广东省自然科学基金(S2012010008129)
- 作品数：14 被引量：45H指数：4
- 相关作者：王大平黄江鸿段莉熊建义王泽民更多>>
- 相关机构：深圳市第二人民医院安徽医科大学汕头大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金中国博士后科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 携带低氧诱导因子1α慢病毒感染大鼠骨髓间充质干细胞后成骨基因的表达被引量：6
- 2014年
- 背景:人低氧诱导因子1α可调控其下游成骨及成血管基因的表达,具有提高成骨活性的作用。目的:观察携带人低氧诱导因子1α慢病毒感染的大鼠骨髓间充质干细胞中成骨基因表达情况。方法:通过RT-PCR方法从Hela细胞中获得低氧诱导因子1α,构建携带低氧诱导因子1α的慢病毒表达质粒Lenti-HIF-1α-eGFP,与LentiPac HIV混合包装质粒共包装293Ta细胞,获得病毒;采用全骨髓直接贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,使用流式细胞仪对骨髓间充质干细胞进行鉴定。分别在慢病毒感染骨髓间充质干细胞1,4,7,14 d后,用实时荧光定量PCR检测骨髓间充质干细胞中成骨基因骨形态发生蛋白2、骨钙蛋白、骨桥蛋白、碱性磷酸酶的表达水平。结果与结论:Lenti-HIF-1α-eGFP有效地感染骨髓间充质干细胞,实时荧光定量PCR检测结果显示成骨基因骨形态发生蛋白2、骨钙蛋白、骨桥蛋白、碱性磷酸酶在Lenti-HIF-1α-eGFP感染后第4天开始明显过表达,且持续至14 d。结果表明低氧诱导因子1α可以提高骨髓间充质干细胞的成骨活性。
- 付志杰张巨峰王大平陈洁琳段莉何美建李庆庆李文翠熊建义
- 关键词：干细胞骨髓干细胞低氧诱导因子1Α骨髓间充质干细胞成骨活性
- α-氰基丙烯酸丁酯类医用骨胶改性研究进展被引量：2
- 2014年
- α-氰基丙烯酸丁酯(BCA)类医用胶已广泛应用于临床手术,其在粉碎性难固定骨折治疗中的应用是目前骨组织工程研究的重要方向之一。目前α-BCA改性研究重点是复合有机或无机纳米材料,以提高复合材料黏合力、骨传导性能、细胞生物相容性及适宜的降解速率。该文就α-BCA类医用胶改性研究进展作一综述。
- 丁文斌徐伟力关炼雄黄江鸿王大平
- 关键词：骨形态发生蛋白
- 大鼠股骨缺损模型中BBP增强BMP-2的骨诱导作用被引量：1
- 2013年
- [目的]验证在大鼠节段性骨缺损模型中BBP对于rhBMP-2骨诱导作用的影响。[方法]70只缺损分别分成7组,每组不同剂量的rhBMP-2+/_1 000μg BBP,4、8周后分别摄片,动物8周后处死,股骨样本分别手工评估,采用uCT测量骨容积,随后分别采用组织学和生物力学分析。[结果]高剂量(10μg)rhBMP-2组术后8周可见骨愈合,骨缺损处骨的完全覆盖和桥接,但低剂量(5μg和2μg)rhBMP-2组术后8周骨愈合欠佳。与单独应用rhBMP-2相比,使用低剂量的rhBMP-2复合一定量的BBP可以取得更满意的骨形成量。BBP增强rhBMP-2的骨形成活性发生于4～8周时,而在术后早期并无明显作用。单纯应用BBP仅可见骨缺损处局部钙化,未见骨愈合。[结论]BBP能显著增强rhBMP-2的骨形成活性,这种增强作用需要一定时间来产生效果;其活性发生于术后4～8周时,在术后早期并无明显作用。而且BBP本身并没有骨诱导潜力,仅仅能增强rhBMP-2的骨形成活性。BBP起到缓释作用,与rhBMP-2紧密结合后,让rhBMP-2缓慢而持久的释放。
- 费志强熊建义刘志勇黄江鸿王大平沈慧勇黄德民梁加利
- 关键词：BMP-2股骨缺损骨愈合
- 关节软骨组织再生动物模型研究进展被引量：1
- 2014年
- 动物模型广泛用于开发和评估人类受损关节软骨重建的组织工程技术研究。关节软骨组织再生动物模型研究,旨在通过比较动物关节软骨损伤修复前后某项治疗措施对关节软骨功能解剖、组织学和机械力学等方面的影响,进一步评估该治疗措施对关节软骨再生的可能效应,为寻找人体关节软骨缺损有效治疗方法提供可靠的理论基础。每个动物模型均具有特定优点和缺点,能否匹配所要验证的研究假设是评价动物模型合理性的标准之一。该文就不同动物模型优缺点、动物模型与人体差异、动物模型选择要求、软骨缺损再生模型及临床应用展望作一综述。
- 王光辉段莉黄江鸿王泽民王大平
- 关键词：关节软骨动物模型
- 磁性纳米多孔复合支架材料的细胞相容性研究被引量：2
- 2014年
- 目的研究磁性纳米多孔复合(n-HA/PLLA/Fe2O3)材料的细胞相容性,探讨细胞在材料表面黏附、增殖、表达等生物学行为,为其医学应用提供实验依据。方法将大鼠成骨细胞与磁性纳米多孔复合材料共培养,采用CCK-8法检测细胞增殖、扫描电镜观察细胞在材料上的黏附、RT-PCR检测I型胶原和骨钙素基因的表达。结果 CCK-8检测显示实验组磁性纳米多孔复合材料上细胞的增殖与空白对照组没有差异性(>0.05);扫描电镜观察到细胞在磁性纳米多孔复合材料的表面和孔隙内大量黏附、增殖和生长,随着共培养时间的增加,材料表面的细胞数量明显增多;RT-PCR显示随着共培养时间的增加,I型胶原基因的表达增强(<0.05),骨钙素的表达无明显差异(>0.05)。结论磁性纳米多孔复合支架材料适于成骨细胞的黏附、生长和分化,具有良好的细胞相容性。
- 黄江鸿段莉陈洁琳陈洁琳朱伟民熊建义
- 关键词：磁性多孔成骨细胞细胞相容性
- 软骨组织工程支架材料研究进展被引量：5
- 2014年
- 软骨组织工程支架材料中天然高分子材料、人工合成高分子材料和复合材料,均有独特的理化性质,结合不同材料特点制成合适的支架材料对软骨组织工程研究十分关键。该文就近年软骨组织工程支架材料研究进展作一简要综述。
- 徐伟力朱伟民黄江鸿丁文斌王大平
- 关键词：软骨组织工程人工合成材料复合材料
- 组蛋白去乙酰化调控软骨细胞Ⅱ型胶原表达的机理研究
- 2015年
- 目的：探讨通过TSA抑制组蛋白去乙酰化水平，研究组蛋白去乙酰化对软骨细胞表型相关基因的影响及其机制，从表观遗传学角度为维持软骨细胞表型提供新的思路。方法体外培养人关节软骨细胞，建立软骨细胞去分化模型，采用不同浓度TSA刺激，在不同时间点收集细胞，提取总RNA，利用qRT-PCR检测Wnt-5a、SOX-9、COL-Ⅱ、COL-Ⅰ的mRNA表达情况。利用免疫荧光及Westerblot进行COL-Ⅱ蛋白表达水平的检测。结果与对照组比较，TSA（0.25~1.0μmol/L）显著降低COL-ⅡmRNA表达水平及蛋白表达水平，升高Wnt-5a和SOX-9 mRNA表达水平；抑制Wnt-5a信号通路减弱TSA对COL-Ⅱ的抑制效应。结论 TSA通过激活Wnt-5a和SOX-9从而抑制COL-Ⅱ的表达，导致软骨细胞表型丧失。因此，组蛋白去乙酰化通过降低Wnt-5a和SOX-9，升高COL-Ⅱ的表达水平，发挥维持软骨细胞表型的作用。
- 王光辉段莉梁宇杰费志强王大平
- 关键词：组蛋白去乙酰化TSA软骨细胞
- 人脐血间充质干细胞培养方法的比较被引量：2
- 2014年
- 背景:脐血中含丰富的间充质干细胞,可以作为组织工程中一种新的种子细胞来源。目的:应用两种培养基体外培养、扩增、分离纯化脐血间充质干细胞,比较其生物学特性的差异。方法:无菌条件下采取40份足月顺产的脐血,肝素抗凝。应用Ficoll密度梯度离心法分离脐血单核细胞,随机分为两组,其中20份用MesenGro人间充质干细胞培养基进行培养,20份用DMEM培养基进行培养。对比两组梭形的间充质干细胞出现时间、细胞集落出现时间、培养时间、原代细胞数量。选用生长情况良好的原代脐血间充质干细胞,用流式细胞仪检测间充质干细胞表面特异性标记表达情况。结果与结论:MesenGro组梭形的间充质干细胞平均出现时间、细胞集落平均出现时间、原代细胞平均培养时间、原代细胞平均数量为均优于DMEM组(P<0.01)。流式细胞仪检测显示,培养的细胞强表达间充质干细胞表面标志CD73和CD105,阳性率99.1%,不表达造血干细胞表面标志CD45和CD34,阴性率99.3%。结果提示在培养间充质干细胞的数量、形态、生长速度和培养时间诸方面,MesenGro人间充质干细胞培养基均优于DMEM培养基。选用MesenGro人间充质干细胞培养基可以更纯、更快、更好地从脐血中培养出表达间充质干细胞表面标志的细胞。
- 黄宏宇刘国平段莉陈云芳熊建义王大平
- 关键词：干细胞脐血间充质干细胞DMEM培养基
- 自体软骨细胞移植术治疗关节软骨损伤的研究进展被引量：15
- 2015年
- 关节软骨再生能力非常有限。目前临床上治疗关节软骨损伤常采用自体软骨细胞移植术(autologous chondrocyte implantation,ACI),其临床效果已得到肯定,但仍不十分理想。随着软骨细胞体外培养、软骨组织工程等相关学科及技术的发展,自体软骨细胞移植术已得到很大改进。然而,要达到理想的透明软骨组织完全修复关节软骨缺损仍有差距。本文从ACI技术的临床效果、软骨细胞体外培养、软骨组织工程、组织学评价和移植后软骨细胞示踪五个方面进行综述。
- 王泽民黄江鸿段莉王光辉王大平
- 关键词：自体软骨细胞移植软骨损伤
- Runx2及其在骨组织工程中的应用被引量：6
- 2014年
- Runx2在成骨分化信号转导通路中起核心作用,能够诱导骨髓间充质干细胞(BMSC)向成骨细胞定向分化并促进成骨细胞和软骨细胞成熟,从而促进骨愈合,被视为骨组织工程中最具有应用前景的转录因子之一。利用携带Runx2基因的腺病毒载体感染BMSC,使BMSC中Runx2蛋白表达增高,并将BMSC复合于骨材料上以提高骨性愈合效率,已成为骨组织工程研究新热点。该文就Runx2及其在骨组织工程中应用研究进展作一综述。
- 李庆庆黄江鸿何美健赵忠玮王大平
- 关键词：RUNX2成骨分化
