国家教育部博士点基金(20060487046)
- 作品数：12 被引量：26H指数：3
- 相关作者：王建军赵峰周雪峰田玉科万黎更多>>
- 相关机构：华中科技大学福建省肿瘤医院武汉理工大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠蛋白激酶Cγ可控shRNA慢病毒的构建与鉴定
- 目的构建大鼠蛋白激酶Cγ(PKCγ)基因的可调控shRNA干扰慢病毒载体,并在细胞水平鉴定其可调控效率。方法将前期构建好的含大鼠PKCγ基因的shRNA干扰序列从质粒pLVTHM酶切和含tet-on可调控序列从质粒pLV...
- 刘峰肖兴鹏田玉科
- 关键词：蛋白激酶CΓ慢病毒
- 文献传递
- 血管内皮生长因子-C和人表皮因子受体2共沉默对人肺腺癌细胞生物学行为的影响被引量：3
- 2009年
- 目的观察靶向血管内皮生长因子-C（VEGF-C）、人表皮因子受体2（HER2／neu）基因的小干扰RNA（siRNA）转染对肺腺癌细胞株A549生物学行为的影响。方法构建靶向VEGF-C、HER2／neu的siRNA表达质粒，转染A549细胞，Transwell小室检测细胞体外侵袭能力，噻唑蓝（MTr）比色法检测细胞增殖活性，流式细胞术测定凋亡率。结果siVEGF-C组、siHER2／neu组、共转染组的细胞侵袭数分别为（42．76±2．87）、（47．10±3．63）、（40．50±3．21），显著低于阴性对照组（61．00±2．48，P〈0．01）；转染48h生长抑制率分别为（19．77±1．15）％、（22．98±2．13）％、（41．27±0．51）％，显著高于阴性对照组（4．99±0．14）％（P〈0．01）；转染48h肿瘤细胞凋亡率分别为（10．8±1．8）％、（11．7±1．5）％、（20．2±3．4）％，显著高于阴性对照组（2．6±0．7）％（P〈0．01）。与单独一种siRNA转染比较，联合转染肿瘤细胞生长抑制率增加（P〈0．01），凋亡率增加（P〈0．01）。结论靶向VEGF—C、HER2／neu的siRNA转染后可以显著降低A549细胞侵袭能力，抑制增殖，诱导细胞凋亡，共转染后对增殖和凋亡影响更显著。
- 周雪峰王建军王家顺赵峰
- 关键词：生物学
- Ⅲ期非小细胞肺癌新辅助化疗后手术的预后因素分析被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨Ⅲ期非小细胞肺癌(NSCLC)新辅助化疗后影响手术并发症和生存期的相关危险因素。方法:152例ⅢA、ⅢB期NSCLC患者接受新辅助化疗和手术,收集其术前功能性指标、分期、并发疾病、化疗方法、手术方式、术后并发症、生存期等资料,采用卡方检验、Kaplan-Meier和Cox比例风险模型分别分析影响术后并发症和生存期的危险因素。结果:单因素分析显示第1秒用力呼气量占预计值百分比(FEV1%,P=0.040)和术前并发疾病(P=0.020)对手术并发症的发生有影响。Kaplan-Meier生存分析分期(P=0.050)和是否全肺切除(P=0.018)对术后生存时间有影响。进一步多因素Cox回归分析示,只有全肺切除对术后生存时间有影响(P=0.026),而左、右全肺切除无区别(P>0.05)。结论:Ⅲ期NSCLC新辅助化疗的术后并发症危险因素是可接受的。全肺切除是影响患者生存期的高危因素。
- 吴昕漪方正于修义
- 关键词：非小细胞肺癌新辅助化疗手术预后
- 纳米羟基磷灰石可介导转染人肺癌A549细胞被引量：2
- 2009年
- 目的探讨纳米羟基磷灰石（nHAP）介导带有增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因的pGenesil-1质粒转染人肺癌A549细胞的可行性。方法用均相沉淀法制备nHAP;透射电镜观察纳米粒结构;经超声分散及碳酸钠预处理后,在pH值7.4环境下应用多聚赖氨酸（PLL）修饰nHAP;实验分为nHAP-PLL组、脂质体组及对照组,分别配制转染复合物并转染A549细胞;荧光显微镜观察EGFP的表达;流式细胞仪检测pGenesil-1的转染率。结果透射电镜下nHAP呈针状颗粒,粒径较均匀,约（15-20）nm×（60-80）nm,分散程度良好;nHAP-PLL组和脂质体组均见EGFP表达阳性的A549细胞,对照组未见EGFP表达阳性的A549细胞;nHAP-PLL组pGenesil-1转染A549细胞的转染率为（31.8±1.9）%,与脂质体组的转染率（33.4±3.7）%无差异,对照组未见转染阳性的A549细胞。结论nHAP经PLL表面修饰后可介导人肺癌A549细胞基因转染。
- 郑庆丰王建军应敏刚柳硕岩韩颖超
- 关键词：羟基磷灰石多聚赖氨酸转染效率A549细胞
- 针对半乳糖凝集素-3的siRNA抑制CD133＋肺腺癌细胞体外诱导CD8＋T细胞凋亡被引量：4
- 2010年
- 目的观察针对半乳糖凝集素（galectin）-3的特异性siRNA对CD133＋肺腺癌细胞功能的影响。方法实时荧光定量PCR技术（FQRT．PCR）和Westernblot检测siRNA对galectin．3的干扰效率，噻唑蓝（MTr）比色法检测siRNA对CD133＋肺腺癌细胞增殖的影响，AnnexinV和PI双染检测转染siRNA的CD133＋肺腺癌细胞上清诱导CD8＋T细胞凋亡能力。结果针对galectin-3的siRNA平均干扰效率为80．3％，明显降低CD133＋细胞中galeetin-3的表达，并抑制CD133＋细胞增殖，转染96h后细胞活率为未转染组的（75．0±3．5）％，凋亡检测结果表明转染siRNA的CD133＋肺腺癌细胞上清诱导CD8＋T细胞凋亡率为8．2％，与未转染组凋亡率18．6％比较诱导凋亡的能力明显下降，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论针对galectin-3的siRNA高效抑制galectin-3的表达，降低细胞的增殖能力及诱导CD8＋T细胞凋亡的能力，具有潜在的临床应用价值。
- 万黎王建军周雪峰赵峰范凯
- 关键词：GALECTIN脱噬作用
- PKCγ的功能概述被引量：1
- 2010年
- 蛋白激酶Cγ亚型(PKCγ)为PKC家族一员,它能在磷脂酰丝氨酸存在下被钙离子和二酰甘油激活,主要表达于中枢神经系统和外周神经元。PKCγ参与疼痛过敏和转导、海马区长时易化的改变、空间记忆学习和浦肯野细胞运动协调等。PKCγ基因点突变可诱发遗传性色素性视网膜炎、脊髓小脑共济失调和肿瘤等。
- 刘峰田玉科
- 关键词：N-甲基-D-天冬氨酸受体痛觉过敏
- Galectin-3在CD133＋肺腺癌细胞中表达增高诱导CD8＋T细胞凋亡被引量：1
- 2011年
- 目的检测肺腺癌CD133＋细胞中Galectin-3的表达。方法磁珠分选出10例患者肺腺癌中CD133＋细胞。流式细胞术检测分选效率，荧光实时定量聚合酶链反应（fqRT—PCR）和Westernblot检测CD133＋细胞中Galectin一3的表达，并在体外检测了CD133＋细胞上清诱导CD8＋T细胞凋亡的能力。结果流式细胞术结果表明磁珠分选出的细胞中CD133＋细胞数为90％。fqRT．PCR和Westernblot结果发现Galectin-3在CD133＋细胞中的表达量分别为CD133＋细胞中的1．24倍和1．5倍，差异有统计学意义（P〈0．05）。凋亡检测结果显示CD133＋细胞的上清诱导CD8＋T细胞凋亡率为（27．1±2．6）％，并且这种诱导凋亡的能力可被乳糖以及抗Galectin-3的抗体中和。结论Galectin-3在肺腺癌CD133＋细胞中高表达，并具有很强的生物学活性，在体外具有明显的诱导CD8＋T细胞凋亡的功能。
- 万黎王建军周雪峰赵峰范凯
- 关键词：CD133脱噬作用
- E—cadherin和MMP-7在食管癌组织中的表达及意义被引量：1
- 2009年
- 目的探讨E—cadherin和MMP-7在食管癌组织中的表达及与相关病理指标的关系。方法采用免疫组织化学sP法，应用HPLAS-1000型彩色图像分析系统，检测62例患者的食管癌组织、癌旁组织及正常食管组织中的E—cadherin和MMP-7的表达情况。结果E—cad．herin在食管癌组织中表达下降，MMP-7在食管癌组织中表达上升。E—cadherin的低表达和MMP-7的高表达与食管癌的TNM分期、分化程度和淋巴结转移均呈正相关。结论E—cadherin在食管癌组织中的低表达和／或MMP-7在食管癌组织中的高表达可能与食管癌发生发展有关。
- 万黎王建军赵峰周雪峰
- 关键词：MMP-7食管癌
- 骨癌痛大鼠脊髓背角蛋白激酶Cγ表达的变化被引量：3
- 2009年
- 目的探讨骨癌痛大鼠脊髓背角蛋白激酶Cγ（PKCγ）表达的变化。方法成年雌性Wistar大鼠48只，随机分为3组（n=16）：对照组、假手术组和骨癌痛组。对照组不给予任何处理，骨癌痛组右侧胫骨上部骨髓腔内注射Walker256乳腺癌细胞10μl制作骨癌痛模型；假手术组同部位注射热灭活的Walker256乳腺癌细胞10μl。各组于术前1d、术后3、6、9、12、15、18和21d时测定术侧后爪机械痛阈，并于术前1d、术后6、15和21d时各处死4只大鼠，取L4-6脊髓组织，采用免疫组化法测定脊髓背角PKCγ的表达水平。结果与术前1d时比较，骨癌痛组术后PKCγ表达上调，术后15d时达最大值（P〈0．05）；与对照组和假手术组比较，骨癌痛组术后机械痛阈降低，PKCγ表达上调（P〈0．05）；PKCγ表达水平与机械痛阂呈负相关（r=-0．984，P〈0．05）。结论骨癌痛大鼠脊髓背角PKCγ表达上调，该变化可能参与了骨癌痛的维持。
- 肖兴鹏曹菲杨少兵高峰田学愎陈莎莎刘希江田玉科
- 关键词：骨肿瘤蛋白激酶C脊髓
- 鞘内给予蛋白激酶Cγ基因短发夹RNA慢病毒载体对骨癌痛大鼠痛觉的影响被引量：1
- 2010年
- 目的 观察鞘内注射蛋白激酶Cγ（PKCγ）基因短发夹RNA（shRNA）慢病毒载体pLV-PKC2对骨癌痛大鼠痛觉的影响,探讨PKCγ基因shRNA对骨癌痛的镇痛效果.方法 选取成年雌性Wistar大鼠24只,随机分为四组：PKC组、骨癌痛组（CIBP组）、磷酸缓冲液组（PBS组）和对照组（C组）,每组6只.于骨癌痛模型制作前1 d、模型制作后每隔3天测定大鼠机械缩爪阈值和机械缩爪持续时间.使用免疫组织化学法检测大鼠脊髓背角PKCγ的表达.结果 PKC组大鼠鞘内注射慢病毒载体pLV-PKC2模型制作12 d后,各时点机械缩爪阈值较CIBP、PBS、C组明显升高;持续时间明显缩短（P〈0.05）.PKC组大鼠脊髓背角PKCγ蛋白表达量显著低于CIBP组（P〈0.05）.结论 慢病毒pLV-PKC2能明显降低骨癌痛大鼠脊髓背角PKCγ的蛋白表达量,同时具有显著的镇痛效应.
- 肖兴鹏曹菲许爱军高峰田学愎田玉科
- 关键词：骨癌痛蛋白激酶CΓ
