。④100μmol·L-1DHEA抑制G6PD的效力为85%,而DHEAs的抑制效力仅为6%。⑤DHEA和DHEAs对细胞LDH的活性影响组间比较差异无显著性(P>0.05)。结论:DHEA对HepG2和HT-29两种肿瘤细胞系均具有较强的抗增殖作用,能明显降低细胞的G6PD或HMGR活性,DHEAs则无明显作用。
- 姜艳芳赵平伟谭岩方艳秋松崎静司
- 关键词：去氢表雄酮葡萄糖-6-磷酸脱氢酶
- 去氢表雄酮通过调节丝／苏氨酸蛋白激酶信号传导通路抑制大鼠Morris肝细胞瘤生长
- 2009年
- 目的探讨去氢表雄酮（DHEA）的体内抗癌作用及其机制。方法Buffalo大鼠21只随机分为空白对照组、肿瘤对照组（把Morris肝细胞瘤移植到大鼠的两肋皮下，建立Morris肝细胞瘤移植的Buffalo大鼠的体内模型，基础饲料喂养）、DHEA肿瘤组（建立Morris肝细胞瘤移植模型后，在喂养的基础饲料中添加DHEA）和去氢表雄酮硫酸酯（DHEAs）肿瘤组（建立Morris肝细胞瘤移植模型后，在喂养的基础饲料中添加DHEAs）。分别喂养4周后，Westernblot和免疫组织化学方法检测磷酸化丝／苏氨酸蛋白激酶（Akt）、PTEN等蛋白的表达，流式细胞术检测大鼠CD3、CD4、CD8和CD4／CD8。单因素方差分析对数据进行处理。结果DHEA肿瘤组的肝细胞瘤的质量为（8．31±0．61）g，较肿瘤对照组的（14．57±0．56）g显著减轻（P〈0．05）。Westernblot及免疫组织化学染色结果显示，DHEA肿瘤组的磷酸化Akt蛋白表达量降低，而PTEN蛋白表达增强；CD3阳性细胞百分率（74．97％±8．29％）较肿瘤对照组（56．45％±6．12％）明显提高（t=4．92，P〈0．05），CD4／CD8比值升高（1．75±0．22）。而DHEAs肿瘤组CD3阳性细胞百分率（60．04％±6．69％）较空白对照组（75．38％±9．76％）明显降低（t=3．87，P〈0．05），同时CD4／CD8比值也降低（1．48±0．56）。结论DHEA对体内的肿瘤具有明显的抑制作用，此作用可能是其通过调节体内的Akt信号传导通路和免疫功能来完成的。
- 姜艳芳赵平伟秦俊杰李明辉松崎静司牛俊奇
- 关键词：蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶去氢表雄酮PTEN
- DHEA抑制大鼠转移性Morris肝癌的实验研究被引量：6
- 2004年
- 目的 :探讨去氢表雄酮 (DHEA)的体内抗癌作用及其机制。方法 :Buffalo大鼠 2 1只随机分为空白对照组 (n=5 ) ;肿瘤对照组 (把 Morris肝细胞瘤移植到大鼠的两肋皮下 ,建立 Morris肝细胞瘤移植的 Buffalo大鼠的体内模型 ) ,喂养基础饲料 (n=6 )、DHEA肿瘤组 (建立 Morris肝细胞瘤移植模型后 ,在喂养的基础饲料中添加 DHEA) (n=6 )和去氢表雄酮硫酸酯 (DHEA- s)肿瘤组 (建立 Morris肝细胞瘤移植模型后 ,在喂养的基础饲料中添加 DHEA - s) (n=4 )。分别喂养 4周后 ,应用流式细胞术检测大鼠的免疫功能 ,应用磁场型高分解能质量分析仪 (GC/ MS)方法测定大鼠体内类固醇的含量 ,采用免疫组化方法染色检测磷酸化的磷酸酶和张力蛋白同源物基因 (PTEN )蛋白表达 ,同时测定其对大鼠的毒副作用。结果 :DHEA肿瘤组的瘤重量 [(8.31± 0 .6 1) g]较肿瘤对照组 [(14 .5 7± 0 .5 6 ) g]显著减小 ,抑制率达到 4 3%。免疫组织化学染色显示 DHEA肿瘤组的磷酸化PTEN蛋白表达量增加 ,同时提高了 CD3、CD4阳性细胞百分率及 CD4 + / CD8+比值 ,与肿瘤对照组相比差异有显著性 (P<0 .0 5 )。 DHEA肿瘤组的胆固醇、甘油三脂及高密度脂蛋白的含量与空白对照组相比差异无显著性 ,未见其有毒副作用。结论 :DHEA对肿瘤具有明显的抑制作?
- 姜艳芳谭岩赵平伟刘力华方艳秋段秀梅松崎静司
- 关键词：去氢表雄酮肝肿瘤肿瘤抑制
- β_2-GPI与细胞凋亡的关系研究
- 2006年
- 目的:探讨β2-糖蛋白-Ⅰ(β2-GPI)与凋亡细胞的结合是否通过磷脂酰丝氨酸(PS)。方法:采用UV照射的方法,诱导K562细胞凋亡,应用碘化丙啶、梯状电泳和β2-GPI检测细胞凋亡。采用β2-GPI与Annexin V的竞争实验来检测β2-GPI是否通过PS与凋亡细胞结合。结果:随着UV照射时间延长,K562细胞的凋亡率增加,在照射300秒时,凋亡细胞达到51.01%(47.23%±4.41%),DNA出现明显的片段化。rGFP连接的β2-GPI,与凋亡细胞结合,β2-GPI可以有效地检测细胞凋亡,而且与Annexin V竞争同一结合位点,即PS。4℃时β2-GPI与晚期凋亡细胞的结合高于37℃,而且随着时间延长,与凋亡细胞的结合均降低。结论:通过β2-GPI与Annexin V的竞争抑制实验第一次为“β2-GPI通过PS与凋亡细胞结合”这一推断提供直接的实验证据,第一次证实β2-GPI既可以与早期凋亡细胞结合,也可以与晚期凋亡细胞结合,rGFP-hβ2-GPI可以作为新的检测细胞凋亡的试剂应用。
- 姜艳芳谭岩刘桂英方艳秋徐立刘力华段秀梅许淑芬
- 关键词：ANNEXINV细胞凋亡磷脂酰丝氨酸
- 去氢表雄酮通过Akt信号通路诱导肝癌细胞凋亡和细胞周期阻滞被引量：5
- 2007年
- 目的 研究去氢表雄酮（DHEA）及其代谢物去氢表雄酮硫酸酯（DHEAs）对HepG2和HT-29细胞抑制增殖、促进凋亡及诱导细胞周期阻滞的作用。方法 应用MTT比色法检测不同浓度（1、10、50、100、200μmol／L）的DHEA或DHEAs与HepG2和HT-29细胞孵育8、24、48、72 h对两种细胞系的生长抑制作用;应用流式细胞术检测不同浓度的DHEA或DHEAs对细胞凋亡及细胞周期的变化;采用Western blot检测细胞内磷酸化Akt（Ser473,Thr308）蛋白的水平。结果 （1）不同浓度DHEA作用细胞24h时,HepG2的存活率24h时分别为92．7％±0．9%、84．7％±1．2％、62．4％±0．8％、49．5％±0．8％和50．7％±0．3％,HT-29细胞的存活率分别为92．5％±0.4％、89．5％±0．7％、80．5％±1．1％、67.5％±1.5％和70．6％±0．6％,与对照组相比,DHEA明显抑制HepG2和HT-29两种细胞的生长。在浓度为100μmol／L作用24 h时作用明显,而DHEAs对HepG2及HT-29细胞的增殖无明显影响。（2）100μmol／L的DHEA显著抑制两种细胞周期进程, HepG2细胞G0／G1期细胞比例显著升高,可以达到68．4％±2．0％,而对照组为48．6％±1．2％。HT-29细胞在100μmol／L时的G0／G1期的比率为90．3％±2．7％,而对照组仅为59．0％±1．2％,S及G2／M期细胞明显减少。（3）100μmol／L DHEA作用24 h时能显著诱导HepG2细胞凋亡（凋亡率为18．6％±2．2％）,而DHEAs却无此作用。（4）HepG2细胞在100μmol／L和200μmol／L DHEA作用24 h后,磷酸化Akt（Thr^308）、磷酸化Akt（Set^473）蛋白表达显著降低,这种作用在应用PI3K抑制剂和PI3K激活剂后分别被增强和消除。结论 DHEA对HepG2和HT-29两种肿瘤细胞系均具有较强的抗增殖作用。而对于不同的肿瘤细胞系,DHEA可能通过调节Akt的信号通路来诱导细胞凋亡,还可能通过阻滞细胞周期,使其阻滞在G0／G1期。DHEAs对细胞的生长没有明显的作用。
- 姜艳芳赵平伟谭岩刘力华李明辉松崎静司牛俊奇
- 关键词：肝细胞细胞凋亡细胞周期肝细胞生长因子
