哈尔滨市科技攻关计划项目(2005AA9CS116-10)
- 作品数：2 被引量：9H指数：1
- 相关作者：邢丽娜魏星庞然然更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：哈尔滨市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 靶向VEGF发夹状RNA对宫颈癌HeLa细胞抑制作用的研究被引量：1
- 2011年
- 目的:运用RNAi技术下调血管内皮生长因子(VEGF)在HeLa细胞中的表达,观察其对肿瘤细胞凋亡的影响,为人宫颈癌治疗提供理论依据。方法:设计并构建针对VEGF的携带绿色荧光蛋白(GFP)发夹状RNA(shRNA)质粒表达载体(PGPU6/GFP/Neo-shRNA),脂质体法转染HeLa细胞;荧光显微镜观察GFP的表达,并计算转染效率;RT-PCR检测HeLa细胞VEGF的表达,筛选出靶序列;再用流式细胞仪法检测细胞凋亡。结果:构建的PGPU6/GFP/Neo载体成功转入HeLa细胞;转染48h后,HeLa-shVEGF1组HeLa细胞VEGFmRNA表达的抑制率为75.0%;与HeLa组和HeLa-shNC组相比,HeLa-shVEGF1组HeLa细胞凋亡率明显增加,P<0.01。结论:本研究构建的PGPU6-shRNA表达载体携带GFP便于观察细胞的转染情况,且不影响U6启动子的转录,同时有效沉默了VEGF基因,明显增加HeLa细胞的凋亡,为未来肿瘤的治疗提供新途径。
- 庞然然邢丽娜
- 关键词：血管内皮生长因子RNA干扰HELA细胞
- shRNA干扰VEGF的表达对宫颈癌SiHa细胞凋亡的影响被引量：8
- 2011年
- 目的利用RNA干扰技术抑制S iHa细胞中血管内皮生长因子(VEGF)的基因表达,探讨其对肿瘤细胞凋亡的诱导作用。方法设计针对VEGF的两种短发夹RNA(shRNA),分别构建PGPU6/GFP/Neo-VEGF重组质粒表达载体,命名为pv1、pv2。利用脂质体将质粒转染入人宫颈癌S iHa细胞,采用RT-PCR方法检测VEGF mRNA的变化情况。筛选出抑制率较高的质粒进行下一步实验;转染后,用流式细胞术检测细胞凋亡。结果 pv1、pv2对VEGF mRNA均有显著的抑制作用,抑制率分别为(82.17±4.45)%和(64.55±3.80)%,显著高于阴性对照组的(7.63±4.13)%(P<0.05)。pv1转染组的细胞凋亡率为(47.85±4.65)%,明显高于阴性对照组的(17.76±2.12)%和空白对照组的(19.66±3.74)%(P<0.01)。结论 RNA干扰技术可以有效沉默人宫颈癌细胞株S iHa中VEGF mRNA的表达,并可诱导宫颈癌细胞凋亡。
- 魏星邢丽娜
- 关键词：短发夹RNAVEGF宫颈癌SIHA细胞凋亡
