高层次人才科研启动基金(RCZX200805)
- 作品数：7 被引量：26H指数：3
- 相关作者：曹红李春孙倩李开雄张斌更多>>
- 相关机构：石河子大学嘉兴学院北京理工大学更多>>
- 发文基金：教育部科学技术研究重点项目高层次人才科研启动基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：理学轻工技术与工程生物学化学工程更多>>
- 甲壳素固定化β-葡萄糖醛酸苷酶的研究被引量：2
- 2011年
- 以甲壳素为载体、戊二醛为交联剂,固定β-葡萄糖醛酸苷酶,对β-葡萄糖醛酸苷酶的固定化条件进行了研究,并通过正交实验确定了酶固定的最佳条件:戊二醛浓度0.7%,交联时间4h,吸附时间为9h,反应温度40℃,此时酶活力回收率可达67.32%。
- 孙倩李开雄李春段海燕叶海曹红
- 关键词：Β-葡萄糖醛酸苷酶甲壳素固定化
- 毕赤酵母高效表达重组β-葡萄糖醛酸苷酶的诱导方法研究被引量：2
- 2011年
- 将甘草酸生物转化合成GAMG已成为国内外医药和食品行业研究的热点。该文在前期构建毕赤酵母(pichia pastoris)工程菌GS115-GUS的基础上,对重组毕赤酵母工程菌发酵条件进行了研究。通过单因素及正交试验建立工程菌最佳表达β-葡萄糖醛酸苷酶的诱导产酶方法:重组毕赤酵母GS115-GUS菌株在液体YPD培养基中活化24 h后,接种到BMGY中富集菌体,OD600达到6.0时,按照1∶1(V/V)的接种比率接入到pH为6.0的BMMY培养基中,加入1.5%诱导剂甲醇诱导产酶,且每隔24 h添加一次。该诱导产酶条件简单、易行、科学、合理,毕赤酵母高效表达GAMG的酶活高达1.97×103 U/mL,研究结果达到预期目标,为进一步研究重组酵母工程菌产β-葡萄糖醛酸苷酶的发酵水平、β-葡萄糖醛酸苷酶生物催化甘草酸制备GAMG以及工业化生产奠定基础。
- 张斌任延鹏梁艳明张婉婧孙倩李春曹红
- 关键词：毕赤酵母摇瓶发酵发酵条件优化Β-葡萄糖醛酸苷酶
- 海藻酸钠固定化β-葡萄糖醛酸苷酶的研究被引量：10
- 2011年
- 本文研究了以海藻酸钠为载体,采用交联-包埋方式固定β-葡萄糖醛酸苷酶的固定化工艺。分别考察海藻酸钠浓度、戊二醛体积分数、氯化钙浓度、交联时间和固化时间对固定化酶相对酶活力的影响,并以正交试验确定β-葡萄糖醛酸苷酶最佳的固定化条件:海藻酸钠质量浓度35g/L、给酶量1600U/g载体、戊二醛体积分数0.2%、氯化钙质量浓度20g/L、交联时间2h、固化时间2h。研究表明此时固定化酶的回收率较高,可达到71.66%,本文使用的固定化工艺简单易行,具有广阔的工业前景。
- 张斌孙倩任延鹏梁艳明张婉婧陈璐李春曹红
- 关键词：Β-葡萄糖醛酸苷酶海藻酸钠固定化酶
- TTC法测定离子液体中产紫青霉细胞存活率的研究被引量：2
- 2014年
- 以产紫青霉菌细胞为供试材料,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)测定了不同波长、萃取剂、显色时间、显色温度以及不同pH下的脱氢酶活性,并将优化后的TTC-脱氢酶还原法用于测定不同离子液体中产紫青霉的细胞存活率。结果表明,在0.5%的TTC缓冲溶液中,测定波长为485 nm时吸光度最高;选用丙酮作为萃取剂时,萃取效果好;适宜的显色时间为1 h,显色温度为32℃;在pH为7.0、0.2 mol/L的NaH2PO4-Na2HPO4(PB)缓冲溶液中,显色稳定,脱氢酶活性也较好。优化后的TTC-脱氢酶还原法能较为准确、快速的检测出不同离子液体中产紫青霉菌的细胞存活率。
- 李扬曹红李春郑兰兰杜蕾
- 关键词：TTC脱氢酶活性离子液体
- 不同阴离子组成的离子液体对产紫青霉生长、代谢及催化特性的影响被引量：4
- 2014年
- 研究了6种不同阴离子分别与1-丁基-3-甲基咪唑阳离子[Bmim]+组成的6种离子液体对产紫青霉(Penicillium purpurogenum Li-3)细胞生长、代谢、细胞膜透性和催化活性的影响.结果表明,[Bmim]Ac和[Bmim]Tf2N对菌体细胞的生长和代谢具有明显的抑制作用;6种离子液体均改善了细胞膜透性,其中以[Bmim]Ac最明显;全细胞催化反应实验表明,在分别含25%的疏水性离子液体[Bmim]PF6和[Bmim]Tf2N的2种介质体系中,甘草酸(GL)生物转化合成单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)的转化率分别为82.73%和89.84%,GAMG的产率分别为68.65%和76.23%,与不含离子液体的纯缓冲溶液体系相比(GL转化率和GAMG产率分别为81.82%和33.31%),GL的转化率均略有提高,而GAMG的产率则提高了2倍多,表明2种疏水性离子液体对全细胞催化反应的定向性具有明显促进作用;亲水性离子液体[Bmim]Ac,[Bmim]Cl和[Bmim]NO3对细胞的催化活性具有明显的抑制作用,而[Bmim]BF4的抑制作用则较弱.
- 李扬曹红欧阳巧凤李春郑兰兰张馨
- 关键词：离子液体阴离子全细胞
- 亲水性离子液体[EMIM]BF_4对固定化β-葡萄糖醛酸苷酶催化活性的影响被引量：8
- 2013年
- 以壳聚糖为固定化载体,采用吸附交联法制备固定化β-葡萄糖醛酸苷酶;以1-乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐([EMIM]BF4)/缓冲溶液均相体系为介质,研究了亲水性离子液体[EMIM]BF4对固定化酶生物催化甘草酸(GL)合成单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)的影响.实验结果表明,当均相体系中[EMIM]BF4的体积分数为16%,pH为5.4,反应温度为50℃及摇床转速为200 r/min时,酶活力达到最高,并且明显优于纯缓冲溶液体系中的最高酶活.重复利用性实验结果表明,与纯缓冲液介质体系相比,固定化酶在含亲水性离子液体[EMIM]BF4的均相介质中表现出较好的操作稳定性.表观动力学参数和活化能数据表明,亲水性离子液体[EMIM]BF4在催化体系中能够增强酶和底物GL的亲和力,有效稳定酶-底物的过渡态,并降低反应活化能,而使固定化β-葡萄糖醛酸苷酶表现出较高的催化活性.
- 曹红孙倩李春李开雄李军
- 关键词：催化活性甘草酸
- 壳聚糖微球吸附交联法固定β-葡萄糖醛酸苷酶被引量：1
- 2010年
- 以壳聚糖微球为载体,采用吸附-交联法将β-葡萄糖醛酸苷酶固定化,采用正交试验设计最佳固定化条件,β-葡萄糖醛酸苷酶的最佳固定化条件为:壳聚糖浓度2.0%、吸附时间12 h、戊二醛浓度0.58%、交联温度40℃、交联时间3 h,固定化酶的酶活回收率最高,可达到74.10%。
- 孙倩李开雄李春段海燕叶海曹红
- 关键词：Β-葡萄糖醛酸苷酶壳聚糖固定化
