广东省自然科学基金(8151051501000037)
- 作品数：11 被引量：20H指数：3
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- 端粒酶逆转录酶高表达新生鼠真皮细胞株的构建及其生物学功能的初步研究被引量：1
- 2011年
- 目的:以逆转录病毒载体pLEGFP-N1-TERT为介导构建TERT高表达新生鼠真皮细胞株,并观察其相关生物学功能变化情况。方法:将pLEGFP-N1-TERT感染C57新生鼠真皮细胞,并用G418筛选法进行阳性克隆的筛选并培养观察,同时将空载对照。两组细胞均经MTT法检测生长情况,流式检测表面标记物CD44、CD133的表达情况,Westernblot法检测TERT蛋白的表达,免疫组化检测Versican表达。结果:荧光显微镜下观察TERT高表达细胞发出绿色荧光,其生长速度较对照趋缓,其CD44、CD133、TERT蛋白、Versican表达均升高。结论:本实验获得TERT高表达新生鼠真皮细胞株,其毛发诱导能力较高,可作为毛囊细胞移植种子细胞来源之一。
- 谭挺胡志奇
- 关键词：逆转录病毒载体
- 毛囊修剪的大小对其活性影响的体外定量研究被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨体外研究毛囊被剪成不同大小的移植物后对其活性的影响.方法 将显微镜下分离所得到的含有单个毛囊的移植物,按照其外根鞘周围留有保护组织厚度的不同分为A（0mm）、B（0.3mm）、C（0.6mm）3组,培养6 d后观察其活性情况,并用毛干生长率、毛干生长长度和毛囊的组织形态学变化来衡量.结果 A、B、C 3组中毛干生长率分别为81.5%、91.7%,92.6%,A和B组与A和C组间的差异有统计学意义（P＜0.0125,P＜0.0125）,B和C组间的差异无统计学意义（P＞0.0125）;毛干的平均生长长度分别为（1.34±0.10）、（1.36±0.95）、（1.36±0.12）mm.组间均数的差异均无统计学意义（P＞0.05）;各组间毛囊的细胞形态无明显变化.结论 毛囊外根鞘周嗣留有0.3 mm厚度的保护组织,既不影响其活性,又可以增加单次移植的密度.本实验结果 为临床毛发移植提供了参考数据.
- 苗勇胡志奇孙锡金谭挺鲜华陈明娟孙宇
- 关键词：毛发移植器官培养毛囊
- 激光脱毛动物模型的建立被引量：2
- 2009年
- 目的采用黑毛西藏小型香猪为动物模型,探讨翠绿宝石激光脱毛术后的毛囊组织学和超微结构的改变。方法对12只黑毛白皮西藏小型香猪用翠绿宝石激光脱毛,术前、术后即刻、1h及1、3、5、10、15、30、60d分别取材,在光镜和透射电镜下观察皮肤标本。结果激光治疗术后毛囊中毛干凝固坏死、碳化及脱落,部分外根鞘及毛球细胞变性坏死;术后1h毛囊外根鞘、毛球细胞出现核固缩、核碎裂或核溶解等凋亡表现,胞浆空泡化明显,以术后1、3d达到高峰,并伴有毛乳头血管内皮变性、真皮组织充血水肿和淋巴细胞浸润。术后5d毛囊的损伤性炎症减轻,术后10、15d表皮、真皮及毛囊结构基本恢复正常,术后60d毛囊数目减少,残余毛囊结构正常。结论翠绿宝石激光对毛囊有选择性损伤作用,通过直接热凝固作用和诱导细胞凋亡造成毛囊不可逆的损伤,达到永久性脱毛的目的。黑毛西藏小型香猪可作为临床激光脱毛的动物模型。
- 曾东余文林毕媛杨传红赖晃文胡志奇
- 关键词：激光脱毛动物模型毛囊超微结构
- 单根毛囊改良分离法在疤痕性秃发毛囊移植中的临床研究被引量：1
- 2011年
- 目的采用改良的单根毛囊分离法得到单根完整毛囊,用于毛发移植治疗头部及眉部的疤痕性秃发,探讨该法应用于疤痕植发的技术要点和临床效果,为毛发移植治疗提供一定的临床数据。方法头部和眉部疤痕性秃发17例患者,使用改良法获得单根毛囊并植入疤痕秃发区域。统计供区所得完整单根毛囊数和受区毛囊成活数,并在术中取所得毛囊进行组织学检查。结果 17例患者随访3～12个月,生长外观自然,原有疤痕基本遮盖。供区毛囊提取率为54.87%～86.01%,受区毛囊成活率为70.27%～96.36%,组织学检查显示毛囊生发结构完整。结论改良分离法获取的单根完整毛囊具生长活性,植入后天获得性的疤痕秃发区域内后生长良好,可改善疤痕区外观。
- 黄胜华胡志奇颜玲郭栋罗艳香石颖
- 关键词：毛发移植
- 受力部位的不同对毛囊单位移植物的影响被引量：2
- 2009年
- 目的研究毛囊单位(FUs)移植物因受力部位的不同对其组织形态和毛干生长长度的影响。方法将人头皮毛囊在显微镜下分离,选取含有单根毛干的生长期FUs,随机分为A、B、C三组,A和B组分别用显微镊子在人为控制条件下夹持其毛乳头和隆突部,C组为不做任何处理的对照组,从三组中分别挑选部分FUs行HE染色,光镜下检测其组织学变化;剩余部分行器官培养10d。通过倒置显微镜观察FUs的形态学变化,目镜测微器测量毛干生长长度。结果A、B、C三组中FUs的组织形态变化没有明显差异,但是毛干平均生长长度分别为(1.293±0.245)、(2.116±0.423)和(2.235±0.379)mm,A与B组和A与C间差异均存在统计学意义(P<0.05,P<0.05),B与C组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论在毛发移植过程中要避免手术器械对毛乳头的损伤。
- 苗勇胡志奇孙锡金谭挺陈明娟
- 关键词：毛发移植毛囊单位毛乳头隆突
- 新生鼠真皮细胞的分离培养及其毛囊诱导能力的鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的成功地体外分离培养新生鼠的真皮细胞，为毛囊组织工程提供种子细胞。方法应用中性蛋白酶和胶原酶消化法分离新生鼠皮肤的真皮细胞，进行体外培养后观察细胞的形态变化，并采用细胞免疫组织化学方法及细胞体外移植法检测其毛囊的诱导能力。结果新生鼠的真皮细胞体外培养生长状况良好，呈成纤维细胞样，CD133、多能聚糖表达呈阳性。结论新生鼠真皮细胞体外培养生长稳定，具有较强的毛囊诱导能力，可为其在毛囊组织工程中的应用奠定基础。
- 陈明娟胡志奇谭挺
- 关键词：新生鼠细胞鉴定毛囊
- 毛囊细胞移植法诱导毛囊的初步研究被引量：6
- 2009年
- 目的构建一个可靠有效的移植毛囊细胞诱导毛发发育的模型,以治疗脱发。方法取自愿捐献的成人头皮标本,联用显微分离与免疫磁珠法获得人毛囊干细胞;消化法获得毛乳头细胞。培养后混合植入裸鼠皮下,观察毛囊形成情况。结果在裸鼠的皮肤切片中可以看到较为完整的毛囊结构形成。结论毛囊细胞移植法可以在体内诱导出毛囊样结构,为将来治疗脱发奠定了基础。
- 谭挺胡志奇
- 关键词：细胞疗法毛囊干细胞毛乳头细胞毛发再生
- 胚胎皮肤细胞裸鼠皮下移植构建毛发发育模型被引量：1
- 2009年
- 目的观察胚胎皮肤细胞裸鼠皮下移植后的毛发发育情况,构建毛发发育模型。方法从C57BL/6鼠胚胎的皮肤中分离出真皮和表皮细胞,将它们按照一定比例重新混合后采用注射法移植到裸鼠皮下,显微镜下观察毛发形成情况。结果镜下观察到裸鼠皮下有毛囊及毛发纤维形成并有毛干长出。结论胚胎皮肤细胞体内移植可以构建毛发发育的完整模型。
- 陈明娟胡志奇谭挺孙锡金苗勇
- 关键词：胚胎皮肤细胞移植
- pLEGFP—N1-端粒酶逆转录酶载体的构建及其表达被引量：3
- 2011年
- 目的构建逆转录病毒载体pLEGFP—N1．端粒酶逆转录酶（TERT），并观察其在新生鼠真皮细胞中的表达。方法将聚合酶链反应（PCR）扩增出TERT全部片段，定向连接到被Hindm和Sall双酶切的质粒，经酶切测序鉴定后筛选阳性克隆。将pLEGFP-N1—TERT质粒和PIKpackaging质粒以磷酸钙共沉淀法转染包装细胞293FT，包装产生逆转录病毒。进行病毒滴度测定后，取病毒上清感染新生鼠真皮细胞，筛选转基因细胞。比较转染前后TERT在mRNA水平的表达，端粒酶活性的变化，荧光显微镜观察细胞荧光表达。结果BamHI酶切鉴定及测序鉴定，证明pLEGFP-N1-TERT构建成功。转染后细胞稳定表达绿色荧光蛋白，并经Westernblots及免疫组织化学检测TERT高表达。结论构建的逆转录病毒表达载体pLEGFP—N1-TERT能够产生高滴度的逆转录病毒，促使外源性TERT基因转入新生鼠真皮细胞后得到高表达，为皮肤组织工程及细胞移植疗法奠定基础。
- 谭挺胡志奇
- 关键词：端粒酶逆转录酶逆转录病毒载体
- 深低温冻存毛囊的实验研究
- 2010年
- 目的建立一种长时间体外保存毛囊的方法。方法取自愿捐献的成人头皮标本，在湿微镜下分离成毛囊单位，随机分为3组。一组直接行毛囊培养；另外两组分别用常规冻存法和玻璃化冻存法液氮中保存21d，复温后行毛囊培养，观测各组毛囊存活及生长情况。结果玻璃化冻存组的毛囊解冻后，其存活及生长情况与直接培养组相近，优于常规冻存组。结论使用玻璃化冻存法长时间保存毛囊，对其存活和特性无明显影响，为临床应用提供了实验基础。
- 谭挺胡志奇
- 关键词：毛囊玻璃化深低温冷冻
