转基因生物新品种培育专项(2009ZX08009-157B) 作品数:19 被引量:60 H指数:5 相关作者: 杨公社 张春雷 房兴堂 陈宏 周鑫 更多>> 相关机构: 西北农林科技大学 徐州师范大学 河南农业大学 更多>> 发文基金: 转基因生物新品种培育专项 国家高技术研究发展计划 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
高表达FoxO1抑制猪骨骼肌成肌细胞的分化 被引量:7 2010年 FoxO1(Forkhead box O1)是调控肌肉生长、代谢和细胞分化的重要转录因子,但其在成肌细胞分化中的作用还不甚清楚。为了研究FoxO1对哺乳动物成肌细胞分化的影响,以原代培养的长白仔猪成肌细胞作为实验材料,用2%马血清诱导分化,采用实时荧光定量PCR、Western blotting和脂质体转染等方法检测FoxO1及早期和晚期生肌调节因子MyoD和myogenin在猪成肌细胞分化过程中的表达变化。结果显示,在猪成肌细胞分化过程中,FoxO1mRNA表达量显著增加,但总蛋白量变化不显著,其磷酸化水平显著上调。同时,高表达FoxO1的猪成肌细胞中,生肌调节因子MyoD和myogenin mRNA表达受到显著抑制,而MyoD蛋白变化不显著,myogenin却显著下调(P<0.05)。以上结果表明,FoxO1能够推迟猪成肌细胞的分化时间并抑制分化;同时推测,FoxO1可能通过抑制生肌调节因子的表达控制骨骼肌纤维类型的终末分化。 袁媛 史新娥 刘月光 杨公社关键词:FOXO1 分化 猪TCTP基因的表达规律及其对脂肪细胞分化的影响 被引量:3 2011年 翻译控制肿瘤蛋白(TCTP,translationally controlled tumor protein)是一类广泛存在各种生物、序列高度保守的蛋白,最初认为TCTP是一类生长相关蛋白,近年研究发现TCTP可能具有非常重要的生物学功能.本研究通过高通量测序(Solexa)技术、实时定量PCR(RT-qPCR)对瘦肉型和脂肪型猪不同生长阶段脂肪组织、脂肪细胞中TCTP的表达规律进行了研究,采用siRNA技术,沉默TCTP,研究了其对脂肪细胞分化的影响.结果表明:TCTP在瘦肉型猪脂肪组织中的mRNA表达量显著高于脂肪型猪(P<0.01);在不同日龄猪脂肪组织中,TCTP的mRNA表达量随着日龄增长而降低;在不同组织中的检测结果发现,TCTP在心、肝、肾、肌肉和脂肪中有较高的表达,肺和脾中表达量较低;TCTP的mRNA表达量在猪前体脂肪细胞增殖过程中逐渐增高,在分化阶段逐渐下降;沉默TCTP促进了脂肪细胞的分化,引起了PPARγ、C/EBPα、SREBP-1c的显著升高(P<0.01).以上研究发现,TCTP在脂肪沉积过程中可能具有抑制作用,为进一步研究肥胖关键基因调控机制提供科学依据. 李新建 杨浩 程佳 宋子仪 杨公社关键词:高通量测序 实时定量PCR SIRNA干扰 分化 核心蛋白多糖基因(DCN)的研究进展 被引量:2 2010年 核心蛋白聚糖是一种富含亮氨酸的小分子蛋白聚糖,是细胞外基质的组成成分。该文综述了核心蛋白聚糖(Decorin,DCN)的结构、功能以及其来源方式,并且介绍了核心蛋白聚糖在抗纤维化、抗肿瘤及肌肉生长发育方面的研究现状。 孙加节 张春雷 房兴堂 陈宏关键词:核心蛋白聚糖 纤维化 肿瘤 肌肉生长 牛AMPK家族基因的研究进展 被引量:1 2010年 AMP激活的蛋白激酶(AMP-activated prorein kinase,AMPK)是一种能被腺苷一磷酸(AMP)激活的蛋白激酶。在动物应激(生理、营养、环境和疾病等)过程中起着重要作用。近年研究表明,AMPK在细胞和全身组织器官能量代谢平衡中起着举足轻重的作用,并且在调节物质代谢中起重要作用,其调节代谢过程主要包括葡萄糖转换,糖酵解和脂类代谢等。近年来在牛上已经进行了很多研究,其中包括其染色体定位及结构的确定等。本文将简要介绍AMPK的分子结构及功能,并对AMPK基因在牛上的研究进展进行综述。 石秀英 房兴堂 张春雷 陈宏慢病毒介导shRNA干扰FoxO1促进猪成肌细胞中MyHCⅠ的表达 被引量:4 2011年 叉头框转录因子O亚族1(forkhead box transcription factor O1,FoxO1)是调控骨骼肌生长、代谢及细胞分化过程的重要转录因子,在肌纤维类型转化过程中发挥重要作用.为深入研究其对肌纤维类型的影响,构建FoxO1短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰慢病毒载体并感染猪成肌细胞,用real-time PCR和Western印迹法检测FoxO1和肌球蛋白重链Ⅰ(myosin heavy chainⅠ,MyHCⅠ)mRNA和蛋白的表达情况.测序结果证实,Lenti H1 RNAi FoxO1质粒构建正确,获得Lenti H1 RNAi FoxO1病毒颗粒滴度为8×107U/mL.病毒感染猪成肌细胞后,与对照组相比,siFoxO1a组FoxO1在转录水平上降低了58%,蛋白水平降低了77%,而MyHCⅠmRNA表达量提高了2.58倍.结果表明,本研究成功构建了猪FoxO1基因shRNA干扰慢病毒载体,且沉默FoxO1促进猪成肌细胞中MyHCⅠmRNA的表达. 史新娥 郑雪莉 刘月光 袁媛 张辉 杨公社关键词:慢病毒 成肌细胞 调控骨骼肌纤维类型转化的信号通路 被引量:7 2010年 骨骼肌由异质性的肌纤维组成,不同类型的肌纤维具有不同的形态、代谢、生理和生化特性.根据不同肌纤维中表达的特异肌球蛋白重链亚型可将成体哺乳动物骨骼肌纤维分为4类,即Ⅰ,Ⅱa,Ⅱx和Ⅱb型.骨骼肌保持高度可塑性,当机体受到某些生理或病理刺激时,骨骼肌为了适应需要,通过激活胞内相关信号通路改变肌纤维特异基因的表达从而诱发肌纤维类型的转化.本文综述了细胞内参与调控肌纤维类型转化的多条重要信号通路,如Ca2+信号通路,Ras/MAPK信号通路及多种转录调节因子,辅激活因子和抑制子等,为改善肉类品质,提高运动训练效果及治疗肌肉相关疾病奠定了理论基础. 袁媛 刘月光 史新娥 杨公社关键词:肌纤维类型 信号通路 哺乳动物味觉感受器T1Rs受体家族及信号转导机制的研究进展 2010年 味觉受体第一家族(T1Rs)是一类能感知甜味和鲜味的受体家族,它包括T1R1,T1R2,T1R3三个成员。T1R2+T1R3以异二聚体形式共表达参与甜味识别,而T1R1+T1R3也以异二聚体形式共表达参与鲜味识别。良好的味觉能促进牛的食欲,促进生长发育,但目前关于牛的T1Rs受体家族的研究并不多见,有必要对这个受体家族做进一步探索。本文从甜味和鲜味两个方面对这一受体家族的分子结构及信号转导机制的最新研究进展做简要综述。 单俐敏 张春雷 陈宏 房兴堂关键词:信号转导 南阳牛肌肉发育过程中IGF基因家族的表达变化研究 被引量:7 2012年 IGF基因家族对肌肉发育起重要的调控作用,而目前对牛肌肉发育过程中IGF基因家族的表达变化研究还不充分。本研究利用荧光实时定量PCR技术分析了南阳牛3月龄到24月龄期间背最长肌组织中IGF,IGF受体和IGF结合蛋白基因的表达变化规律,发现IGF1,IGF2,IGF1R,IGF2R,IGFBP1和IGFBP3的表达量均呈现出明显的下降趋势,其中18月龄和24月龄时的表达量与3月龄时相比显著低(P<0.05);IGFALS也呈现出下降的趋势,但表达量在各个时期没有显著的差异(P>0.05);IGFBP2,IGFBP4和IGFBP6在6月龄时表达量上升,在12月龄和18月龄时表达量降低,在24月龄时表达量再次上升,但各个时期表达量均无显著差异(P>0.05);IGFBP5表现出先升高而后降低的趋势,6月龄比24月龄时表达量显著高(P<0.05),其他各月龄之间差异不显著。本研究对IGF基因家族在南阳牛肌肉发育过程中的表达变化进行了系统的研究,为进一步深入分析IGF系统在牛肌肉发育过程中的作用提供了有力的理论基础。 张小辉 高雪 许尚忠 祁艳霞 李云雷关键词:肌肉发育 猪SFRP4基因的表达规律及抑制剂SP600125对前体脂肪细胞分化的影响 被引量:1 2012年 分泌型卷曲相关蛋白4(secreted frizzled-related protein 4,SFRP4)是Wnt信号通路可溶解的调控子.通过高通量测序(Solexa)技术、实时定量PCR(RT-qPCR)技术对瘦肉型和脂肪型猪不同生长阶段脂肪组织、脂肪细胞中SFRP4表达规律进行研究;用JNK信号通路特异性抑制剂SP600125处理猪原代前体脂肪细胞,研究抑制JNK信号通路对猪前体脂肪分化以及SFRP4 mRNA和蛋白表达的影响.结果显示,SFRP4在脂肪型猪脂肪组织表达量显著高于瘦肉型猪(P<0.01);不同组织检测结果发现,SFRP4广泛表达于各个组织,并高表达于脂肪组织;前体脂肪细胞向成熟脂肪细胞分化过程中SFRP4表达量逐渐升高;SP600125促进前体脂肪细胞分化,引起PPARγ、FABP4、ATGL、Perilipin的显著升高(P<0.01),而SFRP4表达被显著抑制.本研究为调控脂肪细胞分化关键基因的筛选提供新的理论参考. 关华 郑加盟 陈宗正 宋子仪 杨浩 杨公社关键词:高通量测序 前体脂肪细胞 分化 奶牛分子育种研究进展 被引量:5 2009年 本文概述了奶牛分子育种的研究进展,介绍了开展分子育种的必要性,分子育种研究的内容与特点、成就与现状、问题和展望。重点汇总了DNA分子多态及其与生产性状关系研究的成就,包括奶牛的泌乳性状、繁殖性状、抗病性方面候选功能基因的研究,生产性能的微卫星标记等方面。指出了奶牛分子育种研究存在的问题,据此提出了今后加快奶牛分子育种研究的思路、措施和应用前景。 陈丹霞 陈宏 张春雷 房兴堂关键词:奶牛 分子育种 泌乳性状