重庆市自然科学基金(CSTC2010BB5198)
- 作品数：5 被引量：14H指数：2
- 相关作者：杨镇洲王东李娟罗维朱剑武更多>>
- 相关机构：第三军医大学大坪医院重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金国家自然科学基金吴阶平医学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 白藜芦醇抑制A549人肺腺癌细胞增殖与IGF-ⅠR的关系被引量：2
- 2011年
- 目的探讨白藜芦醇对人肺腺癌A549细胞增殖的抑制效应及其与IGF-ⅠR的关系。方法以人肺腺癌A549细胞株为研究对象,采用MTT方法测定细胞增殖,用RT-PCR与免疫印迹方法测定IGF-Ⅰ受体mRNA与蛋白表达水平。结果 2.5～15 nmol/L IGF-Ⅰ可显著促进A549细胞增殖(P<0.05),给予12.5、25.0、50μmol/L白藜芦醇对A549细胞增殖具有明显抑制作用(P<0.05)。白藜芦醇(6.25～50μmol/L)与10 nmol/L IGF-Ⅰ共作用于A549细胞,均可抑制IGF-Ⅰ的促A549细胞增殖作用,其中尤以25、50μmol/L白藜芦醇的抑制增殖作用显著(P<0.05),白藜芦醇可有效降低IGF-ⅠR mRNA与蛋白表达。结论白藜芦醇可通过降低IGF-ⅠR mRNA与蛋白表达有效抑制IGF-Ⅰ介导的A549肺癌细胞增殖。
- 朱剑武夏蕾杨剑罗维李娟周芊曾林立王东杨镇洲
- 关键词：白藜芦醇胰岛素样生长因子-1胰岛素样生长因子-1受体人肺腺癌细胞A549
- IGSF4基因在非小细胞肺癌中甲基化状态及其意义研究被引量：1
- 2014年
- 目的通过MassARRAY质谱甲基化测序检测,分析IGSF4基因的启动子区在非小细胞肺癌(NSCLC)中的甲基化修饰规律和特点,进一步探讨NSCLC早期诊断新方法。方法首先利用MassARRAY质谱甲基化测序及甲基化特异PCR(MSP)观察该基因在NSCLC中的甲基化状态,再通过RT-PCR验证其在NSCLC中表达情况。结果 MassARRAY质谱甲基化测序方法对7例NSCLC和3例正常对照血样检测结果显示,IGSF4基因启动子区8个CpG位点在NSCLC中甲基化程度明显增高(P<0.01),呈高度甲基化状态;MSP结果亦显示,IGSF4基因在NSCLC中与正常外周血比较呈高甲基化;在细胞水平上进一步验证IGSF4基因表达情况,结果发现该基因在NSCLC中呈低表达。结论 IGSF4基因在NSCLC中呈高甲基化状态,在NSCLC中低表达,可作为无创性早期诊断NSCLC的新方法。
- 朱剑武李梦侠王东高天
- 关键词：非小细胞肺癌DNA甲基化A549细胞株MSP
- 非小细胞肺癌原发灶与脑转移灶EGFR基因突变状况的一致性研究被引量：6
- 2013年
- 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)原发灶与脑转移灶的表皮生长因子受体(EGFR)基因突变状况,分析两者之间是否存在一致性。方法收集2003年1月至2011年12月31例NSCLC脑转移患者的肺原发灶和脑转移灶石蜡包埋组织标本,应用DNA直接测序法进行EGFR突变分析,如发现两者突变不一致则进一步采用增殖阻碍突变系统(ARMS)验证。结果 31例NSCLC肺原发灶中,8例存在19外显子E746-A750缺失突变、4例为21外显子L858R点突变;在31例脑转移灶样本中,8例为19外显子E746-A750缺失突变,3例存在21外显子L858R点突变,EGFR突变类型在脑转移灶和肺原发灶的分布差异无统计学意义(P=0.793)。共有16.1%(5/31)的肺原发灶和脑转移灶EGFR突变状况不一致,其中男性4例,女性1例;3例腺癌(2例脑转移灶19外显子缺失突变而肺原发灶阴性突变,1例肺原发灶21外显子点突变而脑转移灶阴性突变),1例鳞癌和1例非典型类癌(均为脑转移灶阴性突变而肺原发灶19外显子缺失突变)。结论 NSCLC原发病灶及脑转移灶EGFR基因突变存在不一致性。
- 王帅胡南陈川肖华亮罗维李娟胡金蓉吴艳杨镇洲
- 关键词：非小细胞肺癌原发病灶表皮生长因子受体
- APE1和p53蛋白在A549细胞和HeLa细胞中的结合作用被引量：3
- 2013年
- 目的探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(apurinic/apyrimidinic endonuclease,APE1)和p53蛋白内源性和外源性相互结合作用。方法将重组质粒pET42a-hAPE1转染E.coli BL21(DE3),应用IPTG诱导GST-APE1蛋白表达,鉴定后经金属螯合层析技术纯化,通过Western blot鉴定纯化蛋白,得到GST-APE1融合蛋白。免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)和GST蛋白沉降实验分别检测内源性和外源性APE1和p53蛋白结合作用,免疫荧光标记结合激光共聚焦显微镜技术确定APE1和p53蛋白亚细胞定位。结果转染质粒经IPTG诱导表达,应用SDS-PAGE发现GST-APE1在预期位置64×103处存在阳性条带,"Ni"柱纯化后得到GST-APE1融合蛋白,通过Western blot鉴定。免疫共沉淀和GST蛋白沉降实验证实APE1和p53存在内源性和外源性结合作用。激光共聚焦显微镜观察免疫荧光标记的APE1和p53蛋白均为核浆共表达蛋白,氧化应激处理后,蛋白逐渐由胞浆向胞核移位,二者共定位于核膜处较明显。结论 APE1和p53蛋白在A549和HeLa细胞中存在内源性和外源性结合作用,可能与其转录调控及肿瘤放化疗疗效有关。
- 张翀李梦侠程燚李增鹏王阁王东杨镇洲
- 关键词：P53蛋白相互作用
